实验兔出血症病毒检测方法的建立与免疫效果调查 被引量：1

1

作者 周文伟 刘月环 《中国比较医学杂志》 CAS 2010年第4期59-62,共4页

目的检测全省六个实验兔场的兔子所携带的兔出血症病毒(RHDV)情况,调查实验兔RHDV抗体水平,评价不同疫苗的免疫效果,比较HAI与ELISA两种方法的符合率。方法采用HAI、ELISA方法对1168份实验兔RHDV抗体进行了检测,并与RT-PCR方法的检测结... 目的检测全省六个实验兔场的兔子所携带的兔出血症病毒(RHDV)情况,调查实验兔RHDV抗体水平,评价不同疫苗的免疫效果,比较HAI与ELISA两种方法的符合率。方法采用HAI、ELISA方法对1168份实验兔RHDV抗体进行了检测,并与RT-PCR方法的检测结果进行对比分析。结果我省实验兔免疫情况较好,不同饲养场的实验兔免疫合格率虽有不同,但未发生疫情。通过比较发现ELISA法检测的抗体合格率明显高于HAI法。结论LISA、HAI和RT-PCR方法均适合实验兔RHDV的检测。 展开更多

关键词 兔出血症病毒(RHDV) 血凝抑制实验(HAI) 酶联免疫吸附实验(ELISA) 反转录聚合酶链式扩增(RT-PCR)

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H-FABP基因的多态性和营养因素对猪肉质的影响 被引量：13

2

作者 李长龙 萨晓婴 +1 位作者 孟和 潘玉春 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期713-718,共6页

遗传和营养因素都能影响猪肉的品质。但是,到目前为止同时研究遗传和营养因素对肉质影响的报道很少。在本研究中,136头PIC5系杂交猪,体重65kg,被随机分成4组,各组分别给予不同日粮。在饲养35d、体重大约90kg时统一屠宰并且进行肉质测定... 遗传和营养因素都能影响猪肉的品质。但是,到目前为止同时研究遗传和营养因素对肉质影响的报道很少。在本研究中,136头PIC5系杂交猪,体重65kg,被随机分成4组,各组分别给予不同日粮。在饲养35d、体重大约90kg时统一屠宰并且进行肉质测定、H-FABP基因分型及其与肉质性状的关联分析。结果表明:(1)所采用的3种日粮对肉色、屠宰后24h的pH、肌内脂肪和肌肉蛋白含量有极显著的影响;(2)H-FABP基因型对肌内脂肪和肌肉蛋白含量存在极显著的影响;(3)H-FABP基因多态性和营养因素的交互作用对pH和肌内脂肪含量均有显著的影响,对照组的AA基因型具有最高pH值,高维生素E组的AA基因型具有最高肌内脂肪值。实验结果提示在关于猪肉质的育种和生产过程中应该同时考虑营养因素和遗传因素。 展开更多

关键词 H—FABP 营养因子 猪肉品质 PCR—RFLP

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长爪沙鼠线粒体DNA控制区全序列测定及分析 被引量：9

3

作者 李长龙 卢领群 +3 位作者 郭红刚 柯贤福 戴方伟 萨晓婴 《中国比较医学杂志》 CAS 2010年第4期40-45,共6页

目的对长爪沙鼠线粒体DNA控制区全序列进行测定,并对其进行鉴定及进化分析。方法根据长爪沙鼠已知基因序列设计引物,采用PCR产物测序法,对所得的片段进行测序鉴定。结合已公布啮齿类动物D-loop区序列,分析其碱基组成、遗传距离、并基于... 目的对长爪沙鼠线粒体DNA控制区全序列进行测定,并对其进行鉴定及进化分析。方法根据长爪沙鼠已知基因序列设计引物,采用PCR产物测序法,对所得的片段进行测序鉴定。结合已公布啮齿类动物D-loop区序列,分析其碱基组成、遗传距离、并基于最小进化法和UPGMA法构建系统进化树。结果获得长爪沙鼠D-loop区序列,其与家鼠、小家鼠和仓鼠平均同源性为58%;碱基组成分析显示,长爪沙鼠与啮齿类动物有相似的碱基组成和碱基偏离,其A-skew和G-skew分别为0.0047和-0.28。进化分析结果显示,长爪沙鼠与家鼠(0.35)、黑家鼠(0.38)和仓鼠(0.39)具有较近的遗传距离,其分化顺序为跳鼠、蔗鼠、长爪沙鼠、仓鼠、家鼠和小家鼠。结论本研究获得长爪沙鼠D-loop区全序列,确定了长爪沙鼠与仓鼠、家鼠、小家鼠及其它啮齿动物的进化关系,为长爪沙鼠进化研究、线粒体的结构和功能研究奠定基础。 展开更多

