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雌激素缺乏上调TNF-α促发卵巢切除大鼠骨细胞程序性坏死 被引量：14
1
作者 崔红旺 孟志斌 +4 位作者 王挺锐 祝开忠 史方富 唐崧杰 朱永俊 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1431-1437,共7页
目的探讨雌激素缺乏对去卵巢骨质疏松大鼠骨细胞程序性坏死的影响及其发生机制。方法 60只雌性SD大鼠随机分为Control组(12只)和OVX组(48只),分别行假手术或OVX术;再将48只OVX大鼠分为OVX+vehicle、OVX+Nec-1、OVX+Z-VAD和OVX+E2组,每... 目的探讨雌激素缺乏对去卵巢骨质疏松大鼠骨细胞程序性坏死的影响及其发生机制。方法 60只雌性SD大鼠随机分为Control组(12只)和OVX组(48只),分别行假手术或OVX术;再将48只OVX大鼠分为OVX+vehicle、OVX+Nec-1、OVX+Z-VAD和OVX+E2组,每组12只。Micro-CT扫描评价胫骨近端骨量改变;免疫组化法测定骨细胞TNF-α、RIP1、RIP3的表达情况,并计算各组阳性细胞百分率;用透射电镜鉴定细胞形态学变化;Western blot检测程序性坏死下游信号通路蛋白MLKL、Drp1的表达情况。结果 OVX+vehicle组大鼠胫骨近端出现明显的骨量丢失,即OVX+vehicle组Tb.Th、BV/TV、Tb.N小于Control组(P<0.01);而OVX+vehicle组Tb.Sp大于Control组(P<0.01)。TNF-α、RIP1、RIP3蛋白在骨细胞胞浆中均有表达;在OVX+vehicle组,TNF-α、RIP1、RIP3阳性骨细胞百分率较Control组显著增多(P<0.01),在OVX+vehicle组可见大量坏死样结构的骨细胞。应用Nec-1治疗后可有效抑制RIP1蛋白表达,而Z-VAD对RIP1、RIP3蛋白表达无影响,在OVX+Nec-1组未见到坏死样结构的骨细胞。在OVX+vehicle组,Western blot结果显示MLKL、Drp1蛋白表达较Control组显著增多(P<0.01),应用Nec-1治疗后可有效抑制MLKL、Drp1蛋白表达,而Z-VAD对MLKL、Drp1蛋白表达无影响。结论雌激素缺乏可能是通过上调TNF-α表达而促发骨细胞发生程序性坏死的,MLKL、Drp1可能是骨细胞程序性坏死的下游关键信号分子。 展开更多
关键词 雌激素 肿瘤坏死因子Α 程序性坏死 骨细胞 骨质疏松 大鼠 动物实验
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TNF-α诱导MLO-Y4细胞发生RIP3介导的程序性坏死 被引量：4
2
作者 崔红旺 孟志斌 +3 位作者 黄涛 祝开忠 赵志荣 朱永俊 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1499-1505,共7页
目的:探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)能否诱导小鼠长骨骨样细胞株MLO-Y4发生程序性坏死及其发生机制。方法:将MLO-Y4细胞分为正常对照(control)组、TNF-α处理组、TNF-α+necrostatin-1(Nec-1)处理组、TNF-α+Z-VAD处理组和TNF-α+受体相... 目的:探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)能否诱导小鼠长骨骨样细胞株MLO-Y4发生程序性坏死及其发生机制。方法:将MLO-Y4细胞分为正常对照(control)组、TNF-α处理组、TNF-α+necrostatin-1(Nec-1)处理组、TNF-α+Z-VAD处理组和TNF-α+受体相互作用蛋白3(RIP3)-siRNA组。用流式细胞术检测各组细胞凋亡或坏死率,透射电镜鉴定细胞形态学变化,用Western blot法测定RIP1、RIP3和cleaved caspase-3的蛋白水平,应用激光共聚焦显微镜观察RIP1和RIP3蛋白的共表达,应用荧光标记法检测各组细胞活性氧(ROS)水平。结果:TNF-α诱导MLO-Y4细胞24 h,凋亡和坏死率明显高于control组(P<0.01)。与TNF-α组相比,Nec-1、Z-VAD和RIP3-siRNA均能降低细胞的凋亡或坏死率(P<0.01)。在TNF-α组可见大量坏死样细胞,在Z-VAD组仍可见到坏死样细胞,而在Nec-1和RIP3-siRNA组未见到坏死样细胞。Western blot实验结果显示Nec-1可有效抑制RIP1蛋白表达,而Z-VAD对RIP1和RIP3蛋白表达无影响,RIP3-siRNA可有效降低RIP3蛋白表达(P<0.01)。与TNF-α组比较,Nec-1可有效降低RIP1-RIP3蛋白共表达阳性细胞百分率(P<0.01),而Z-VAD对其无影响。与control组相比,TNF-α组的ROS水平明显增高(P<0.01);与TNF-α组相比,Nec-1、Z-VAD及RIP3-siRNA均能有效抑制ROS水平(P<0.01)。结论:TNF-α能诱导MLO-Y4细胞发生RIP3介导的程序性坏死;ROS可能是MLO-Y4细胞程序性坏死的执行者。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子Α 程序性坏死 受体相互作用蛋白3 MLO-Y4细胞
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木犀草素对急性痛风性关节炎模型大鼠的抗炎作用研究 被引量：25
3
作者 沈瑞明 李国铨 钟良宝 《海南医学院学报》 CAS 2019年第17期1300-1303,共4页
目的:探讨木犀草素对急性痛风性关节炎模型大鼠的抗炎作用。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为6组,踝关节局部注射尿酸钠晶体混悬液制备急性痛风性关节炎大鼠模型,观察各组不同时间点关节肿胀指数和血清、滑膜中白介素(IL)-1β、IL-17、肿... 目的:探讨木犀草素对急性痛风性关节炎模型大鼠的抗炎作用。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为6组,踝关节局部注射尿酸钠晶体混悬液制备急性痛风性关节炎大鼠模型,观察各组不同时间点关节肿胀指数和血清、滑膜中白介素(IL)-1β、IL-17、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6的水平。结果:造模后模型组不同时间点的步态评分和关节肿胀指数均较对照组升高(P<0.01);木犀草素组可减轻急性痛风性关节炎模型大鼠的踝关节肿胀(P<0.05),并且显著降低IL-1β、IL-17、TNF-α、IL-6的水平(P<0.01)。结论:木犀草素可减轻急性痛风性关节炎的炎症反应,有望成为治疗痛风性关节炎急性发作的有效药物。 展开更多
关键词 木犀草素 痛风性关节炎 炎症因子 白介素-17
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