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蛙源米尔伊丽莎白菌的生物膜形成能力及β内酰胺类和喹诺酮类耐药性分析
1
作者 蔺凌云 赵颖 +7 位作者 姚嘉赟 沈锦玉 袁雪梅 黄雷 陈静 彭先启 刘忆瀚 潘晓艺 《水生生物学报》 北大核心 2025年第2期95-105,共11页
研究旨在探讨蛙源米尔伊丽莎白菌(Elizabethingia miricola)的药敏特性,生物膜形成能力及对β-内酰胺类和喹诺酮类药物的耐药机制。通过16S rRNA和rpoB基因序列系统发育分析对分离菌株进行分子鉴定。采用肉汤稀释法、结晶紫微孔板法和... 研究旨在探讨蛙源米尔伊丽莎白菌(Elizabethingia miricola)的药敏特性,生物膜形成能力及对β-内酰胺类和喹诺酮类药物的耐药机制。通过16S rRNA和rpoB基因序列系统发育分析对分离菌株进行分子鉴定。采用肉汤稀释法、结晶紫微孔板法和卡尔加里生物膜装置分别测定其最小抑菌浓度(MIC)、生物膜形成能力及最低生物膜清除浓度(MBEC)。利用PCR方法分析β-内酰胺耐药基因及喹诺酮类耐药决定区(QRDR)突变,并通过双纸片法检测其超广谱β-内酰胺酶(ESBL)和金属β-内酰胺酶(MBL)的产生。结果显示,从患病蛙类样本中分离到的9株优势菌株均为E.miricola;各菌株对β-内酰胺类、氨基糖苷类及喹诺酮类药物耐药,但对多西环素和氟苯尼考敏感;所有菌株均可形成生物膜,生物膜形成菌的MBEC比对应浮游菌的MIC提高8—>256倍;所有菌株均携带β-内酰胺类耐药相关基因(blaCME、blaGOB和blaB),并产生ESBL及MBL;gyrA基因的QRDR区均检测到了可介导喹诺酮类耐药的非同义突变S83R,gyrB、parC和parE未发现突变。结果表明,蛙源E.miricola呈现多重耐药性,普遍具有生物膜形成能力,β-内酰胺酶的产生及喹酮类药物作用靶点突变与其β-内酰胺及喹诺酮类耐药表型相符。多西环素和氟苯尼考的体外敏感性较高,具有治疗该菌感染的潜力。研究可为E.miricola感染的治疗及耐药机制的深入研究提供参考。 展开更多
关键词 多重耐药性 Β-内酰胺酶 喹诺酮类耐药决定区 生物膜 米尔伊丽莎白菌
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N-取代四氢异喹啉衍生物的合成及杀多子小瓜虫研究 被引量：1
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作者 姚嘉赟 张成赛 +6 位作者 尹文林 蔺凌云 潘晓艺 曹铮 刘忆翰 夏炎春 沈锦玉 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期768-773,共6页
以苯乙醇为起始原料,对醇基的α位碳上的氢进行取代,反应合成3种N-取代四氢异喹啉衍生物(化合物1~3),研究其对多子小瓜虫掠食体和包囊的杀虫活性,评价杀虫活性物质的安全性。试验结果表明,合成的3种四氢异喹啉衍生物对多子小瓜虫的掠食... 以苯乙醇为起始原料,对醇基的α位碳上的氢进行取代,反应合成3种N-取代四氢异喹啉衍生物(化合物1~3),研究其对多子小瓜虫掠食体和包囊的杀虫活性,评价杀虫活性物质的安全性。试验结果表明,合成的3种四氢异喹啉衍生物对多子小瓜虫的掠食体和包囊均具有一定的杀灭作用,其中化合物1(2-甲胺基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-甲腈)的杀虫活性最强,其对多子小瓜虫掠食体4h的100%灭杀质量浓度为20.0mg/L,对包囊6h的100%灭杀质量浓度为40.0mg/L,对掠食体的半数致死质量浓度为11.6mg/L。急性毒性试验结果显示,化合物1对翘嘴红鲌的48h半致死质量浓度为62.78mg/L。2-甲胺基-1,2,3,4-四氢异喹啉-1-甲腈具有较好的体外杀多子小瓜虫活性,且毒性较低,具有较好的开发潜力。 展开更多
关键词 异喹啉衍生物 掠食体 包囊 多子小瓜虫
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生态净养对去除大口黑鲈土腥味与提升营养成分的效果 被引量：5
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作者 周聃 倪蒙 +4 位作者 刘梅 邹松保 胥晴 顾志敏 原居林 《水产学杂志》 CAS 北大核心 2023年第3期96-103,共8页
