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新型抗真菌代谢产物发酵条件的响应面优化
被引量:
2
1
作者
陈正杰
朱婉萍
+4 位作者
张书衍
吴绵斌
贺娟
陈华
孟强
《浙江大学学报(工学版)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011年第10期1868-1876,共9页
从浙江东海土壤中筛选获得1株菌株(ZS09-33)能产生抑制白色念珠菌的代谢产物,经16SrRNA序列测定和Genbank数据库搜索,确定其属于Bacillus amyloliquefaciens.Plackett-Burman实验发现,影响抗真菌效价的主要因素为:黄豆饼粉、可溶性淀粉...
从浙江东海土壤中筛选获得1株菌株(ZS09-33)能产生抑制白色念珠菌的代谢产物,经16SrRNA序列测定和Genbank数据库搜索,确定其属于Bacillus amyloliquefaciens.Plackett-Burman实验发现,影响抗真菌效价的主要因素为:黄豆饼粉、可溶性淀粉以及(NH4)2SO4.最陡爬坡实验和Box-Behnken实验得到响应面(RSM)优化的最佳培养基质量浓度为:黄豆饼粉2.72g/L,可溶性淀粉26.67g/L,(NH4)2SO43.95g/L,K2HPO41.8g/L,NaCl 2g/L,MgSO40.5g/L,CaCO30.72g/L,CuSO40.02g/L,FeSO40.02g/L,MnSO40.02g/L,初始pH 6.5.在此条件下发酵液抗真菌效价达16 806.48U/mL,与模型值相符.与单因素优化结果相比,效价提高了239%.产物经ESI/MS、1 H-NMR及13 C-NMR确定为相对分子质量为402的大环内脂类物质.
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关键词
抗真菌
芽孢杆菌
16S
RRNA
Plackett-Burman实验
响应面法(RSM)
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职称材料
新型抗真菌抗生素分离与纯化
2
作者
王学万
陈华
+1 位作者
陈正杰
吴绵斌
《浙江大学学报(工学版)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011年第1期191-196,共6页
对1株不吸水链霉菌(Streptomyces ahygroscopicus ZJUIB001)产生的新型抗真菌抗生素进行分离纯化研究.通过发酵液经离心去沉淀后,采用氯仿和石油醚萃取.萃取后的水相调节至pH 2并采用Dowex 50×16阳离子交换树脂和XAD7HP大孔吸附树...
对1株不吸水链霉菌(Streptomyces ahygroscopicus ZJUIB001)产生的新型抗真菌抗生素进行分离纯化研究.通过发酵液经离心去沉淀后,采用氯仿和石油醚萃取.萃取后的水相调节至pH 2并采用Dowex 50×16阳离子交换树脂和XAD7HP大孔吸附树脂分离其中的抗真菌代谢物,对分离样品进行反相高效液相色谱分析.Dowex50×16层析条件优化如下:pH=2的萃取浓缩液以2倍床层体积/h的流速上柱,在去离子水冲洗后,用0.6mol/L氨水以1倍床层体积/h流速洗脱;Amberlite XAD7HP大孔吸附树脂层析条件为:体积分数为10%和70%的乙醇水溶液阶跃洗脱.将纯化得到的样品用高效液相色谱(HPLC)系统检测,色谱柱为YMC-C18(5μm,Φ4.6mm×250mm)氰基柱,流动相为0.01mol/L的乙酸铵缓冲液(pH=4.3),流速为1mL/min,检测波长为220nm.HPLC检测结果显示,分离的抗生素纯度和效价分别达到93.0%和21 632U/mg.