关键词 长爪沙鼠 D-LOOP区 序列测定 进化分析

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长爪沙鼠发情周期规律与判定方法 被引量：4

4

作者 陈立青 戴方伟 +2 位作者 郭红刚 卢领群 萨晓婴 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2014年第1期67-70,I0013,共5页

目的研究长爪沙鼠发情周期,揭示发情规律,优化判定方法。方法连续18 d采集50只长爪沙鼠阴道上皮脱落细胞涂片,采用角化细胞计数法研究长爪沙鼠发情周期规律。比较瑞氏染色、HE染色和直接镜检判定发情周期4个时相的优缺点。结果长爪沙鼠... 目的研究长爪沙鼠发情周期,揭示发情规律,优化判定方法。方法连续18 d采集50只长爪沙鼠阴道上皮脱落细胞涂片,采用角化细胞计数法研究长爪沙鼠发情周期规律。比较瑞氏染色、HE染色和直接镜检判定发情周期4个时相的优缺点。结果长爪沙鼠的发情周期有稳定型、不稳定型、假孕三种类型。其中稳定型占68.6%,发情周期为(106.3±35.0)h,可分为4个时相。4个时相角化细胞的比例分别为发情前期(13.5±7.8)%、发情期(86.7±9.9)%、发情后期(27.9±12.8)%和发情间期(3.3±2.8)%。结论角化细胞计数能准确地判定长爪沙鼠的发情周期及各个时相。直接镜检法能快速反映阴道脱落细胞的形态。 展开更多

关键词 发情周期 长爪沙鼠 阴道涂片 角化细胞 细胞学

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兔出血症病毒遗传变异分析及RT—PCR检测方法的建立 被引量：10

5

作者 刘月环 楼琦 +2 位作者 金晓音 郭红刚 石巧娟 《中国比较医学杂志》 CAS 2008年第11期44-49,共6页

目的获得兔出血症病毒（浙江分离株）近20年间遗传变异概况,建立兔出血症病毒的RT—PCR检测方法。方法对1989～2006年间的7株RHDV浙江分离株的衣壳蛋白基因（VP60）进行了克隆与测序,并与国内、外RHDV的基因组序列进行了遗传比对和分析... 目的获得兔出血症病毒（浙江分离株）近20年间遗传变异概况,建立兔出血症病毒的RT—PCR检测方法。方法对1989～2006年间的7株RHDV浙江分离株的衣壳蛋白基因（VP60）进行了克隆与测序,并与国内、外RHDV的基因组序列进行了遗传比对和分析;根据兔出血症病毒株的VP60设计引物,对20只人工感染兔的实质脏器、全血和350只实验兔全血样本进行了检测。结果7株RHDV的VP60基因均由1740个核苷酸组成,编码580个氨基酸。它们与参考序列之间的氨基酸同源性为94.0%～99.8%。系统发生树分析结果显示,RHDV可划分为2个大的基因群,浙江（中国）的RHDV分离株主要集中于C亚群。RT—PCR检测方法表明20只实验兔全部扩出预期条带,而350只实验兔全血检测中出现13只RHDV可疑样本。经血凝抑制试验检测,13例PCR阳性样品中有10个HAI阳性,3个阴性。检测敏感度达100%,特异性为99.12%,经统计检验,kappa=0.865,表明PCR检出RHDV的结果与HAI高度一致。结论RHDV基因群之间的遗传距离有逐渐加大的趋势。我们建立的RT—PCR法可用于RHDV浙江分离株的检测,用RT—PCR检测全血中RHDV方法的建立为活体检测RHDV打下了基础。 展开更多

