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氯喹通过影响胰腺癌细胞自噬和线粒体功能对吉西他滨耐药细胞的作用及其机制
被引量：
2
1
作者
陆路
黎东明
+4 位作者
王学国
宋丹
王太成
赵红岩
吴晓勇
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期926-933,共8页
目的:探讨氯喹(CQ)对吉西他滨(GEM)耐药胰腺癌(PC)细胞的影响,阐明其相关作用机制。方法:利用低浓度依次递增法建立GEM耐药PC PANC1细胞株(PANC1/GEM),分为GEM耐药(PANC1/GEM)组、 CQ组和GEM耐药组+CQ (PANC1/GEM+CQ)组,并以PANC1细胞...
目的:探讨氯喹(CQ)对吉西他滨(GEM)耐药胰腺癌(PC)细胞的影响,阐明其相关作用机制。方法:利用低浓度依次递增法建立GEM耐药PC PANC1细胞株(PANC1/GEM),分为GEM耐药(PANC1/GEM)组、 CQ组和GEM耐药组+CQ (PANC1/GEM+CQ)组,并以PANC1细胞为对照组。CCK-8法验证PANC1/GEM细胞株是否成功建立;透射电子显微镜下观察各组细胞中自噬小体数量,Western blotting法检测自噬标志蛋白胞浆型微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅰ)、膜型微管相关蛋白1轻链3 (LC3-Ⅱ)和P62蛋白表达水平,分别应用JC-1法、DCFHDA法和AnnexinⅤ-FITC/PI双染法采用流式细胞仪检测各组细胞中线粒体膜电位、活性氧(ROS)水平和细胞凋亡率,采用Western blotting法检测各组细胞中B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (Cleaved caspase-3)蛋白表达水平。结果:成功建立PANC1/GEM细胞株,与PANC1细胞比较,GEM对PANC1/GEM细胞的半数抑制浓度(IC50)明显增加(P<0.01)。与对照组比较,PANC1/GEM组、CQ组和PANC1/GEM+CQ组细胞中自噬小体数量明显增加且LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均明显升高(P<0.05),PANC1/GEM组和PANC1/GEM+CQ组细胞中P62蛋白表达水平明显降低(P<0.05),CQ组细胞中P62蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与PANC1/GEM组比较,PANC1/GEM+CQ组细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显降低(P<0.05),P62蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与对照组比较,PANC1/GEM组和PANC1/GEM+CQ组细胞线粒体膜电位、ROS水平和细胞凋亡率明显降低(P<0.05),CQ组细胞线粒体膜电位、ROS水平和细胞凋亡率明显升高(P<0.05);与PANC1/GEM组比较,PANC1/GEM+CQ组细胞线粒体膜电位、ROS水平和细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。与对照组比较,PANC1/GEM组和PANC1/GEM+CQ组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平明显降低(P<0.05), CQ组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与PANC1/GEM组比较,PANC1/GEM+CQ组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:CQ能够明显促进耐药PC细胞对GEM的敏感性,其机制可能与抑制PC细胞自噬,降低细胞线粒体膜电位,促进细胞中ROS的产生,从而上调GEM所诱导的细胞凋亡有关。
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关键词
氯喹
胰腺肿瘤
吉西他滨
耐药细胞
细胞自噬
线粒体
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职称材料
题名
氯喹通过影响胰腺癌细胞自噬和线粒体功能对吉西他滨耐药细胞的作用及其机制
被引量：
2
1
作者
陆路
黎东明
王学国
宋丹
王太成
赵红岩
吴晓勇
机构
海南医学院第二附属医院肝胆胰外科
出处
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期926-933,共8页
基金
海南省卫健委卫生健康行业科研项目(19A200007)。
文摘
目的:探讨氯喹(CQ)对吉西他滨(GEM)耐药胰腺癌(PC)细胞的影响,阐明其相关作用机制。方法:利用低浓度依次递增法建立GEM耐药PC PANC1细胞株(PANC1/GEM),分为GEM耐药(PANC1/GEM)组、 CQ组和GEM耐药组+CQ (PANC1/GEM+CQ)组,并以PANC1细胞为对照组。CCK-8法验证PANC1/GEM细胞株是否成功建立;透射电子显微镜下观察各组细胞中自噬小体数量,Western blotting法检测自噬标志蛋白胞浆型微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅰ)、膜型微管相关蛋白1轻链3 (LC3-Ⅱ)和P62蛋白表达水平,分别应用JC-1法、DCFHDA法和AnnexinⅤ-FITC/PI双染法采用流式细胞仪检测各组细胞中线粒体膜电位、活性氧(ROS)水平和细胞凋亡率,采用Western blotting法检测各组细胞中B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (Cleaved caspase-3)蛋白表达水平。结果:成功建立PANC1/GEM细胞株,与PANC1细胞比较,GEM对PANC1/GEM细胞的半数抑制浓度(IC50)明显增加(P<0.01)。与对照组比较,PANC1/GEM组、CQ组和PANC1/GEM+CQ组细胞中自噬小体数量明显增加且LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均明显升高(P<0.05),PANC1/GEM组和PANC1/GEM+CQ组细胞中P62蛋白表达水平明显降低(P<0.05),CQ组细胞中P62蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与PANC1/GEM组比较,PANC1/GEM+CQ组细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显降低(P<0.05),P62蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与对照组比较,PANC1/GEM组和PANC1/GEM+CQ组细胞线粒体膜电位、ROS水平和细胞凋亡率明显降低(P<0.05),CQ组细胞线粒体膜电位、ROS水平和细胞凋亡率明显升高(P<0.05);与PANC1/GEM组比较,PANC1/GEM+CQ组细胞线粒体膜电位、ROS水平和细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。与对照组比较,PANC1/GEM组和PANC1/GEM+CQ组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平明显降低(P<0.05), CQ组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与PANC1/GEM组比较,PANC1/GEM+CQ组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:CQ能够明显促进耐药PC细胞对GEM的敏感性,其机制可能与抑制PC细胞自噬,降低细胞线粒体膜电位,促进细胞中ROS的产生,从而上调GEM所诱导的细胞凋亡有关。
关键词
氯喹
胰腺肿瘤
吉西他滨
耐药细胞
细胞自噬
线粒体
Keywords
chloroquine
pancreatic neoplasms
gemcitabine
resistant cells
autophagy
mitochondria
分类号
R735.9 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
氯喹通过影响胰腺癌细胞自噬和线粒体功能对吉西他滨耐药细胞的作用及其机制
陆路
黎东明
王学国
宋丹
王太成
赵红岩
吴晓勇
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2021
2
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