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低氧诱导巨噬细胞高表达TREM-1外泌体以促进卵巢癌细胞的EMT、侵袭及迁移
1
作者 陈韩 杨江怡 +2 位作者 陈华 黄芬 韩锋 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第10期2475-2481,共7页
目的:探究低氧(HYP)条件对巨噬细胞外泌体(Exo)中髓系细胞触发受体-1(TREM-1)表达的影响及TREM-1对卵巢癌细胞生物学行为的影响。方法:采用免疫组织化学染色法检测TREM-1在27例上皮性卵巢癌组织和30例卵巢良性囊肿中的表达;采用化学诱... 目的:探究低氧(HYP)条件对巨噬细胞外泌体(Exo)中髓系细胞触发受体-1(TREM-1)表达的影响及TREM-1对卵巢癌细胞生物学行为的影响。方法:采用免疫组织化学染色法检测TREM-1在27例上皮性卵巢癌组织和30例卵巢良性囊肿中的表达;采用化学诱导法将人单核细胞系THP-1诱导为巨噬细胞,并将沉默TREM-1的siRNA转染HYP条件下分化的巨噬细胞;分离源于常氧(NOR)与HYP的巨噬细胞Exo,将其与卵巢癌细胞SKOV3进行共培养;将细胞分为NOR-Exo组,HYPExo-siRNA组,HYP-Exo-siTREM-1组和Control组;采用Transwell、划痕实验和Western blot分别检测各组卵巢癌细胞侵袭、迁移、上皮-间质转化(EMT)能力和细胞中TREM-1蛋白表达及NF-κB、ERK1/2和AKT信号通路中P65、ERK1/2及AKT的蛋白磷酸化水平。结果:与卵巢良性囊肿相比,TREM-1在卵巢癌巨噬细胞中的表达显著增加(P<0.05);与NOR相比,HYP能显著促进TREM-1在巨噬细胞及其Exo中的表达(P<0.05)。与Control组相比,HYP-Exo-siRNA组和HYP-Exo-siTREM-1组细胞的侵袭、迁移与EMT能力和细胞中P65、ERK1/2及AKT的蛋白磷酸化水平均明显升高(P<0.05),NOR-Exo组无明显改变(P>0.05);与HYP-Exo-siRNA组相比,NOR-Exo组与HYP-Exo-siTREM-1组中上述检测指标均明显降低(P<0.05)。结论:HYP能通过促进巨噬细胞高表达TREM-1的Exo上调卵巢癌细胞的EMT、侵袭和迁移能力,可能与NF-κB、ERK1/2、AKT信号通路激活有关。 展开更多
关键词 卵巢癌 髓系细胞触发受体-1 巨噬细胞 外泌体 侵袭
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临床特征、实验室指标和治疗方案对多发性骨髓瘤患者预后影响的研究 被引量：19
2
作者 徐璐 陈峙霖 +3 位作者 胡敏 陶石 陈瑜 苏群豪 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期1166-1172,共7页
目的:研究临床病理特征、实验室指标和治疗方案对多发性骨髓瘤患者预后的影响。方法:对本院血液科收治的97例均行化疗的多发性骨髓瘤患者的临床资料进行回顾性分析,记录患者临床病理特征(年龄、性别、重度贫血、轻链型、低蛋白血症、截... 目的:研究临床病理特征、实验室指标和治疗方案对多发性骨髓瘤患者预后的影响。方法:对本院血液科收治的97例均行化疗的多发性骨髓瘤患者的临床资料进行回顾性分析,记录患者临床病理特征(年龄、性别、重度贫血、轻链型、低蛋白血症、截瘫、肾损伤、淀粉样变、复杂核型、骨病分级、美国东部肿瘤协作组体力状况评分、获得完全缓解等)、实验室指标(C反应蛋白、乳酸脱氢酶、血钙、血β2微球蛋白等)、治疗方案(沙利度胺维持治疗)等指标的情况。随访1-60个月,记录患者总生存期。采用单因素和多因素分析患者总生存期和早期死亡的影响因素,通过Kaplan-Meier法绘制生存曲线,并采用Log-rank检验进行生存分析。结果:97例患者中,获得完全缓解29例(29.90%),部分缓解56例(57.73%),总有效率为87.63%(85/97)。截止至末次随访时间,死亡19例(19.59%),1、3、5年生存率分别为80.41%、71.13%、37.11%。中位总生存期29(1-60)个月。单因素分析结果显示,年龄、低蛋白血症、重度贫血、截瘫、肾损伤、淀粉样变、复杂核型、获得完全缓解、沙利度胺维持治疗等均是患者预后的影响因素(P<0.05);进一步行多因素Logistic回归分析结果显示,年龄、低蛋白血症、重度贫血、截瘫、淀粉样变、复杂核型、沙利度胺维持治疗均是患者预后的影响因素(P<0.05)。97例患者中,早期死亡8例。单因素分析结果发现,淀粉样变、重度贫血均是患者早期死亡的危险因素(P<0.05);进一步行多因素Logistic回归分析结果显示,淀粉样变是患者早期死亡的独立危险因素(P<0.05)。结论:多发性骨髓瘤患者存在诸多影响预后效果的不良因素,如高龄、伴有低蛋白血症、重度贫血、截瘫、淀粉样变、复杂核型等,其中伴有淀粉样变的患者早期死亡的风险性较高,而采取沙利度胺维持治疗有助于延长患者的生存时间。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 病理特征 实验室指标 治疗方案 临床预后
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非小细胞肺癌合并静脉血栓栓塞症危险因素分析 被引量：6
3
作者 王燕玲 何丽 +4 位作者 王燕燕 肖艳 黄美珠 向英 吴美燕 《中国医学前沿杂志（电子版）》 2017年第8期126-129,共4页
