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乙醛还原酶工程菌的构建以及与葡萄糖脱氢酶工程菌偶联还原制备R-CHBE
被引量：
2
1
作者
金永琴
徐娴
+1 位作者
毛政
何冰芳
《化工进展》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2010年第6期1120-1124,共5页
R-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(R-CHBE)是多种药物的手性中间体,可由4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)立体选择性还原制备,而辅酶高效再生是绝大多数氧化还原酶实际应用的瓶颈。本研究从赭色掷抱酵母细胞ZJU010中克隆出NADPH依赖型乙醛还原酶ARI基因(al...
R-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(R-CHBE)是多种药物的手性中间体,可由4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)立体选择性还原制备,而辅酶高效再生是绝大多数氧化还原酶实际应用的瓶颈。本研究从赭色掷抱酵母细胞ZJU010中克隆出NADPH依赖型乙醛还原酶ARI基因(alr),构建重组大肠杆菌E.coliBL21/pET-alr,并与葡萄糖脱氢酶的基因工程菌(BL21/pET-gdh)进行偶联转化COBE。合理调整双菌双酶比例,当BL21/pET-alr和BL21/pET-gdh的湿菌重比为6∶1时,CHBE的产量达到最高,无需添加辅酶,转化22h摩尔转化率达到95.88%,产物R-CHBE的对映体过量值ee为96%,较好地实现了双酶偶联制备R-CHBE。
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关键词
NADPH再生
葡萄糖脱氢酶
乙醛还原酶
R-4-氯-3-羟基丁酸乙酯
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职称材料
题名
乙醛还原酶工程菌的构建以及与葡萄糖脱氢酶工程菌偶联还原制备R-CHBE
被引量：
2
1
作者
金永琴
徐娴
毛政
何冰芳
机构
南京工业大学生物与制药工程学院
浙江省食品药品监督管理局培训中心
出处
《化工进展》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2010年第6期1120-1124,共5页
基金
国家973计划资助项目(2009CB724700)
文摘
R-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(R-CHBE)是多种药物的手性中间体,可由4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)立体选择性还原制备,而辅酶高效再生是绝大多数氧化还原酶实际应用的瓶颈。本研究从赭色掷抱酵母细胞ZJU010中克隆出NADPH依赖型乙醛还原酶ARI基因(alr),构建重组大肠杆菌E.coliBL21/pET-alr,并与葡萄糖脱氢酶的基因工程菌(BL21/pET-gdh)进行偶联转化COBE。合理调整双菌双酶比例,当BL21/pET-alr和BL21/pET-gdh的湿菌重比为6∶1时,CHBE的产量达到最高,无需添加辅酶,转化22h摩尔转化率达到95.88%,产物R-CHBE的对映体过量值ee为96%,较好地实现了双酶偶联制备R-CHBE。
关键词
NADPH再生
葡萄糖脱氢酶
乙醛还原酶
R-4-氯-3-羟基丁酸乙酯
Keywords
NADPH regeneration
GDH
ARI
R-CHBE
分类号
Q55 [生物学—生物化学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
乙醛还原酶工程菌的构建以及与葡萄糖脱氢酶工程菌偶联还原制备R-CHBE
金永琴
徐娴
毛政
何冰芳
《化工进展》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2010
2
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