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实验兔出血症病毒检测方法的建立与免疫效果调查 被引量:1
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作者 周文伟 刘月环 《中国比较医学杂志》 CAS 2010年第4期59-62,共4页
目的检测全省六个实验兔场的兔子所携带的兔出血症病毒(RHDV)情况,调查实验兔RHDV抗体水平,评价不同疫苗的免疫效果,比较HAI与ELISA两种方法的符合率。方法采用HAI、ELISA方法对1168份实验兔RHDV抗体进行了检测,并与RT-PCR方法的检测结... 目的检测全省六个实验兔场的兔子所携带的兔出血症病毒(RHDV)情况,调查实验兔RHDV抗体水平,评价不同疫苗的免疫效果,比较HAI与ELISA两种方法的符合率。方法采用HAI、ELISA方法对1168份实验兔RHDV抗体进行了检测,并与RT-PCR方法的检测结果进行对比分析。结果我省实验兔免疫情况较好,不同饲养场的实验兔免疫合格率虽有不同,但未发生疫情。通过比较发现ELISA法检测的抗体合格率明显高于HAI法。结论LISA、HAI和RT-PCR方法均适合实验兔RHDV的检测。 展开更多
关键词 兔出血症病毒(RHDV) 血凝抑制实验(HAI) 酶联免疫吸附实验(ELISA) 反转录聚合酶链式扩增(RT-PCR)
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兔出血症病毒遗传变异分析及RT—PCR检测方法的建立 被引量:10
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作者 刘月环 楼琦 +2 位作者 金晓音 郭红刚 石巧娟 《中国比较医学杂志》 CAS 2008年第11期44-49,共6页
目的获得兔出血症病毒(浙江分离株)近20年间遗传变异概况,建立兔出血症病毒的RT—PCR检测方法。方法对1989~2006年间的7株RHDV浙江分离株的衣壳蛋白基因(VP60)进行了克隆与测序,并与国内、外RHDV的基因组序列进行了遗传比对和分析... 目的获得兔出血症病毒(浙江分离株)近20年间遗传变异概况,建立兔出血症病毒的RT—PCR检测方法。方法对1989~2006年间的7株RHDV浙江分离株的衣壳蛋白基因(VP60)进行了克隆与测序,并与国内、外RHDV的基因组序列进行了遗传比对和分析;根据兔出血症病毒株的VP60设计引物,对20只人工感染兔的实质脏器、全血和350只实验兔全血样本进行了检测。结果7株RHDV的VP60基因均由1740个核苷酸组成,编码580个氨基酸。它们与参考序列之间的氨基酸同源性为94.0%~99.8%。系统发生树分析结果显示,RHDV可划分为2个大的基因群,浙江(中国)的RHDV分离株主要集中于C亚群。RT—PCR检测方法表明20只实验兔全部扩出预期条带,而350只实验兔全血检测中出现13只RHDV可疑样本。经血凝抑制试验检测,13例PCR阳性样品中有10个HAI阳性,3个阴性。检测敏感度达100%,特异性为99.12%,经统计检验,kappa=0.865,表明PCR检出RHDV的结果与HAI高度一致。结论RHDV基因群之间的遗传距离有逐渐加大的趋势。我们建立的RT—PCR法可用于RHDV浙江分离株的检测,用RT—PCR检测全血中RHDV方法的建立为活体检测RHDV打下了基础。 展开更多
关键词 兔病毒性出血症病毒 衣壳蛋白基因 遗传变异 RT—PCR
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