将池塘养殖的体质量450~500 g的商品大口黑鲈(Micropterus salmoides)用清水清洗,置于室内循环微流水中净养,第0 d、7 d、14 d、21 d和28 d时采集背部肌肉,分别测定土腥味物质土臭素(Geosmin,GSM)和二甲基异莰醇(2-Methylisoborneol,2-M... 将池塘养殖的体质量450~500 g的商品大口黑鲈(Micropterus salmoides)用清水清洗,置于室内循环微流水中净养,第0 d、7 d、14 d、21 d和28 d时采集背部肌肉,分别测定土腥味物质土臭素(Geosmin,GSM)和二甲基异莰醇(2-Methylisoborneol,2-MIB)以及蛋白质、脂肪酸和氨基酸等营养成分含量,研究大口黑鲈在净养下鱼肉土腥味物质及营养成分的变化,探究该模式对鱼肉品质的提升效果。结果显示,在生态净养下,第7 d GSM和2-MIB的去除率分别为48.7%和81.70%,低于感官阈值;在净养前期,脂肪含量降低、蛋白质含量增加,而水分和灰分含量变化不显著(P>0.05);净养7 d左右,二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)显著上升(P<0.05),油酸含量下降,提高了鱼肉脂肪酸价值;在整个过程中氨基酸总量、必需氨基酸和鲜味氨基酸呈上升趋势,但鱼肉的氨基酸评分随时间变化差异不显著(P>0.05)。研究表明,生态净养可以有效去除鱼肉土腥味,提升鱼肉品质,最适宜净养时间为7 d。 展开更多
关键词 生态净养 大口黑鲈 土腥味 营养成分 脂肪酸 氨基酸
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黄颡鱼拟态弧菌的鉴定、毒力相关因子及药敏特性 被引量：8
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作者 蔺凌云 冯东岳 +6 位作者 潘晓艺 姚嘉赟 尹文林 曹铮 刘忆瀚 夏焱春 沈锦玉 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期799-810,共12页
2018年浙江省黄颡鱼主养区暴发了严重的溃疡病,为查明该病的病原特点,了解病原的致病因子及药物敏感性,对溃疡黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)上分离的多株优势菌,分别采用生理生化特性和管家基因16S rRNA、pyrH的系统进化树进行分类鉴... 2018年浙江省黄颡鱼主养区暴发了严重的溃疡病,为查明该病的病原特点,了解病原的致病因子及药物敏感性,对溃疡黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)上分离的多株优势菌,分别采用生理生化特性和管家基因16S rRNA、pyrH的系统进化树进行分类鉴定,通过人工回归感染试验分析菌株的病原性,利用平板法测定相关的毒力因子并采用PCR法对毒力相关基因进行检测,应用微量二倍稀释法测定14种抗菌药物的最小抑菌浓度。结果表明,11株优势菌皆为拟态弧菌,2株代表菌腹腔注射感染黄颡鱼后均可引发溃疡症状;11株拟态弧菌均具有溶血活性、蛋白酶、明胶酶和DNA酶活性,不具有卵磷脂酶活性,可分泌产生铁载体;所有菌株均携带vmh、ompU、toxR及matCDB-iucABCD-iutA等毒力相关基因,tcpA、ctxA、st、zot、ace、tdh等毒力基因均未检出。各菌株对氨苄青霉素、磺胺嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺间甲氧嘧啶高度耐药,对环丙沙星、恩诺沙星、氟苯尼考、多西环素、土霉素、甲砜霉素、红霉素、交沙霉素、磺胺二甲氧嘧啶较敏感,个别菌株对新霉素和甲砜霉素耐药。以上研究结果表明,拟态弧菌感染可引起黄颡鱼溃疡病,不同发病养殖场的分离株具有相同的表型特征及毒力基因型,并具有较一致的生理生化特性和耐药谱型,说明它们具有相同的遗传背景或传染源。 展开更多
关键词 黄颡鱼 溃疡病 拟态弧菌 毒力因子 药物敏感性
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南美白对虾肝胰腺超氧化物歧化酶和酚氧化酶的荧光定量PCR检测 被引量：1
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作者 刘莉 林锋 +1 位作者 曹铮 许怡 《江苏农业科学》 北大核心 2015年第9期290-292,共3页
