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编码IL-7的溶瘤疱疹病毒通过激活CD8^(+)T细胞增强对肝癌的杀伤活性 被引量:1
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作者 黎东明 李鹏 +3 位作者 陆路 王学国 王太成 赵红岩 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期122-126,共5页
目的:探究分泌IL-7的溶瘤疱疹病毒(HSV)是否可以通过激活CD8^(+)T细胞抑制肝癌生长。方法:Western blot检测IL-7表达情况;结晶紫染色法检测溶瘤病毒HSV以及HSV-IL-7对肿瘤细胞的体外裂解情况;皮下移植瘤模型检测HSV以及HSV-IL-7对肿瘤... 目的:探究分泌IL-7的溶瘤疱疹病毒(HSV)是否可以通过激活CD8^(+)T细胞抑制肝癌生长。方法:Western blot检测IL-7表达情况;结晶紫染色法检测溶瘤病毒HSV以及HSV-IL-7对肿瘤细胞的体外裂解情况;皮下移植瘤模型检测HSV以及HSV-IL-7对肿瘤的抑制能力;ELISA法检测血清以及肿瘤组织中IL-7、IFN-γ、TNF-α含量;免疫组化法检测肿瘤组织中CD8^(+)T细胞的浸润情况;流式细胞术检测肿瘤浸润CD8^(+)T细胞Granzyme B的分泌水平。结果:HSV-IL-7感染的肿瘤细胞均高表达IL-7;HSV以及HSV-IL-7在体外均可以有效裂解B16-F10、CT-26以及H22肿瘤细胞系,且具有剂量依赖性;HSV-IL-7可以显著抑制H22肝癌细胞的体内生长(P<0.01),延长荷瘤小鼠的生存期(P<0.001);HSV-IL-7可以显著提高肿瘤部位IL-7的含量(P<0.0001),同时有效增加肿瘤浸润CD8^(+)T细胞的数目(P<0.001);HSV-IL-7可以显著增强肿瘤浸润CD8^(+)T细胞分泌Gran-zyme B的能力以及增加肿瘤组织中IFN-γ和TNF-α含量(P<0.0001)。结论:HSV-IL-7在体内外均具有良好的肿瘤抑制活性,同时其可以通过分泌IL-7,激活体内CD8^(+)T细胞的抗肿瘤性,从而进一步抑制肿瘤生长并延长荷瘤小鼠的生存期。 展开更多
关键词 肝癌 溶瘤病毒 单纯疱疹病毒 IL-7 T细胞
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USP10对KLF4蛋白的调控及对肝细胞癌侵袭的影响 被引量:1
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作者 陆路 黎东明 +4 位作者 王学国 冉博 王太成 赵红岩 李鹏 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第7期1181-1187,共7页
目的探究泛素特异蛋白酶10(USP10)对肝细胞癌(HCC)中Krüppe样因子4(KLF4)蛋白的调控及对HCC细胞增殖与侵袭的影响。方法采用Western blot实验检测USP10和KLF4在人正常肝细胞系L02和HCC细胞系HepG2、HUH7、HCCLM3等中的表达差异。选... 目的探究泛素特异蛋白酶10(USP10)对肝细胞癌(HCC)中Krüppe样因子4(KLF4)蛋白的调控及对HCC细胞增殖与侵袭的影响。方法采用Western blot实验检测USP10和KLF4在人正常肝细胞系L02和HCC细胞系HepG2、HUH7、HCCLM3等中的表达差异。选取HCCLM3和HUH7细胞,将过表达或沉默USP10的慢病毒颗粒(oe-USP10或sh-USP10)转染入细胞中,并将其记为oe-USP10组和oe-NC组。免疫共沉淀(Co-IP)实验检测HCCLM3或HUH7细胞中USP10是否可与KLF4直接结合。加入蛋白酶体抑制剂MG132,再次使用Co-IP检测转染oe-USP10或sh-USP10的HCCLM3和HUH7细胞中KLF4蛋白的泛素化水平。将过表达KLF4的pcDNA3.1载体质粒及其阴性对照质粒(pc-KLF4或pc-NC)共转染入HCCLM3和HUH7的sh-USP10组或sh-NC组细胞中,并将细胞记为sh-NC+pc-NC组、sh-USP10+pc-NC组、sh-NC+pc-KLF4组和sh-USP10+pc-KLF4组,采用CCK-8法检测HCCLM3和HUH7中各组细胞的增殖活力,Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力。结果与L02细胞比较,USP10和KLF4在HepG2、HUH7、HCCLM3等细胞中蛋白表达均降低(P<0.05)。在HCCLM3和HUH7细胞中,USP10蛋白可直接与KLF4相互结合。同时,MG132处理后,HCCLM3和HUH7细胞中KLF4蛋白表达量呈时间依赖性增加。沉默USP10可增加HCCLM3与HUH7细胞中KLF4的泛素化,过表达USP10可降低上述细胞中KLF4的泛素化水平。与sh-NC+pc-NC组比较,sh-USP10+pc-NC组中HCCLM3和HUH7的增殖和侵袭能力均升高(P<0.01),而sh-NC+pc-KLF4组和sh-USP10+pc-KLF4组的HCCLM3或HUH7细胞增殖和侵袭能力均降低(P<0.05);与sh-USP10+pc-NC组比较,sh-USP10+pc-KLF4组细胞的增殖和侵袭能力均降低(P<0.05)。结论在HCC细胞中USP10通过去泛素化促进KLF4蛋白稳定性,进而抑制肿瘤细胞的增殖与侵袭。 展开更多
