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新型抗真菌代谢产物发酵条件的响应面优化
被引量:
2
1
作者
陈正杰
朱婉萍
+4 位作者
张书衍
吴绵斌
贺娟
陈华
孟强
《浙江大学学报(工学版)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011年第10期1868-1876,共9页
从浙江东海土壤中筛选获得1株菌株(ZS09-33)能产生抑制白色念珠菌的代谢产物,经16SrRNA序列测定和Genbank数据库搜索,确定其属于Bacillus amyloliquefaciens.Plackett-Burman实验发现,影响抗真菌效价的主要因素为:黄豆饼粉、可溶性淀粉...
从浙江东海土壤中筛选获得1株菌株(ZS09-33)能产生抑制白色念珠菌的代谢产物,经16SrRNA序列测定和Genbank数据库搜索,确定其属于Bacillus amyloliquefaciens.Plackett-Burman实验发现,影响抗真菌效价的主要因素为:黄豆饼粉、可溶性淀粉以及(NH4)2SO4.最陡爬坡实验和Box-Behnken实验得到响应面(RSM)优化的最佳培养基质量浓度为:黄豆饼粉2.72g/L,可溶性淀粉26.67g/L,(NH4)2SO43.95g/L,K2HPO41.8g/L,NaCl 2g/L,MgSO40.5g/L,CaCO30.72g/L,CuSO40.02g/L,FeSO40.02g/L,MnSO40.02g/L,初始pH 6.5.在此条件下发酵液抗真菌效价达16 806.48U/mL,与模型值相符.与单因素优化结果相比,效价提高了239%.产物经ESI/MS、1 H-NMR及13 C-NMR确定为相对分子质量为402的大环内脂类物质.
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关键词
抗真菌
芽孢杆菌
16S
RRNA
Plackett-Burman实验
响应面法(RSM)
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职称材料
新型抗真菌抗生素分离与纯化
2
作者
王学万
陈华
+1 位作者
陈正杰
吴绵斌
《浙江大学学报(工学版)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011年第1期191-196,共6页
对1株不吸水链霉菌(Streptomyces ahygroscopicus ZJUIB001)产生的新型抗真菌抗生素进行分离纯化研究.通过发酵液经离心去沉淀后,采用氯仿和石油醚萃取.萃取后的水相调节至pH 2并采用Dowex 50×16阳离子交换树脂和XAD7HP大孔吸附树...
对1株不吸水链霉菌(Streptomyces ahygroscopicus ZJUIB001)产生的新型抗真菌抗生素进行分离纯化研究.通过发酵液经离心去沉淀后,采用氯仿和石油醚萃取.萃取后的水相调节至pH 2并采用Dowex 50×16阳离子交换树脂和XAD7HP大孔吸附树脂分离其中的抗真菌代谢物,对分离样品进行反相高效液相色谱分析.Dowex50×16层析条件优化如下:pH=2的萃取浓缩液以2倍床层体积/h的流速上柱,在去离子水冲洗后,用0.6mol/L氨水以1倍床层体积/h流速洗脱;Amberlite XAD7HP大孔吸附树脂层析条件为:体积分数为10%和70%的乙醇水溶液阶跃洗脱.将纯化得到的样品用高效液相色谱(HPLC)系统检测,色谱柱为YMC-C18(5μm,Φ4.6mm×250mm)氰基柱,流动相为0.01mol/L的乙酸铵缓冲液(pH=4.3),流速为1mL/min,检测波长为220nm.HPLC检测结果显示,分离的抗生素纯度和效价分别达到93.0%和21 632U/mg.
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关键词
嘧啶核苷
抗真菌抗生素
分离纯化
离子交换层析
大孔吸附层析
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职称材料
天维菌素酰化衍生物的合成及杀虫杀螨活性
被引量:
1
3
作者
陈浩
张绍勇
+3 位作者
韩群琦
张辉
王继栋
陈安良
《农药学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第1期35-47,共13页
以天维菌素B、天维菌素B单糖苷和天维菌素B苷元为原料,经选择性C-5羟基保护,在C-13、C-4′和C-4″位引入不同酰基基团,合成了3个系列共23个天维菌素B酰化衍生物,并通过1H NMR、13C NMR和高分辨质谱对所有目标化合物的结构进行了表征。...