试验设计了南美白对虾超氧岐化酶和酚氧化酶的荧光定量PCR检测的特异性引物,用于检测肝胰腺中超氧化物歧化酶(SOD)和酚氧化酶(PO)的表达。该方法避免了血清学检测免疫指标的不稳定性、测定值波动性较大的缺点,可作为评估南美白对虾免疫... 试验设计了南美白对虾超氧岐化酶和酚氧化酶的荧光定量PCR检测的特异性引物,用于检测肝胰腺中超氧化物歧化酶(SOD)和酚氧化酶(PO)的表达。该方法避免了血清学检测免疫指标的不稳定性、测定值波动性较大的缺点,可作为评估南美白对虾免疫状态的一种分子检测方法。 展开更多
关键词 南美白对虾 肝胰腺 SOD PO 荧光定量PCR
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湖州市养殖池塘表层沉积物重金属风险评价及其来源分析 被引量：15
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作者 施沁璇 赵汉取 +4 位作者 王俊 张敏 姚伟忠 盛鹏程 徐磊 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2015年第6期80-84,共5页
于2013-2014年间对湖州市5个县(区)98个养殖池塘及其周边外河采集表层沉积物,原子吸收法测定Cu、Zn、Pb、Cd、Cr干重,原子荧光法测定Hg、As干重。结果表明:养殖池塘表层沉积物中相对土壤背景值Cd、Zn污染程度较高,绝对浓度分别为0.24 mg... 于2013-2014年间对湖州市5个县(区)98个养殖池塘及其周边外河采集表层沉积物,原子吸收法测定Cu、Zn、Pb、Cd、Cr干重,原子荧光法测定Hg、As干重。结果表明:养殖池塘表层沉积物中相对土壤背景值Cd、Zn污染程度较高,绝对浓度分别为0.24 mg/kg和105.82 mg/kg,As较为清洁;县(区)间养殖池塘表层沉积物Hakanson潜在生态风险均为中等污染水平,远低于周边外河,但高于本地区耕地等土壤的污染水平,说明渔业生产过程中存在输入性污染;单个重金属生态风险系数中Cd为强、Hg为中等,依次为Cu、Pb、As、Cr、Zn,均为轻微生态风险水平。此外,池塘表层沉积物中Cu、Zn、Cr两两之间显著相关,符合这三种重金属在水产饲料中同时添加的特性;而Cd与Cu、Zn显著相关,一定程度上印证了Cd在水产饲料中可能超标的事实,但其生态风险系数远低于周边外河表层沉积物,所以周边流域外源性Cd输入风险也需要关注。 展开更多
关键词 表层沉积物 重金属 风险评价 来源
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草鱼出血病灭活疫苗上调草鱼脾细胞主要免疫分子的表达 被引量：8
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作者 奕志娟 郝贵杰 +6 位作者 袁雪梅 潘晓艺 徐洋 姚嘉赟 蔺凌云 尹文林 沈锦玉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期177-181,共5页
目的探讨草鱼出血病灭活疫苗对草鱼脾脏中Ig M、主要组织相容性复合体Ⅰ(MHCⅠ)、1型干扰素(IFN1)、补体3(C3)、白细胞介素1β(IL-1β)、内凝集素(intelectin)相关基因表达的影响。方法用草鱼肾细胞系(CIK)培养草鱼呼肠孤病毒(GCRV),并... 目的探讨草鱼出血病灭活疫苗对草鱼脾脏中Ig M、主要组织相容性复合体Ⅰ(MHCⅠ)、1型干扰素(IFN1)、补体3(C3)、白细胞介素1β(IL-1β)、内凝集素(intelectin)相关基因表达的影响。方法用草鱼肾细胞系(CIK)培养草鱼呼肠孤病毒(GCRV),并制备草鱼出血病灭活疫苗,用生理盐水稀释成50倍和100倍,包括未稀释组及生理盐水对照共4组。分别腹腔免疫注射健康草鱼,各组分别于免疫后0、6、12、24、72 h,取脾脏并抽提总RNA,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测上述6种免疫相关基因mRNA表达。结果与生理盐水对照组相比,免疫注射不同剂量的草鱼出血病灭活疫苗均能刺激草鱼脾脏中6种主要免疫分子不同程度的表达上调,表明疫苗刺激草鱼机体启动了非特异性和特异性免疫应答。在3个疫苗免疫组中,intelectin、MHCⅠ、IL-1β、C3基因的相对表达量都随着时间的推移出现先表达上调,后表达下调;基因IFN1的相对表达量在免疫后6 h达到峰值,之后下降至正常水平;Ig M的相对表达量在所检测时间内呈逐渐上调的趋势。结论草鱼出血病灭活疫苗均能诱导草鱼脾脏中免疫相关分子基因的表达上调。 展开更多
关键词 草鱼出血病 草鱼呼肠孤病毒 灭活疫苗 免疫基因 实时荧光定量PCR
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罗氏沼虾谷氨酸脱氢酶基因克隆及其在MrTV感染下的组织表达分析 被引量：1