关键词 兔病毒性出血症病毒 衣壳蛋白基因 遗传变异 RT—PCR

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长爪沙鼠高胆固醇血症模型的建立与辛伐他汀的作用 被引量：8

6

作者 李长龙 郭红刚 +3 位作者 石巧娟 卢领群 楼琦 萨晓婴 《中国比较医学杂志》 CAS 2010年第8期44-49,共6页

目的探索长爪沙鼠高胆固醇血症模型建立及辛伐他汀的影响。方法在饲喂长爪沙鼠高脂饲料的同时给予不同浓度辛伐他汀抑制胆固醇生物合成,通过观察肝脏颜色,测量体重、肝重、TC、LDL-C及HDL-C等血脂和肝功能指标判断高脂饲料和辛伐他汀对... 目的探索长爪沙鼠高胆固醇血症模型建立及辛伐他汀的影响。方法在饲喂长爪沙鼠高脂饲料的同时给予不同浓度辛伐他汀抑制胆固醇生物合成,通过观察肝脏颜色,测量体重、肝重、TC、LDL-C及HDL-C等血脂和肝功能指标判断高脂饲料和辛伐他汀对血脂和肝脏功能的影响。结果动物体重、肝重和肝脏指数没有显著变化。高脂饲料能够促进脂肪在肝脏的沉积,但是对AST和ALT等肝脏功能指标影响不显著;辛伐他汀能够有效抑制TC、LDL-C、HDL-C、TBA和GLU的升高,但对其他指标影响不明显。结论高脂饲料能够快速建立长爪沙鼠高胆固醇血症模型;辛伐他汀能够抑制内源性胆固醇的合成从而有效抑制血浆胆固醇(TC)、LDL-C和HDL-C的升高。结果表明,特殊的反馈调节机制导致长爪沙鼠无法在大量摄入胆固醇时终止内源性胆固醇的合成。长爪沙鼠特殊的反馈调节机制可能是易发高胆固醇血症的一个主要原因。 展开更多

关键词 长爪沙鼠 高胆固醇血症 辛伐他汀 反馈调节

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动态分析沙鼠非酒精性脂肪肝病形成及生化影响 被引量：6

7

作者 李巍 石巧娟 +3 位作者 郭红刚 楼琦 卢领群 萨晓婴 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第8期44-48,52,I0002,共7页

目的分析高脂饮食导致的沙鼠NAFLD疾病进展中脂质代谢、肝功能、抗氧化等方面的变化,探讨沙鼠NAFLD的形成机理。方法雄性沙鼠120只,随机分为对照组和模型组。对照组给予普通饲料,模型组高脂饮食建立NAFLD模型。分别于1、2、4、6、8、16... 目的分析高脂饮食导致的沙鼠NAFLD疾病进展中脂质代谢、肝功能、抗氧化等方面的变化,探讨沙鼠NAFLD的形成机理。方法雄性沙鼠120只,随机分为对照组和模型组。对照组给予普通饲料,模型组高脂饮食建立NAFLD模型。分别于1、2、4、6、8、16周每组各处死10只动物,观察肝脏病理变化,计算肝指数,检测血清CHO、TG、LDL-C、HDL-C、GOP、GPT及肝组织的SOD、GSH-PX、CAT活性和FFA含量。结果模型组病理观察2周形成单纯性脂肪肝,6周动物门管区有轻度炎症,8周出现腺泡Ⅲ带局灶性窦周/细胞周纤维化,16周肝脏中度纤维化;模型组第1、2、4、6、8、16周时CHO、HDL-C、LDL-C及FAA波动性升高,但均高于同期对照组(P<0.05,P<0.01),TG在1、2、4周高于同期对照组(P<0.05,P<0.01);16周末GOT、GPT出现了显著性升高(P<0.01)。抗氧化酶GSH-PX、CAT、SOD活性模型组在第8～16周显著性降低(P<0.05,P<0.01)。结论高脂饮食使沙鼠2周形成单纯性脂肪肝模型后,随饲喂时间延长,16周末可发展为中度肝纤维化。脂质代谢紊乱与氧化应激在沙鼠NAFLD进展中的发挥了不同的作用。 展开更多