目的分析非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)合并静脉血栓栓塞症(venous thromboem-bolism,VTE)的危险因素,为防治NSCLC患者并发VTE提供参考依据。方法回顾性分析本院2013年7月至2016年7月收治的274例NSCLC患者的临床资料... 目的分析非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)合并静脉血栓栓塞症(venous thromboem-bolism,VTE)的危险因素,为防治NSCLC患者并发VTE提供参考依据。方法回顾性分析本院2013年7月至2016年7月收治的274例NSCLC患者的临床资料,按照VTE发生情况将患者纳入VTE组和非VTE组,比较两组患者一般资料、血清学指标及凝血状态的差异,将存在统计学差异的因素纳入多因素Logistic回归分析,总结影响NSCLC患者合并VTE的危险因素。结果 274例患者中,181例患者发生VTE,VTE发生率为66.06%。两组患者年龄、性别、体重指数、吸烟史、饮酒史、血型、病理类型、美国东部协作肿瘤组(Eastern Cooperative Oncology Group,ECOG)体能状态评分、治疗方案、肿瘤分期比较均有显著差异(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,年龄≥60岁、腺癌、ECOG体能状态评分≥2分、化疗、总胆固醇水平>5.2 mmol/L、甘油三酯水平>1.7 mmol/L及D-二聚体水平≥0.5 mg/L是NSCLC患者合并VTE的独立危险因素(P<0.05)。结论 NSCLC患者VTE的发生率较高,且与年龄、体力状态、治疗方案、血脂水平及凝血功能密切相关,可据此评价患者VTE发生风险并予以对症干预,降低VTE发生率。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 静脉血栓栓塞症 危险因素
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体外不完全射频消融后肝癌细胞上皮-间质转化相关长链非编码RNA差异表达 被引量：1
4
作者 曾江正 蔡兴锐 +4 位作者 黄芬 雷俊华 何志惠 孙华茂 卢彦达 《介入放射学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第9期823-829,共7页
目的研究上皮-间质转化(EMT)相关长链非编码RNA(LncRNA)在不完全射频消融(RFA)肝细胞癌(HCC)病灶的差异表达谱变化。方法采用Huh7细胞47℃水浴加热,获取体外模拟的不完全RFA HCC细胞。镜下及免疫印迹检测Huh7-H细胞EMT改变,Transwell检... 目的研究上皮-间质转化(EMT)相关长链非编码RNA(LncRNA)在不完全射频消融(RFA)肝细胞癌(HCC)病灶的差异表达谱变化。方法采用Huh7细胞47℃水浴加热,获取体外模拟的不完全RFA HCC细胞。镜下及免疫印迹检测Huh7-H细胞EMT改变,Transwell检测细胞迁移与侵袭能力,CCK-8检测细胞增殖能力。采用Lnc Path^(TM) Human EMT Array芯片分析Huh7-H和Huh7差异表达的EMT相关LncRNA,RT-PCR验证。结果镜下显示Huh7-H呈现EMT形态学改变。免疫印迹检测显示Huh7-H细胞上皮表型标志分子E-cadherin表达降低,间质表型标志分子N-cadherin、vimentin表达增加。Transwell迁移及侵袭实验显示,Huh7-H、Huh7穿膜细胞数分别为(138.0±11.8)和(61.0±5.2)、(82.7±39.4)和(33.3±7.8),Huh7-H细胞迁移及侵袭能力明显增强(P<0.05)。CCK-8检测显示Huh7-H细胞增殖能力明显增强(P<0.05)。Lnc Path^(TM) Human EMT Array芯片筛选出3个差异表达LncRNA(P≤0.05,变化倍数≥1.5),即2条LncRNA(FUNDC2P4、RPL27P7)下调,1条LncRNA(MTND4LP14)上调。RT-PCR验证HUH7-H组FUNDC2P4、RPL27P7、MTND4LP14基因表达丰度分别是HUH-7组的0.137、0.869、1.037倍。临床标本验证LncRNA FUNDC2P4在癌旁组织表达高于HCC组织,HCC组织高于RFA术后残余HCC组织。结论筛选出不完全RFA后HCC细胞低表达的EMT相关LncRNA FUNDC2P4,为深入探讨该基因功能及分子机制提供了基础。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 射频消融术 肝癌 上皮-间质转化
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基于表观遗传因子的肝细胞癌预后模型的构建和验证 被引量：2
5
作者 张海航 曾江正 +4 位作者 朱旭 孙华茂 杨璐 付裕 卢彦达 《海南医学院学报》 CAS 2022年第12期910-920,共11页