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关键词
嘧啶核苷
抗真菌抗生素
分离纯化
离子交换层析
大孔吸附层析
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职称材料
题名
新型抗真菌代谢产物发酵条件的响应面优化
被引量:
2
1
作者
陈正杰
朱婉萍
张书衍
吴绵斌
贺娟
陈华
孟强
机构
浙江
大学化学工程与生物工程学系
浙江省抗真菌药物研究重点实验室
出处
《浙江大学学报(工学版)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011年第10期1868-1876,共9页
基金
浙江科技厅计划资助项目(2009C33019)
台州市-浙江大学科技合作专项资金资助项目(07ZJU001
08ZJU007)
文摘
从浙江东海土壤中筛选获得1株菌株(ZS09-33)能产生抑制白色念珠菌的代谢产物,经16SrRNA序列测定和Genbank数据库搜索,确定其属于Bacillus amyloliquefaciens.Plackett-Burman实验发现,影响抗真菌效价的主要因素为:黄豆饼粉、可溶性淀粉以及(NH4)2SO4.最陡爬坡实验和Box-Behnken实验得到响应面(RSM)优化的最佳培养基质量浓度为:黄豆饼粉2.72g/L,可溶性淀粉26.67g/L,(NH4)2SO43.95g/L,K2HPO41.8g/L,NaCl 2g/L,MgSO40.5g/L,CaCO30.72g/L,CuSO40.02g/L,FeSO40.02g/L,MnSO40.02g/L,初始pH 6.5.在此条件下发酵液抗真菌效价达16 806.48U/mL,与模型值相符.与单因素优化结果相比,效价提高了239%.产物经ESI/MS、1 H-NMR及13 C-NMR确定为相对分子质量为402的大环内脂类物质.
关键词
抗真菌
芽孢杆菌
16S
RRNA
Plackett-Burman实验
响应面法(RSM)
Keywords
antifungal Bacillus
16S rRNA
Plackett-Burman design
response surface methodology (RSM)
分类号
Q814.2 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
新型抗真菌抗生素分离与纯化
2
作者
王学万
陈华
陈正杰
吴绵斌
机构
浙江
大学化学工程与生物工程学系
浙江省抗真菌药物研究重点实验室
出处
《浙江大学学报(工学版)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011年第1期191-196,共6页
基金
浙江省科技厅计划资助项目(2009C33019)
台州市-浙江大学科技合作专项资金资助项目(08ZJU007)
文摘
对1株不吸水链霉菌(Streptomyces ahygroscopicus ZJUIB001)产生的新型抗真菌抗生素进行分离纯化研究.通过发酵液经离心去沉淀后,采用氯仿和石油醚萃取.萃取后的水相调节至pH 2并采用Dowex 50×16阳离子交换树脂和XAD7HP大孔吸附树脂分离其中的抗真菌代谢物,对分离样品进行反相高效液相色谱分析.Dowex50×16层析条件优化如下:pH=2的萃取浓缩液以2倍床层体积/h的流速上柱,在去离子水冲洗后,用0.6mol/L氨水以1倍床层体积/h流速洗脱;Amberlite XAD7HP大孔吸附树脂层析条件为:体积分数为10%和70%的乙醇水溶液阶跃洗脱.将纯化得到的样品用高效液相色谱(HPLC)系统检测,色谱柱为YMC-C18(5μm,Φ4.6mm×250mm)氰基柱,流动相为0.01mol/L的乙酸铵缓冲液(pH=4.3),流速为1mL/min,检测波长为220nm.HPLC检测结果显示,分离的抗生素纯度和效价分别达到93.0%和21 632U/mg.
关键词
嘧啶核苷
抗真菌抗生素
分离纯化
离子交换层析
大孔吸附层析
Keywords
pyrimidine nucleoside
antifungal antibiotic
isolation and purification
ion exchange chromatography
macroporous adsorption chromatography
分类号
Q814.2 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
新型抗真菌代谢产物发酵条件的响应面优化
陈正杰
朱婉萍
张书衍
吴绵斌
贺娟
陈华
孟强
《浙江大学学报(工学版)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
新型抗真菌抗生素分离与纯化
王学万
陈华
陈正杰
吴绵斌
《浙江大学学报(工学版)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
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职称材料
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