关键词 沙鼠 高脂饮食 模型 动物 非酒精性脂肪肝 单纯性脂肪肝 肝纤维化

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长春新碱诱导建立人结肠癌多药耐受性小鼠模型及MDR1和MRP1基因表达 被引量：3

8

作者 李长龙 柯贤福 +3 位作者 郭红刚 卢领群 戴方伟 萨晓婴 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2012年第4期56-61,共6页

目的建立人结肠癌多药耐受性动物模型并初步探索其耐药机制。方法结合体内外诱导方法建立人结肠癌多药耐受性动物模型,利用VCR和CTX的肿瘤抑制实验评价其MDR特性;利用real-time PCR和West-ern blotting等方法分析其P-gp/MDR1和MRP1基因... 目的建立人结肠癌多药耐受性动物模型并初步探索其耐药机制。方法结合体内外诱导方法建立人结肠癌多药耐受性动物模型,利用VCR和CTX的肿瘤抑制实验评价其MDR特性;利用real-time PCR和West-ern blotting等方法分析其P-gp/MDR1和MRP1基因和蛋白的表达。结果肿瘤抑制实验结果显示,MDR和敏感型结肠癌模型的肿瘤生长速度差异不显著,MDR结肠癌动物模型对于VCR和CTX的耐药性均有较大程度的提高;表达分析结果显示,人结肠癌MDR动物模型的P-gp/MDR1表达水平有较大提高,而MRP1表达没有显著变化。结论人结肠癌多药耐受性动物模型具有较好的多药耐受性,其多药耐受性表型主要是由于P-gp/MDR1过量表达所导致。 展开更多

关键词 结肠癌动物模型 多药耐药性 长春新碱

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长爪沙鼠ATPase8,ATPase6,COX3基因的克隆及序列分析 被引量：3

9

作者 李长龙 柯贤福 +2 位作者 卢领群 郭红刚 萨晓婴 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第7期6-12,共7页

目的对长爪沙鼠线粒体ATPase8,ATPase6,COX3基因全序列进行测定,并对其进行鉴定及进化分析。方法根据长爪沙鼠已知基因序列设计引物,采用PCR产物测序法,对目的片段进行测序鉴定。结合已公布啮齿类动物ATPase8,ATPase6,COX3基因序列,分... 目的对长爪沙鼠线粒体ATPase8,ATPase6,COX3基因全序列进行测定,并对其进行鉴定及进化分析。方法根据长爪沙鼠已知基因序列设计引物,采用PCR产物测序法,对目的片段进行测序鉴定。结合已公布啮齿类动物ATPase8,ATPase6,COX3基因序列,分析其碱基组成、遗传距离、并基于最小进化法和UPGMA法构建系统进化树。结果获得长爪沙鼠线粒体ATPase8,ATPase6,COX3基因全序列,其与家鼠、小家鼠和仓鼠均具有较高的同源性(76～98%);进化分析结果显示,长爪沙鼠与家鼠、黑家鼠和仓鼠遗传距离较近;碱基G的含量分别为6.9%,10.7%,15.2%,符合mtDNA的特点;A+T含量分别为68.2%,64.1%,59.2%,明显低于G+C含量,符合哺乳动物的特点。结论本研究为首次获得长爪沙鼠ATPase8,ATPase6,COX3基因全序列,长爪沙鼠与家鼠、黑家鼠和仓鼠具有较近遗传距离,本研究为长爪沙鼠进化研究、线粒体的结构和功能研究奠定基础。 展开更多

关键词 长爪沙鼠 ATPase8 ATPase6 COX3 克隆 进化分析

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中药化学成分库中结肠癌BRAF^(V600E)抑制剂的筛选 被引量：1

10

作者 张欢欢 方杰 +3 位作者 毛诗莹 杨扬 谢珲 余陈欢 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期514-518,共5页