以天维菌素B、天维菌素B单糖苷和天维菌素B苷元为原料,经选择性C-5羟基保护,在C-13、C-4′和C-4″位引入不同酰基基团,合成了3个系列共23个天维菌素B酰化衍生物,并通过1H NMR、13C NMR和高分辨质谱对所有目标化合物的结构进行了表征。生物活性测定结果表明,所有衍生物对小菜蛾Plutella xylostella、朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus以及松材线虫Bursaphelenchus xylophilus均表现出不同程度的毒杀活性,其中天维菌素B C-4″位衍生物的活性优于C-4′位衍生物及13位衍生物。化合物8e对小菜蛾和松材线虫的毒杀活性最优,LC50值分别为9.2 mg/L和0.42 mg/L,化合物8b对朱砂叶螨的毒性最高,LC50值为0.0019 mg/L,均优于对照药天维菌素B。
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关键词
天维菌素B
酰化衍生物
合成
杀虫活性
杀螨活性
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职称材料
酿酒酵母工程菌产青蒿酸的发酵动力学研究
被引量:
2
4
作者
陈伟
于文文
+2 位作者
陈亚军
徐彬
滕云
《中国酿造》
CAS
北大核心
2020年第4期126-130,共5页
以青蒿酸产量为考察指标,在50 L发酵罐中对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)工程菌1211发酵产青蒿酸的溶氧参数进行优化。在此基础上,根据Logistic方程及Luedeking-Piret方程构建酿酒酵母工程菌1211分批发酵产青蒿酸的动力学模型。...
以青蒿酸产量为考察指标,在50 L发酵罐中对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)工程菌1211发酵产青蒿酸的溶氧参数进行优化。在此基础上,根据Logistic方程及Luedeking-Piret方程构建酿酒酵母工程菌1211分批发酵产青蒿酸的动力学模型。结果表明,当溶氧参数为25%~30%时,青蒿酸产量最高,为(6 269.6±100.3)mg/L。青蒿酸合成与菌体生长呈现部分生长偶联型。通过Origin 9.0软件对动力学模型进行非线性拟合,发现S. cerevisiae工程菌1211的菌体繁殖生长、青蒿酸合成以及基质消耗动力学模型的拟合度R2分别达到了0.995 85、0.979 04和0.995 48,该动力学模型能够很好的描述S. cerevisiae工程菌1211分批发酵过程。该研究为青蒿酸的低成本发酵及工业化大规模发酵生产提供了理论基础。
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关键词
青蒿酸
酿酒酵母工程菌1211
溶氧
分批发酵
动力学模型
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职称材料
多黏菌素B发酵过程中组分与杂质的调节
被引量:
3
5
作者
吴恩国
何敏
+1 位作者
阮海宁
滕云
《发酵科技通讯》
CAS
2019年第1期33-38,共6页
多黏菌素B是一种由多黏类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)产生的氨基酸和脂肪组成的碱性多肽类抗生素。以产多黏菌素B的多黏芽孢杆菌Paenibacillus polymyxa ATCC10401为出发菌株,考察了不同量和不同组合方式的前体氨基酸添加对各个...
多黏菌素B是一种由多黏类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)产生的氨基酸和脂肪组成的碱性多肽类抗生素。以产多黏菌素B的多黏芽孢杆菌Paenibacillus polymyxa ATCC10401为出发菌株,考察了不同量和不同组合方式的前体氨基酸添加对各个组分的影响。通过试验和HPLC分析,得到了高质量分数多黏菌素B1的发酵生产方法,多黏菌素B1的质量分数达到80%以上。
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关键词
多黏芽孢杆菌
多黏菌素B
前体氨基酸
发酵
组分和杂质
调节
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职称材料
微生物转化制备20-去甲基DM1
6
作者
阮海宁
张鑫培
滕云
《发酵科技通讯》
CAS
2019年第3期168-172,185,共6页
T-DM1是由曲妥珠单抗和美登素衍生物DM1通过硫醚连接物共价连接的抗体-药物偶联物,20-去甲基DM1是用于T-DM1药代动力学评价的一种重要化合物。以扁平链霉菌(Streptomyces platensis)CGMCC 4.1975作为出发菌株,以DM1中间体Ⅱ为底物,可以...