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作者 郑群艳 潘晓艺 +3 位作者 沈锦玉 陈少波 徐洋 许婷 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期639-648,共10页
本研究利用c DNA末端快速扩增技术克隆获得罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase,GDH)基因(Mr GDH)的c DNA全长序列,对其进行生物信息学分析,并检测该基因在罗氏沼虾不同组织中的表达差异;同时,利... 本研究利用c DNA末端快速扩增技术克隆获得罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase,GDH)基因(Mr GDH)的c DNA全长序列,对其进行生物信息学分析,并检测该基因在罗氏沼虾不同组织中的表达差异;同时,利用罗氏沼虾太湖病毒(Macrobrachium rosenbergii Taihu virus,Mr TV)感染沼虾,研究感染前后沼虾鳃和肝胰腺Mr GDH的转录特征。结果显示,Mr GDH基因c DNA序列全长2 257 bp,拥有一个1 662 bp长的开放阅读框,合计编码氨基酸553个,合成的蛋白质分子质量约为61.37 k Da。Mr GDH氨基酸序列与中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)、凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的同源性较高,达到92%,其二级结构和三维结构与黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)以及家蚕(Bombyx mori)高度相似,说明Mr GDH氨基酸序列比较保守。实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)结果显示,Mr GDH基因在与机体运动和代谢有关的组织中表达量较高,其中在肌肉中表达量最高,而在血淋巴中最低。罗氏沼虾受Mr TV病毒感染48 h,肝胰腺和鳃中Mr GDH基因的表达在统计学上均极显著高于对照组(P<0.01);感染72 h,鳃中Mr GDH基因表达显著高于对照组(P<0.05),肝胰腺中Mr GDH基因表达极显著高于对照组(P<0.01):说明Mr TV感染胁迫可以刺激罗氏沼虾Mr GDH的表达上调。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 罗氏沼虾太湖病毒 谷氨酸脱氢酶 基因克隆 组织表达差异
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烟酸诺氟沙星预混剂在罗氏沼虾体内药代动力学及残留消除规律
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作者 左梦丽 姚嘉赟 +2 位作者 沈锦玉 尹文林 盛鹏程 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期136-140,共5页
采用混饲口灌方式给药罗氏沼虾,通过有机萃取及固相萃取等方法提纯净化各组织样本,利用超高效液相色谱(UPLC)法测定样本中药物的浓度,研究烟酸诺氟沙星预混剂在罗氏沼虾体内的药代动力学及残留规律。结果发现,混饲口灌烟酸诺氟沙星预混... 采用混饲口灌方式给药罗氏沼虾,通过有机萃取及固相萃取等方法提纯净化各组织样本,利用超高效液相色谱(UPLC)法测定样本中药物的浓度,研究烟酸诺氟沙星预混剂在罗氏沼虾体内的药代动力学及残留规律。结果发现,混饲口灌烟酸诺氟沙星预混剂(20 mg/kg体重)后,罗氏沼虾肝胰腺符合药代动力学一级吸收二室开放模型,主要动力学参数如下:达峰时间Tpeak为2.905 h,最大峰浓度Cmax为328.12μg/mL,分布半衰期T1/2α为2.178 h,消除半衰期T1/2β为10.058 h;连续5 d混饲口灌烟酸诺氟沙星预混剂(20 mg/kg体重)后,药物在肝胰腺、血液、肌肉组织的残留低于50μg/kg所需的时间分别为12、4、5 d。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 烟酸诺氟沙星预混剂 药代动力学 残留
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