目的筛选能抑制BRAF^(V600E) CT26细胞株增殖的中药单体化合物。方法通过慢病毒载体感染,构建BRAF^(V600E)稳定表达的CT26细胞稳转株。MTT检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,蛋白印迹检测MEK/ERK信号通路蛋白表达。Discovery Studio筛... 目的筛选能抑制BRAF^(V600E) CT26细胞株增殖的中药单体化合物。方法通过慢病毒载体感染,构建BRAF^(V600E)稳定表达的CT26细胞稳转株。MTT检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,蛋白印迹检测MEK/ERK信号通路蛋白表达。Discovery Studio筛选BRAF^(V600E)高亲和中药单体化合物,并用MTT验证化合物抑制细胞增殖效果。结果与野生型CT26细胞相比,BRAF^(V600E) CT26细胞的增殖和迁移能力明显增强,MEK/ERK通路被进一步激活。芦荟素(aloin)、安格洛苷C(angoroside C)、杯苋甾酮(cyasterone)对BRAFV600E CT26细胞的抑制效果优于野生型CT26细胞(P <0. 05),并能明显降低BRAFV600E的蛋白表达。结论芦荟素、安格洛苷C、杯苋甾酮可能是结肠癌BRAFV600E突变的天然抑制剂。 展开更多

关键词 BRAF^V600E CT26细胞系 细胞增殖 MEK/ERK信号通路 中药单体化合物 抑制剂

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不同方法灭菌饲料对小鼠繁殖性能的影响 被引量：3

11

作者 施张奎 余强 +3 位作者 卢立群 叶亚玉 周文伟 金晓音 《中国比较医学杂志》 CAS 2006年第10期615-616,共2页

目的用60Co-γ射线辐照饲料和高温高压消毒饲料饲喂SPF级ICR小鼠后的效果观察。方法对两种不同方法灭菌的饲料分两组饲养动物进行比较、每周称重1次,并进行仔一代繁殖性能观察、测定。结果与结论小鼠的生长、繁殖性能等指标均符合其生... 目的用60Co-γ射线辐照饲料和高温高压消毒饲料饲喂SPF级ICR小鼠后的效果观察。方法对两种不同方法灭菌的饲料分两组饲养动物进行比较、每周称重1次,并进行仔一代繁殖性能观察、测定。结果与结论小鼠的生长、繁殖性能等指标均符合其生物学特性(P>0.05)。 展开更多

关键词 动物饲料 灭菌 繁殖

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Anti-miR34c树状纳米颗粒对裸鼠肝纤维化的治疗作用 被引量：1

12

作者 张欢欢 方杰 +3 位作者 俞文英 杨扬 余陈欢 应华忠 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期587-591,共5页

目的探索anti-miR34c树状纳米颗粒对裸鼠肝纤维化的治疗效果。方法将清洁级(20±2)g裸鼠随机分为正常组、模型组、anti-miR34c树状纳米颗粒治疗组,每组5只,腹腔注射四氯化碳诱导肝纤维化模型。HE染色观察肝组织病理变化,Masson染色... 目的探索anti-miR34c树状纳米颗粒对裸鼠肝纤维化的治疗效果。方法将清洁级(20±2)g裸鼠随机分为正常组、模型组、anti-miR34c树状纳米颗粒治疗组,每组5只,腹腔注射四氯化碳诱导肝纤维化模型。HE染色观察肝组织病理变化,Masson染色评价胶原沉积情况,ELISA检测血清生化指标,免疫组化检测TGF-β和α-SAM在肝组织中的表达变化。结果 anti-miR34c树状纳米颗粒治疗组的肝组织炎症细胞浸润减少,胶原沉积降低,肝纤维化指标TGFβ和α-SAM表达降低,血清生化指标好转。结论 anti-miR34c的树状纳米颗粒能够有效改善裸鼠肝纤维化肝损伤,有望成为治疗肝纤维化的新策略。 展开更多

关键词 肝纤维化 anti-miR34c 树状纳米颗粒

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利用双重PCR技术研究长爪沙鼠的微卫星结构 被引量：1

13

作者 刘月环 柯贤福 +2 位作者 马伟峰 郭红刚 萨晓婴 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2008年第4期282-288,共7页

