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实验兔出血症病毒检测方法的建立与免疫效果调查
被引量:
1
1
作者
周文伟
刘月环
《中国比较医学杂志》
CAS
2010年第4期59-62,共4页
目的检测全省六个实验兔场的兔子所携带的兔出血症病毒(RHDV)情况,调查实验兔RHDV抗体水平,评价不同疫苗的免疫效果,比较HAI与ELISA两种方法的符合率。方法采用HAI、ELISA方法对1168份实验兔RHDV抗体进行了检测,并与RT-PCR方法的检测结...
目的检测全省六个实验兔场的兔子所携带的兔出血症病毒(RHDV)情况,调查实验兔RHDV抗体水平,评价不同疫苗的免疫效果,比较HAI与ELISA两种方法的符合率。方法采用HAI、ELISA方法对1168份实验兔RHDV抗体进行了检测,并与RT-PCR方法的检测结果进行对比分析。结果我省实验兔免疫情况较好,不同饲养场的实验兔免疫合格率虽有不同,但未发生疫情。通过比较发现ELISA法检测的抗体合格率明显高于HAI法。结论LISA、HAI和RT-PCR方法均适合实验兔RHDV的检测。
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关键词
兔出血症病毒(RHDV)
血凝抑制实验(HAI)
酶联免疫吸附实验(ELISA)
反转录聚合酶链式扩增(RT-PCR)
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职称材料
兔出血症病毒遗传变异分析及RT—PCR检测方法的建立
被引量:
10
2
作者
刘月环
楼琦
+2 位作者
金晓音
郭红刚
石巧娟
《中国比较医学杂志》
CAS
2008年第11期44-49,共6页
目的获得兔出血症病毒(浙江分离株)近20年间遗传变异概况,建立兔出血症病毒的RT—PCR检测方法。方法对1989~2006年间的7株RHDV浙江分离株的衣壳蛋白基因(VP60)进行了克隆与测序,并与国内、外RHDV的基因组序列进行了遗传比对和分析...
目的获得兔出血症病毒(浙江分离株)近20年间遗传变异概况,建立兔出血症病毒的RT—PCR检测方法。方法对1989~2006年间的7株RHDV浙江分离株的衣壳蛋白基因(VP60)进行了克隆与测序,并与国内、外RHDV的基因组序列进行了遗传比对和分析;根据兔出血症病毒株的VP60设计引物,对20只人工感染兔的实质脏器、全血和350只实验兔全血样本进行了检测。结果7株RHDV的VP60基因均由1740个核苷酸组成,编码580个氨基酸。它们与参考序列之间的氨基酸同源性为94.0%~99.8%。系统发生树分析结果显示,RHDV可划分为2个大的基因群,浙江(中国)的RHDV分离株主要集中于C亚群。RT—PCR检测方法表明20只实验兔全部扩出预期条带,而350只实验兔全血检测中出现13只RHDV可疑样本。经血凝抑制试验检测,13例PCR阳性样品中有10个HAI阳性,3个阴性。检测敏感度达100%,特异性为99.12%,经统计检验,kappa=0.865,表明PCR检出RHDV的结果与HAI高度一致。结论RHDV基因群之间的遗传距离有逐渐加大的趋势。我们建立的RT—PCR法可用于RHDV浙江分离株的检测,用RT—PCR检测全血中RHDV方法的建立为活体检测RHDV打下了基础。
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关键词
兔病毒性出血症病毒
衣壳蛋白基因
遗传变异
RT—PCR
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职称材料
题名
实验兔出血症病毒检测方法的建立与免疫效果调查
被引量:
1
1
作者
周文伟
刘月环
机构
浙江省医学科学院浙江省实验动物中心浙江省实验动物质量监督检测站
出处
《中国比较医学杂志》
CAS
2010年第4期59-62,共4页
基金
浙江省科技厅实验动物科技计划项目(2007F80011)
文摘
目的检测全省六个实验兔场的兔子所携带的兔出血症病毒(RHDV)情况,调查实验兔RHDV抗体水平,评价不同疫苗的免疫效果,比较HAI与ELISA两种方法的符合率。方法采用HAI、ELISA方法对1168份实验兔RHDV抗体进行了检测,并与RT-PCR方法的检测结果进行对比分析。结果我省实验兔免疫情况较好,不同饲养场的实验兔免疫合格率虽有不同,但未发生疫情。通过比较发现ELISA法检测的抗体合格率明显高于HAI法。结论LISA、HAI和RT-PCR方法均适合实验兔RHDV的检测。
关键词
兔出血症病毒(RHDV)
血凝抑制实验(HAI)
酶联免疫吸附实验(ELISA)
反转录聚合酶链式扩增(RT-PCR)
Keywords
Rabbit hemorrhagic disease virus
RHDV
Hemagglutination inhibition
HAI
Enzyme-linked immunosorbent assay
ELISA
Reverse transcription-polymerase chain reaction
RT-PCR
分类号
R-33 [医药卫生]
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职称材料
题名
兔出血症病毒遗传变异分析及RT—PCR检测方法的建立
被引量:
10
2
作者
刘月环
楼琦
金晓音
郭红刚
石巧娟
机构
浙江省医学科学院浙江省实验动物中心浙江省实验动物质量监督检测站
出处
《中国比较医学杂志》
CAS
2008年第11期44-49,共6页
基金
浙江省科技厅实验动物平台项目(2007F80011)
文摘
目的获得兔出血症病毒(浙江分离株)近20年间遗传变异概况,建立兔出血症病毒的RT—PCR检测方法。方法对1989~2006年间的7株RHDV浙江分离株的衣壳蛋白基因(VP60)进行了克隆与测序,并与国内、外RHDV的基因组序列进行了遗传比对和分析;根据兔出血症病毒株的VP60设计引物,对20只人工感染兔的实质脏器、全血和350只实验兔全血样本进行了检测。结果7株RHDV的VP60基因均由1740个核苷酸组成,编码580个氨基酸。它们与参考序列之间的氨基酸同源性为94.0%~99.8%。系统发生树分析结果显示,RHDV可划分为2个大的基因群,浙江(中国)的RHDV分离株主要集中于C亚群。RT—PCR检测方法表明20只实验兔全部扩出预期条带,而350只实验兔全血检测中出现13只RHDV可疑样本。经血凝抑制试验检测,13例PCR阳性样品中有10个HAI阳性,3个阴性。检测敏感度达100%,特异性为99.12%,经统计检验,kappa=0.865,表明PCR检出RHDV的结果与HAI高度一致。结论RHDV基因群之间的遗传距离有逐渐加大的趋势。我们建立的RT—PCR法可用于RHDV浙江分离株的检测,用RT—PCR检测全血中RHDV方法的建立为活体检测RHDV打下了基础。
关键词
兔病毒性出血症病毒
衣壳蛋白基因
遗传变异
RT—PCR
Keywords
Rabbit hemorrhagic disease virus
Vp60
Genetic variable
RT-PCR
分类号
R373 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
实验兔出血症病毒检测方法的建立与免疫效果调查
周文伟
刘月环
《中国比较医学杂志》
CAS
2010
1
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职称材料
2
兔出血症病毒遗传变异分析及RT—PCR检测方法的建立
刘月环
楼琦
金晓音
郭红刚
石巧娟
《中国比较医学杂志》
CAS
2008
10
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已选择
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