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QY1骨髓多能间质干细胞系多向分化潜能的检测
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作者 杨晶 谢祁阳 +2 位作者 张翼 向红霞 郭赞 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期268-275,共8页
目的:检测QY1骨髓间质干细胞系在体外向脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、心肌细胞、血管内皮细胞和神经细胞分化的能力。方法:选用第5代QY1骨髓间质干细胞系,分别用成脂培养基、成软骨培养基、成骨培养基、5?氮胞苷、血管内皮生长因子、... 目的:检测QY1骨髓间质干细胞系在体外向脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、心肌细胞、血管内皮细胞和神经细胞分化的能力。方法:选用第5代QY1骨髓间质干细胞系,分别用成脂培养基、成软骨培养基、成骨培养基、5?氮胞苷、血管内皮生长因子、神经细胞培养液(诱导液1为10mmol/Lβ-巯基乙醇;诱导液2为2%二甲基亚砜和10-8mol/L地塞米松)对其进行定向诱导分化。采用染色法、免疫组化法、RT-PCR法鉴定分化后的细胞。结果:在成脂培养基培养21d左右出现大量含脂滴的脂肪细胞,苏丹III染色法检测脂肪细胞胞浆呈桔红色。在成软骨培养基培养21d左右有软骨结节形成,阿尔新蓝染色法将软骨结节染为深蓝色。在成骨培养基培养35d左右有凸出的骨结节形成,VonKossa染色法显示有黑色矿化结节形成。在10μmol/L5?氮胞苷诱导液中能出现自发性搏动的心肌细胞和肌管样结构,免疫组化法显示心肌特异性的表面抗体α-横纹肌肌动蛋白、心肌连接蛋白-43表达阳性,RT-PCR法检测有心肌特异性因子α-肌球蛋白重链表达。在含有50ng/mL血管内皮生长因子的诱导液中能出现呈直线排列的血管内皮细胞和血管内皮细胞网状结构,免疫组化法显示血管内皮特异性表面抗体CD31和VIII因子表达阳性。神经诱导液1处理组出现神经元,免疫组化法显示胶质纤维酸性蛋白表达阴性,神经元特异性核蛋白表达阳性;神经诱导液2处理组出现神经胶质细胞,免疫组化法显示胶质纤维酸性蛋白表达阳性,神经元特异性核蛋白表达阴性。结论:本研究证实QY1骨髓间质干细胞系细胞具有分化为脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、心肌细胞、血管内皮细胞、神经元和神经胶质细胞的潜能,提示QY1骨髓间质干细胞系具有向多个胚层、7个方向分化的多向潜能。 展开更多
关键词 QY1骨髓间质干细胞 多向分化 脂肪细胞 软骨细胞 成骨细胞 神经元 神经胶质细胞
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金纳米微粒DNA芯片检测EGFR基因突变
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作者 薛丽 费晶晶 +1 位作者 宋毅 白玉杰 《海南医学院学报》 CAS 2012年第8期1019-1023,共5页
目的:研制以金纳米微粒标记和银染色信号放大技术为基础的DNA芯片,用于快速检测表皮生长因子受体(EGFR)基因突变。方法:氨基修饰的寡核苷酸探针固定于醛基化玻璃片基制备DNA芯片,5′-生物素标记引物用于PCR扩增EGFR基因第18、19、20、2... 目的:研制以金纳米微粒标记和银染色信号放大技术为基础的DNA芯片,用于快速检测表皮生长因子受体(EGFR)基因突变。方法:氨基修饰的寡核苷酸探针固定于醛基化玻璃片基制备DNA芯片,5′-生物素标记引物用于PCR扩增EGFR基因第18、19、20、21外显子片段,杂交后含互补序列的PCR产物结合于芯片,金纳米微粒借助表面包被的链亲和素识别标记于PCR产物5′-端的生物素而与之结合,再经银染色法放大杂交信号,依据芯片杂交结果判读EGFR基因突变,并用DNA直接测序法进行验证。结果:所制备的DNA芯片可快速检测肿瘤组织标本中EGFR基因突变,检测敏感性达到10-9 mol/L,可检出标本中5%的基因突变。结论:所制备的DNA芯片具有高特异性和敏感性,且操作简便,适用于临床肿瘤组织标本基因突变的快速检测。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 DNA芯片 金纳米微粒 银染色法 药物基因组学
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抗氧化物的保健作用及其个体化应用
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作者 薛丽 白玉杰 《海南医学院学报》 CAS 2010年第8期1092-1094,共3页
关键词 营养学 营养基因组学 植物化学物质 抗氧化物 综述文献
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纳米金微粒标记技术在基因芯片中的应用
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作者 薛丽 白玉杰 《海南医学院学报》 CAS 2012年第4期571-573,共3页
基因芯片是20世纪90年代底兴起的高通量检测新技术,在生命科学研究及临床诊断中具有广泛应用前景。探针标记是其中关键技术之一,影响检测准确性和应用范围。标记材料可包括同位素、荧光素、化学发光物质、酶等,目前较多采用荧光素标记... 基因芯片是20世纪90年代底兴起的高通量检测新技术,在生命科学研究及临床诊断中具有广泛应用前景。探针标记是其中关键技术之一,影响检测准确性和应用范围。标记材料可包括同位素、荧光素、化学发光物质、酶等,目前较多采用荧光素标记和双波长共聚焦荧光扫描仪检测,除设备昂贵外, 展开更多
关键词 芯片 纳米微粒 探针 银染色
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