目的为了建立快速检测长爪沙鼠群体遗传多样性的方法及获得Z:ZCLA长爪沙鼠封闭群现用微卫星位点的结构。方法利用17个微卫星位点(9个来自长爪沙鼠,8个来自大小鼠)进行了PCR反应体系及反应条件的优化,组合了6组双重PCR及两个复合式点样,... 目的为了建立快速检测长爪沙鼠群体遗传多样性的方法及获得Z:ZCLA长爪沙鼠封闭群现用微卫星位点的结构。方法利用17个微卫星位点(9个来自长爪沙鼠,8个来自大小鼠)进行了PCR反应体系及反应条件的优化,组合了6组双重PCR及两个复合式点样,用上述8个组合对普通级Z:ZCLA长爪沙鼠封闭群43、444、5三个世代核心群各100只种鼠进行遗传检测。结果三个世代的300只种鼠的检测结果表明,9个长爪沙鼠位点均为微卫星,其中7个位点为完全型的微卫星,1个为复合型,1个为不完全型,多态性主要表现在核心序列的重复;来自大小鼠的8个微卫星位点,有7个在Z:ZCLA长爪沙鼠核心群中得到有效扩增,只有3个位点在三个世代中均有出现,对测序结果分析后发现,其核心序列均为小卫星。结论来自长爪沙鼠的位点,无论结构还是遗传方式均符合微卫星遗传标记的特点,可用作检测长爪沙鼠的群体遗传多样性。 展开更多

关键词 长爪沙鼠 微卫星位点 微卫星结构

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高纯度大豆卵磷脂对中国仓鼠肺细胞染色体畸变作用 被引量：3

14

作者 郭红刚 周莎桑 +2 位作者 戴方伟 石巧娟 萨晓婴 《中国比较医学杂志》 CAS 2009年第8期35-38,I0003,共5页

目的研究高纯度大豆卵磷脂对中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变作用。方法测定高纯度大豆卵磷脂对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行正式试验,分别观察高纯度大豆卵磷脂接触CHL 6 h,24 h及加S9后6 h染色体的畸变情... 目的研究高纯度大豆卵磷脂对中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变作用。方法测定高纯度大豆卵磷脂对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行正式试验,分别观察高纯度大豆卵磷脂接触CHL 6 h,24 h及加S9后6 h染色体的畸变情况,根据标准进行结果判定。结果染毒6 h,24 h及加S9后染毒6h染色体畸变为阴性。结论高纯度大豆卵磷脂不能引起CHL细胞染色体产生畸变作用。 展开更多

关键词 高纯度大豆卵磷脂 中国仓鼠肺细胞 染色体畸变

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长爪沙鼠肝细胞体外分离培养体系的建立 被引量：1

15

作者 陈立青 李长龙 +2 位作者 郭红刚 萨晓婴 陈振文 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2013年第5期15-18,I0005,I0006,共6页

目的建立长爪沙鼠原代肝细胞分离培养体系。方法以雄性长爪沙鼠为供体,采用组织消化法和Seglen两步灌流法分离肝细胞,以台盼蓝染色检测细胞得率和活率,过碘酸-希夫氏反应(PAS)鉴定肝细胞,倒置显微镜观察肝细胞形态变化,并使用含有多种... 目的建立长爪沙鼠原代肝细胞分离培养体系。方法以雄性长爪沙鼠为供体,采用组织消化法和Seglen两步灌流法分离肝细胞,以台盼蓝染色检测细胞得率和活率,过碘酸-希夫氏反应(PAS)鉴定肝细胞,倒置显微镜观察肝细胞形态变化,并使用含有多种细胞因子的培养基维持培养。结果组织消化法和Seglen两步灌流法平均每只长爪沙鼠可分别获得肝细胞(1.33±0.34)×107个、(3.97±1.15)×107个,细胞活率分别为(29.4±6.05)%、(80.3±4.56)%,这两种方法在细胞得率及活率方面存在显著差异。肝细胞内因有大量的糖原颗粒,经PAS染色后被染成红色。结果表明肝细胞在贴壁后72 h内,肝细胞形态发生显著变化。结论采用胶原酶经肝门静脉灌流分离肝细胞是一种高效获得肝细胞的方法。各种细胞因子有利于维持肝细胞在体外的生长分化,长爪沙鼠原代肝细胞分离培养体系的建立将为肝脏相关疾病研究和防治药物的开发提供技术支持。 展开更多

关键词 长爪沙鼠 肝细胞 分离 培养

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日本大耳白黑眼兔在不同生长阶段蛋白质营养与肝脏相关基因表达的关系 被引量：3