T-DM1是由曲妥珠单抗和美登素衍生物DM1通过硫醚连接物共价连接的抗体-药物偶联物,20-去甲基DM1是用于T-DM1药代动力学评价的一种重要化合物。以扁平链霉菌(Streptomyces platensis)CGMCC 4.1975作为出发菌株,以DM1中间体Ⅱ为底物,可以制备20-去甲基DM1中间体Ⅱ。进一步优化转化反应的底物质量浓度和转化时间,在发酵培养48 h后,添加2.9 g/L的DM1中间体Ⅱ底物0.5 mL,继续培养至72 h结束,可以获得24.4 mg/L 20-去甲基DM1中间体Ⅱ,通过分离纯化和巯基还原,制备得到20-去甲基DM1,产率达到19.3%。利用高效液相色谱(HPLC)、液相-质谱(LC-MS)和核磁共振(NMR)进行分析,结果表明,转化产物为20-去甲基DM1。
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关键词
T-DM1
20-去甲基DM1
微生物转化
扁平链霉菌
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职称材料
题名
新型抗真菌代谢产物发酵条件的响应面优化
被引量:
2
1
作者
陈正杰
朱婉萍
张书衍
吴绵斌
贺娟
陈华
孟强
机构
浙江
大学化学工程与生物工程学系
浙江省
抗真菌
药物
研究
重点
实验室
出处
《浙江大学学报(工学版)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011年第10期1868-1876,共9页
基金
浙江科技厅计划资助项目(2009C33019)
台州市-浙江大学科技合作专项资金资助项目(07ZJU001
08ZJU007)
文摘
从浙江东海土壤中筛选获得1株菌株(ZS09-33)能产生抑制白色念珠菌的代谢产物,经16SrRNA序列测定和Genbank数据库搜索,确定其属于Bacillus amyloliquefaciens.Plackett-Burman实验发现,影响抗真菌效价的主要因素为:黄豆饼粉、可溶性淀粉以及(NH4)2SO4.最陡爬坡实验和Box-Behnken实验得到响应面(RSM)优化的最佳培养基质量浓度为:黄豆饼粉2.72g/L,可溶性淀粉26.67g/L,(NH4)2SO43.95g/L,K2HPO41.8g/L,NaCl 2g/L,MgSO40.5g/L,CaCO30.72g/L,CuSO40.02g/L,FeSO40.02g/L,MnSO40.02g/L,初始pH 6.5.在此条件下发酵液抗真菌效价达16 806.48U/mL,与模型值相符.与单因素优化结果相比,效价提高了239%.产物经ESI/MS、1 H-NMR及13 C-NMR确定为相对分子质量为402的大环内脂类物质.
关键词
抗真菌
芽孢杆菌
16S
RRNA
Plackett-Burman实验
响应面法(RSM)
Keywords
antifungal Bacillus
16S rRNA
Plackett-Burman design
response surface methodology (RSM)
分类号
Q814.2 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
新型抗真菌抗生素分离与纯化
2
作者
王学万
陈华
陈正杰
吴绵斌
机构
浙江
大学化学工程与生物工程学系
浙江省
抗真菌
药物
研究
重点
实验室
出处
《浙江大学学报(工学版)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011年第1期191-196,共6页
基金
浙江省科技厅计划资助项目(2009C33019)
台州市-浙江大学科技合作专项资金资助项目(08ZJU007)
文摘
对1株不吸水链霉菌(Streptomyces ahygroscopicus ZJUIB001)产生的新型抗真菌抗生素进行分离纯化研究.通过发酵液经离心去沉淀后,采用氯仿和石油醚萃取.萃取后的水相调节至pH 2并采用Dowex 50×16阳离子交换树脂和XAD7HP大孔吸附树脂分离其中的抗真菌代谢物,对分离样品进行反相高效液相色谱分析.Dowex50×16层析条件优化如下:pH=2的萃取浓缩液以2倍床层体积/h的流速上柱,在去离子水冲洗后,用0.6mol/L氨水以1倍床层体积/h流速洗脱;Amberlite XAD7HP大孔吸附树脂层析条件为:体积分数为10%和70%的乙醇水溶液阶跃洗脱.将纯化得到的样品用高效液相色谱(HPLC)系统检测,色谱柱为YMC-C18(5μm,Φ4.6mm×250mm)氰基柱,流动相为0.01mol/L的乙酸铵缓冲液(pH=4.3),流速为1mL/min,检测波长为220nm.HPLC检测结果显示,分离的抗生素纯度和效价分别达到93.0%和21 632U/mg.