目的:探究肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)预后相关的miRNA和表观因子的靶向关系,识别miRNA靶向的表观因子对肝细胞癌预后的潜在影响。方法:通过肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库下载全部HCC样本的mRNA和miRNA测序数据,使用R程序对... 目的:探究肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)预后相关的miRNA和表观因子的靶向关系,识别miRNA靶向的表观因子对肝细胞癌预后的潜在影响。方法:通过肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库下载全部HCC样本的mRNA和miRNA测序数据,使用R程序对测序数据进行差异分析。将患者生存时间、生存状态与差异表达miRNA表达数据合并,使用单因素和多因素COX风险回归构建miRNA的风险评分模型。预测模型中miRNA靶基因及下载所有的表观因子,并筛选出具有差异表达的表观因子(the differentially expressed epigenetic factors,DEEFs)。然后,建立miRNA靶向DEEFs的调控网络,对网络里的表观因子进行富集分析,构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络和选择网络中的核心基因,最后用KaplanMeier(K-M)法分析表观因子与患者生存预后的关系并予以验证。结果:使用Edge算法鉴定出305个差异表达的miRNA,COX分析最终筛选出hsa-miR-139-5p、hsa-miR-101-3p和hsa-miR-7-5p(miR-139-5p、miR-101-3p和miR-7-5p)作为HCC患者总生存期(overall survival,OS)的预测因子。此外,识别出34个miRNA靶向的DEEFs,其中EZH2、PKM、HJURP和CHEK1对肝细胞癌生存有显著影响。结论:本研究成功建立了肝细胞癌miRNA靶向表观因子的预后模型,并筛选出与肝细胞癌预后显著相关的表观因子。为HCC治疗提供新的潜在的预后生物标志物和治疗靶点,且为HCC后续的基础研究奠定了理论基础。 展开更多
关键词 肝细胞癌 表观因子 微小RNA TCGA
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组蛋白甲基化转移酶SETD4对鼻咽癌细胞增殖和迁移的影响 被引量：1
6
作者 封慕茵 郑阿秀 +4 位作者 白建荣 曾玉梅 罗泊涛 申志华 揭伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期259-268,共10页
目的:明确组蛋白甲基化转移酶含SET结构域蛋白4 (SET-domain-containing protein 4, SETD4)在临床鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC)组织中的表达,分析SETD4对NPC细胞增殖和迁移的影响。方法:采用免疫组织化学法检测86例临床NPC标... 目的:明确组蛋白甲基化转移酶含SET结构域蛋白4 (SET-domain-containing protein 4, SETD4)在临床鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC)组织中的表达,分析SETD4对NPC细胞增殖和迁移的影响。方法:采用免疫组织化学法检测86例临床NPC标本与对照组30例鼻咽黏膜慢性炎症(nasopharyngeal chronic inflammation,NPI)组织中SETD4蛋白的表达;基于CRISPR/Cas9技术敲除CNE2细胞中SETD4基因,DNA测序结合半定量RTPCR进行鉴定;以SETD4敲除前后的CNE2细胞为研究对象,于倒置显微镜下观察细胞形态,采用CCK-8实验分析细胞增殖活性、Transwell实验观察细胞迁移能力变化、Western blot检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、细胞周期相关蛋白、上皮-间充质转化标志物和组蛋白赖氨酸甲基化的变化,并通过生物信息学富集SETD4相关联的功能和信号通路。结果:SETD4蛋白主要定位于NPC细胞核中,NPC组织中SETD4阳性表达率显著低于NPI对照组(P<0.01)。基于CRISPR/Cas9技术成功敲除了CNE2细胞的SETD4基因,获得基因敲除的纯合子细胞。与野生型(wild-type, WT)细胞株相比,SETD4敲除(knockout, KO)细胞株呈现更明显的梭形和多角形,增殖活性和迁移能力均显著增加(P<0.01),E-cadherin和p21蛋白表达显著下调(P<0.05),而cyclin D1、cyclin E1、Ncadherin和vimentin蛋白表达则显著上调(P<0.05)。此外,与WT组相比,SETD4KO组细胞中H3K4me2、H3K4me3、H3K9me1、H3K27me3、H3K79me2和H4K20me2水平显著降低(P<0.05)。基因集富集结果显示,SETD4与细胞周期的功能和信号通路相关。结论:临床NPC组织中SETD4蛋白的表达减弱或缺失;SETD4表达减弱通过上调细胞周期相关蛋白促进NPC细胞增殖,通过诱导上皮-间充质转化而促进细胞迁移;SETD4影响NPC细胞中H3K4、H3K9、H3K27、H3K79和H4K20多个位点的甲基化。 展开更多
关键词 鼻咽癌 组蛋白甲基转移酶 含SET结构域蛋白4 细胞增殖 细胞迁移 基因集富集
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