16

作者 吕建敏 刘月环 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2010年第3期208-211,I0006,共5页

目的研究日粮粗蛋白水平和生长阶段对日本大耳白黑眼兔(WHBE兔)肝脏相关基因表达的影响。方法采用两因素实验设计,分别选取断奶和2月龄WHBE兔各20只进行为期1个月的幼兔期和育成兔期饲养实验,每个阶段实验均将兔随机分为5组,各组日粮粗... 目的研究日粮粗蛋白水平和生长阶段对日本大耳白黑眼兔(WHBE兔)肝脏相关基因表达的影响。方法采用两因素实验设计,分别选取断奶和2月龄WHBE兔各20只进行为期1个月的幼兔期和育成兔期饲养实验,每个阶段实验均将兔随机分为5组,各组日粮粗蛋白水平分别为12%、14%、16%、18%和20%,实验结束,用实时荧光定量PCR技术测定肝脏胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶-C(PEPCK-C)的mRNA的表达丰度。结果生长阶段和粗蛋白水平均对WHBE兔肝脏IGF-1mRNA的表达丰度有显著影响,育成兔期IGF-1 mRNA的表达丰度明显高于幼兔期;日粮粗蛋白水平为16%和18%时IGF-1mRNA表达丰度较高,显著高于其他3组。PEPCK-C mRNA的表达也以16%粗蛋白组最高,幼兔期和育成兔期之间差异无显著性。结论日粮粗蛋白水平对IGF-1和PEPCK-C基因表达有显著影响,生长阶段与IGF-1mRNA表达密切相关。 展开更多

关键词 日粮 粗蛋白 生长阶段 WHBE兔 基因表达

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未净化Z:ZCLA长爪沙鼠封闭群繁育及遗传稳定性分析 被引量：1

17

作者 李长龙 石巧娟 +3 位作者 卢领群 柯贤福 戴方伟 萨晓婴 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第6期16-20,共5页

目的分析未净化Z:ZCLA长爪沙鼠封闭群繁育和生长指标,并利用直接测序法分析其遗传稳定性。方法随机选择40对Z:ZCLA长爪沙鼠,记录其繁殖胎次、产子数等指标,分析其仔鼠的生长发育情况。遗传稳定性分析选择Z:ZCLA长爪沙鼠非同胞、非亲代个... 目的分析未净化Z:ZCLA长爪沙鼠封闭群繁育和生长指标,并利用直接测序法分析其遗传稳定性。方法随机选择40对Z:ZCLA长爪沙鼠,记录其繁殖胎次、产子数等指标,分析其仔鼠的生长发育情况。遗传稳定性分析选择Z:ZCLA长爪沙鼠非同胞、非亲代个体33只,提取肝脏基因组DNA,PCR扩增D-Loop序列,产物纯化后双向测序,测序结果与Z:ZCLA长爪沙鼠标准序列比对。结果 Z:ZCLA长爪沙鼠每胎产仔7只,胎间隔多在20～60 d间,雄性体重高于雌性。遗传稳定性分析检测发现33只Z:ZCLA长爪沙鼠序列与标准序列完全一致。结论 Z:ZCLA长爪沙鼠群体内未发现遗传多态性,说明该群体具有较好的遗传稳定性。 展开更多

关键词 未净化长爪沙鼠封闭群 遗传稳定性 繁育 D-LOOP

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利用TALEN技术高效制备TXNIP基因敲除小鼠模型 被引量：1

18

作者 张欢欢 刘楚新 +4 位作者 马月 肖丽萍 李飞达 应华忠 刘欢 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第6期9-13,共5页