关键词
嘧啶核苷
抗真菌抗生素
分离纯化
离子交换层析
大孔吸附层析
Keywords
pyrimidine nucleoside
antifungal antibiotic
isolation and purification
ion exchange chromatography
macroporous adsorption chromatography
分类号
Q814.2 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
天维菌素酰化衍生物的合成及杀虫杀螨活性
被引量:
1
3
作者
陈浩
张绍勇
韩群琦
张辉
王继栋
陈安良
机构
浙江
农林大学生物农药高效制备技术国家地方联合工程
实验室
湖州师范学院生命科学学院
浙江省抗真菌药物重点实验室
出处
《农药学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第1期35-47,共13页
基金
国家自然科学基金项目(31471809)
中国博士后科学基金(2018M630689).
文摘
以天维菌素B、天维菌素B单糖苷和天维菌素B苷元为原料,经选择性C-5羟基保护,在C-13、C-4′和C-4″位引入不同酰基基团,合成了3个系列共23个天维菌素B酰化衍生物,并通过1H NMR、13C NMR和高分辨质谱对所有目标化合物的结构进行了表征。生物活性测定结果表明,所有衍生物对小菜蛾Plutella xylostella、朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus以及松材线虫Bursaphelenchus xylophilus均表现出不同程度的毒杀活性,其中天维菌素B C-4″位衍生物的活性优于C-4′位衍生物及13位衍生物。化合物8e对小菜蛾和松材线虫的毒杀活性最优,LC50值分别为9.2 mg/L和0.42 mg/L,化合物8b对朱砂叶螨的毒性最高,LC50值为0.0019 mg/L,均优于对照药天维菌素B。
关键词
天维菌素B
酰化衍生物
合成
杀虫活性
杀螨活性
Keywords
tenvermectin B
acylaed derivatives
synthesis
insecticidal activity
acaricidal activity
分类号
TQ458.1 [化学工程—农药化工]
S482.3 [农业科学—农药学]
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职称材料
题名
酿酒酵母工程菌产青蒿酸的发酵动力学研究
被引量:
2
4
作者
陈伟
于文文
陈亚军
徐彬
滕云
机构
浙江
海正药业股份有限公司
浙江省抗真菌药物重点实验室
浙江
工业大学药学院
出处
《中国酿造》
CAS
北大核心
2020年第4期126-130,共5页
基金
国家科技重大专项子课题(2017ZX09101002-003-003)
中国博士后科学基金面上资助一等资助项目(2018M630690)
浙江省教育厅一般科研项目(工程硕士专项)(Y201840669)。
文摘
以青蒿酸产量为考察指标,在50 L发酵罐中对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)工程菌1211发酵产青蒿酸的溶氧参数进行优化。在此基础上,根据Logistic方程及Luedeking-Piret方程构建酿酒酵母工程菌1211分批发酵产青蒿酸的动力学模型。结果表明,当溶氧参数为25%~30%时,青蒿酸产量最高,为(6 269.6±100.3)mg/L。青蒿酸合成与菌体生长呈现部分生长偶联型。通过Origin 9.0软件对动力学模型进行非线性拟合,发现S. cerevisiae工程菌1211的菌体繁殖生长、青蒿酸合成以及基质消耗动力学模型的拟合度R2分别达到了0.995 85、0.979 04和0.995 48,该动力学模型能够很好的描述S. cerevisiae工程菌1211分批发酵过程。该研究为青蒿酸的低成本发酵及工业化大规模发酵生产提供了理论基础。
关键词
青蒿酸
酿酒酵母工程菌1211
溶氧
分批发酵
动力学模型
Keywords
artemisinic acid
engineered Saccharomyces cerevisiae 1211
dissolved oxygen
batch fermentation
kinetics model
分类号
TQ920.6 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
多黏菌素B发酵过程中组分与杂质的调节
被引量:
3
5
作者
吴恩国
何敏
阮海宁
