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一步法TaqMan~探针实时荧光定量RT-PCR快速检测PRRSV的建立及初步应用
被引量：
4
1
作者
路斌
袁秀芳
+3 位作者
徐丽华
李军星
郭勇
王一成
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2012年第3期396-403,共8页
根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的序列,设计了1对特异性引物和1条TaqMan探针,建立了一步法检测PRRSV的荧光定量RT-PCR方法。结果表明,建立的方法具有较高的特异性,与PCV,JEV,SFV,PRV,PPV无交叉反应;可以检测到10个拷贝数的模板RNA...
根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的序列,设计了1对特异性引物和1条TaqMan探针,建立了一步法检测PRRSV的荧光定量RT-PCR方法。结果表明,建立的方法具有较高的特异性,与PCV,JEV,SFV,PRV,PPV无交叉反应;可以检测到10个拷贝数的模板RNA或1个TCID50的PRRSV,比常规RT-PCR方法的灵敏度高10倍;对同一样品进行4次重复试验,变异系数(CV)<1%,具有较好的重复性。应用建立的荧光定量RT-PCR和常规RT-PCR对72份PRRS疑似病例肺组织进行平行检测,结果荧光定量RT-PCR检出40份阳性,高于常规RT-PCR方法(28份阳性)。建立的荧光定量RT-PCR方法特异性好、灵敏度高,而且快速简便,可用于PRRSV的实验室快速诊断和流行病学调查。
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关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
实时荧光定量RT-PCR
一步法
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职称材料
题名
一步法TaqMan~探针实时荧光定量RT-PCR快速检测PRRSV的建立及初步应用
被引量：
4
1
作者
路斌
袁秀芳
徐丽华
李军星
郭勇
王一成
机构
浙江省
农业科学院
畜牧
兽医
研究所
浙江省海盐县畜牧兽医局
出处
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2012年第3期396-403,共8页
基金
浙江省重大科技专项农业项目(2008C12049)
文摘
根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的序列,设计了1对特异性引物和1条TaqMan探针,建立了一步法检测PRRSV的荧光定量RT-PCR方法。结果表明,建立的方法具有较高的特异性,与PCV,JEV,SFV,PRV,PPV无交叉反应;可以检测到10个拷贝数的模板RNA或1个TCID50的PRRSV,比常规RT-PCR方法的灵敏度高10倍;对同一样品进行4次重复试验,变异系数(CV)<1%,具有较好的重复性。应用建立的荧光定量RT-PCR和常规RT-PCR对72份PRRS疑似病例肺组织进行平行检测,结果荧光定量RT-PCR检出40份阳性,高于常规RT-PCR方法(28份阳性)。建立的荧光定量RT-PCR方法特异性好、灵敏度高,而且快速简便,可用于PRRSV的实验室快速诊断和流行病学调查。
关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
实时荧光定量RT-PCR
一步法
Keywords
porcine reproductory syndrome virus（PRRSV）
real-time fluorescent quantitative RT-PCR assay
one-step method
分类号
S858.28 [农业科学—临床兽医学]
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作者
出处
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被引量
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1
一步法TaqMan~探针实时荧光定量RT-PCR快速检测PRRSV的建立及初步应用
路斌
袁秀芳
徐丽华
李军星
郭勇
王一成
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2012
4
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