目的利用显微注射技术注射敲除Txnip基因的TALEN mRNA获得TXNIP敲除小鼠。方法在线设计Txnip敲除位点,构建TALEN载体并在细胞水平验证剪切活性,体外转录TALENs成mRNA并通过显微注射技术注射到C57BL/6J小鼠受精卵,对F0代小鼠进行DNA水平... 目的利用显微注射技术注射敲除Txnip基因的TALEN mRNA获得TXNIP敲除小鼠。方法在线设计Txnip敲除位点,构建TALEN载体并在细胞水平验证剪切活性,体外转录TALENs成mRNA并通过显微注射技术注射到C57BL/6J小鼠受精卵,对F0代小鼠进行DNA水平鉴定获得TXNIP敲除小鼠。结果在Txnip第一外显子上设计了TALEN识别剪切位点,并在细胞水平验证具有剪切活性,注射mRNA到受精卵获得了4只敲除小鼠,其中2只Txnip发生移码突变,成功制备了TXNIP敲除小鼠。结论通过注射TALENs mRNA可以高效制备TXNIP敲除小鼠。 展开更多

关键词 TALEN 显微注射 TXNIP 基因敲除 模型 小鼠

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用19个生化基因位点研究普通级Z:ZCLA长爪沙鼠的遗传多样性 被引量：1

19

作者 刘月环 金晓音 萨晓婴 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2007年第3期208-211,I0005,共5页

目的：调查Z：ZCLA长爪沙鼠原种群普通级长爪沙鼠的遗传多样性。方法：用本实验室自行建立的长爪沙鼠19个生化基因位点的乙酸纤维素膜电泳技术并结合基本群体遗传学指标研究了普通级Z：ZCLA长爪沙鼠100个家系的遗传多态性。结果：Z：ZCL... 目的：调查Z：ZCLA长爪沙鼠原种群普通级长爪沙鼠的遗传多样性。方法：用本实验室自行建立的长爪沙鼠19个生化基因位点的乙酸纤维素膜电泳技术并结合基本群体遗传学指标研究了普通级Z：ZCLA长爪沙鼠100个家系的遗传多态性。结果：Z：ZCLA长爪沙鼠在Es—1、Car-2、Hbb、Gpi-1、Cs-1、Ce-2、Idh-1、Mod—1呈单态，在Es-2、Es-3、Es-4、Es-6、Es-8、Es-9、Es-10、pd-1、gm-1、Trf、Akp-1个位点上呈现多态性，等位基因从2～4个不等，平均等位基因数3，0，平均杂合度0，512，平均多态信息量0．455。结论：提示目前本群遗传多样性水平处于中度多态。 展开更多

关键词 Z:ZCLA长爪沙鼠 生化基因位点 遗传多态性

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MDR1基因单靶点双荧光素酶报告基因系统的建立 被引量：2

20

作者 李长龙 萨晓婴 《中国比较医学杂志》 CAS 2008年第9期28-31,共4页

目的通过构建以MDR1启动子为启动序列的双荧光素酶报告基因系统并进行活性分析,为MDR1基因表达的单靶点调控研究和逆转剂的筛选提供一种有效的方法。方法从HCT-8细胞中提取DNA并克隆含有MDR1基因启动子中Y-box序列。将该序列重组到萤光... 目的通过构建以MDR1启动子为启动序列的双荧光素酶报告基因系统并进行活性分析,为MDR1基因表达的单靶点调控研究和逆转剂的筛选提供一种有效的方法。方法从HCT-8细胞中提取DNA并克隆含有MDR1基因启动子中Y-box序列。将该序列重组到萤光素酶报告基因载体pGL-3-Basic的启动区域中,从而构建报告基因载体pGL-MDR1。将pGL-MDR1和pRL-TK载体共转染到HCT-8和HCT-8/VCR细胞中。通过调节不同载体的比例来优化转染效率。利用MDR1基因激活剂(热诱导)和抑制剂(EGCG)等处理来分析其启动转录活性受外界因素的影响。结果通过直接测序法验证了pGL-MDR1含有MDR1基因启动子Y-box序列且没有出现碱基突变。在pGL-MDR1和pRL-TK的转染比例为5:5时,转染效率最高并具有最高的萤光素酶活性。通过MDR1基因激活处理后表现为时间依赖性地激活MDR1基因的表达,而MDR1基因抑制剂的作用则相反。结论MDR1启动子为启动序列的双荧光素酶报告基因系统建立成功。该系统不但可以用于研究活体生物发光成像和MDR1基因表达的机理,而且可用于单靶点的多药耐药抑制剂的筛选。 展开更多

关键词 MDR1 启动子 荧光素酶报告基因 活性鉴定

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