滕云
机构
浙江省抗真菌药物重点实验室
浙江
海正药业股份有限公司
出处
《发酵科技通讯》
CAS
2019年第1期33-38,共6页
文摘
多黏菌素B是一种由多黏类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)产生的氨基酸和脂肪组成的碱性多肽类抗生素。以产多黏菌素B的多黏芽孢杆菌Paenibacillus polymyxa ATCC10401为出发菌株,考察了不同量和不同组合方式的前体氨基酸添加对各个组分的影响。通过试验和HPLC分析,得到了高质量分数多黏菌素B1的发酵生产方法,多黏菌素B1的质量分数达到80%以上。
关键词
多黏芽孢杆菌
多黏菌素B
前体氨基酸
发酵
组分和杂质
调节
Keywords
Paenibacillus polymyxa
polymyxin B
precursor amino acid
fermentation
component and impurity
regulation
分类号
TQ927 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
微生物转化制备20-去甲基DM1
6
作者
阮海宁
张鑫培
滕云
机构
浙江
海正药业股份有限公司
浙江省抗真菌药物重点实验室
出处
《发酵科技通讯》
CAS
2019年第3期168-172,185,共6页
文摘
T-DM1是由曲妥珠单抗和美登素衍生物DM1通过硫醚连接物共价连接的抗体-药物偶联物,20-去甲基DM1是用于T-DM1药代动力学评价的一种重要化合物。以扁平链霉菌(Streptomyces platensis)CGMCC 4.1975作为出发菌株,以DM1中间体Ⅱ为底物,可以制备20-去甲基DM1中间体Ⅱ。进一步优化转化反应的底物质量浓度和转化时间,在发酵培养48 h后,添加2.9 g/L的DM1中间体Ⅱ底物0.5 mL,继续培养至72 h结束,可以获得24.4 mg/L 20-去甲基DM1中间体Ⅱ,通过分离纯化和巯基还原,制备得到20-去甲基DM1,产率达到19.3%。利用高效液相色谱(HPLC)、液相-质谱(LC-MS)和核磁共振(NMR)进行分析,结果表明,转化产物为20-去甲基DM1。
关键词
T-DM1
20-去甲基DM1
微生物转化
扁平链霉菌
Keywords
T-DM1
20-demethyl DM1
biotransformation
Streptomyces platensis
分类号
TQ465.5 [化学工程—制药化工]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
新型抗真菌代谢产物发酵条件的响应面优化
陈正杰
朱婉萍
张书衍
吴绵斌
贺娟
陈华
孟强
《浙江大学学报(工学版)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
在线阅读
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职称材料
2
新型抗真菌抗生素分离与纯化
王学万
陈华
陈正杰
吴绵斌
《浙江大学学报(工学版)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
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职称材料
3
天维菌素酰化衍生物的合成及杀虫杀螨活性
陈浩
张绍勇
韩群琦
张辉
王继栋
陈安良
《农药学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
1
在线阅读
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职称材料
4
酿酒酵母工程菌产青蒿酸的发酵动力学研究
陈伟
于文文
陈亚军
徐彬
滕云
《中国酿造》
CAS
北大核心
2020
2
在线阅读
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职称材料
5
多黏菌素B发酵过程中组分与杂质的调节
吴恩国
何敏
阮海宁
滕云
《发酵科技通讯》
CAS
2019
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
6
微生物转化制备20-去甲基DM1
阮海宁
张鑫培
滕云
《发酵科技通讯》
CAS
2019
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职称材料
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