关键词 肝细胞癌 泛素特异蛋白酶10 去泛素化 Krüppe样因子4
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利胃护肠汤对胆囊结石手术术后胃肠功能恢复的影响 被引量:16
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作者 王太成 宋文渊 +1 位作者 黎东明 赵红岩 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第5期1237-1239,共3页
目的:分析利胃护肠汤对胆囊结石手术患者术后胃肠功能恢复的影响。方法:进行腹腔镜保胆取石术治疗的胆囊结石患者82例,根据术后治疗方法不同分为对照组和观察组。对照组患者术后采用常规治疗,观察组患者术后采用常规治疗+利胃护肠汤,分... 目的:分析利胃护肠汤对胆囊结石手术患者术后胃肠功能恢复的影响。方法:进行腹腔镜保胆取石术治疗的胆囊结石患者82例,根据术后治疗方法不同分为对照组和观察组。对照组患者术后采用常规治疗,观察组患者术后采用常规治疗+利胃护肠汤,分析两组患者治疗后的临床效果。结果:观察组患者开始进食时间、肠鸣音恢复时间、肛门排便时间及住院时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组患者胃肠激素水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗3 d、7 d,观察组患者GAS、MTL水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组患者胆囊壁厚度、胆囊收缩功能水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,观察组患者胆囊收缩功能高于对照组,胆囊壁厚度低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者并发症率为4.88%,对照组为19.51%,观察组患者并发症率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:利胃护肠汤可改善胆囊结石手术患者胆囊壁厚度,促进GAS、MTL水平的恢复,缩短住院时间,且安全性高。 展开更多
关键词 利胃护肠汤 胆囊结石 保胆取石术 胃肠激素 安全性
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参麦注射液联合曲美他嗪治疗老年舒张性心力衰竭的疗效及对血浆脑钠肽和舒张功能的影响 被引量:11
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作者 梁荣珍 林莉 +2 位作者 王太成 黄明龙 邱世光 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2018年第8期1897-1900,共4页
目的:探讨参麦注射液联合曲美他嗪治疗老年舒张性心力衰竭的疗效及对血浆脑钠肽和舒张功能的影响。方法:选择2013年10月_2016年6月之间在医院进行治疗的舒张性心力衰竭的老年患者114例,按照随机数字的方法分为对照组和观察组,每组5... 目的:探讨参麦注射液联合曲美他嗪治疗老年舒张性心力衰竭的疗效及对血浆脑钠肽和舒张功能的影响。方法:选择2013年10月_2016年6月之间在医院进行治疗的舒张性心力衰竭的老年患者114例,按照随机数字的方法分为对照组和观察组,每组57例,所有患者均进行常规西医治疗,对照组患者在常规用药基础上使用曲美他嗪,观察组患者在对照组患者治疗方法基础上使用参麦注射液,对治疗的效果进行对比。结果:完成治疗后,两组患者的左心室等容舒张时间(IVRT),二尖瓣口舒张早期的充盈速度(E)峰值与舒张末期的充盈速度(A)峰值,E/A,E峰减速时间(DT)与血浆脑钠肽数据均出现改善,但是观察组患者改善的程度高于对照组患者,数据差异具有统计学意义(t=3.317,9.323,4.561,8.253,4.689,7.502,P〈0.05),观察组患者的治疗效果优于对照组患者,数据差异具有统计学意义(z=6.103,P〈0.05),两组患者的各项不良反应数据差异均不具有统计学意义(P〉0.05)。结论:利用参麦注射液联合曲关他嗪的方法对舒张性心力衰竭的老年患者进行治疗,可以改善患者的心室舒张功能与血浆脑钠肽指标,提高治疗效果,值得在临床工作中应用。 展开更多
关键词 参麦注射液 曲美他嗪 舒张性心力衰竭
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氯喹通过影响胰腺癌细胞自噬和线粒体功能对吉西他滨耐药细胞的作用及其机制 被引量:2
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作者 陆路 黎东明 +4 位作者 王学国 宋丹 王太成 赵红岩 吴晓勇 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期926-933,共8页
目的:探讨氯喹(CQ)对吉西他滨(GEM)耐药胰腺癌(PC)细胞的影响,阐明其相关作用机制。方法:利用低浓度依次递增法建立GEM耐药PC PANC1细胞株(PANC1/GEM),分为GEM耐药(PANC1/GEM)组、 CQ组和GEM耐药组+CQ (PANC1/GEM+CQ)组,并以PANC1细胞... 目的:探讨氯喹(CQ)对吉西他滨(GEM)耐药胰腺癌(PC)细胞的影响,阐明其相关作用机制。方法:利用低浓度依次递增法建立GEM耐药PC PANC1细胞株(PANC1/GEM),分为GEM耐药(PANC1/GEM)组、 CQ组和GEM耐药组+CQ (PANC1/GEM+CQ)组,并以PANC1细胞为对照组。CCK-8法验证PANC1/GEM细胞株是否成功建立;透射电子显微镜下观察各组细胞中自噬小体数量,Western blotting法检测自噬标志蛋白胞浆型微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅰ)、膜型微管相关蛋白1轻链3 (LC3-Ⅱ)和P62蛋白表达水平,分别应用JC-1法、DCFHDA法和AnnexinⅤ-FITC/PI双染法采用流式细胞仪检测各组细胞中线粒体膜电位、活性氧(ROS)水平和细胞凋亡率,采用Western blotting法检测各组细胞中B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (Cleaved caspase-3)蛋白表达水平。结果:成功建立PANC1/GEM细胞株,与PANC1细胞比较,GEM对PANC1/GEM细胞的半数抑制浓度(IC50)明显增加(P<0.01)。与对照组比较,PANC1/GEM组、CQ组和PANC1/GEM+CQ组细胞中自噬小体数量明显增加且LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均明显升高(P<0.05),PANC1/GEM组和PANC1/GEM+CQ组细胞中P62蛋白表达水平明显降低(P<0.05),CQ组细胞中P62蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与PANC1/GEM组比较,PANC1/GEM+CQ组细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显降低(P<0.05),P62蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与对照组比较,PANC1/GEM组和PANC1/GEM+CQ组细胞线粒体膜电位、ROS水平和细胞凋亡率明显降低(P<0.05),CQ组细胞线粒体膜电位、ROS水平和细胞凋亡率明显升高(P<0.05);与PANC1/GEM组比较,PANC1/GEM+CQ组细胞线粒体膜电位、ROS水平和细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。与对照组比较,PANC1/GEM组和PANC1/GEM+CQ组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平明显降低(P<0.05), CQ组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与PANC1/GEM组比较,PANC1/GEM+CQ组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:CQ能够明显促进耐药PC细胞对GEM的敏感性,其机制可能与抑制PC细胞自噬,降低细胞线粒体膜电位,促进细胞中ROS的产生,从而上调GEM所诱导的细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 氯喹 胰腺肿瘤 吉西他滨 耐药细胞 细胞自噬 线粒体
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