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浙江柑橘碎叶病的发生、分布及其病原物的遗传多样性分析 被引量：1
1
作者 鹿连明 刘顺民 +4 位作者 安宝聚 杜丹超 胡秀荣 蒲占湑 吕佳 《果树学报》 北大核心 2025年第6期1269-1280,共12页
【目的】明确柑橘碎叶病在浙江省的发生、分布情况及其病原物种群的多样性和遗传分化,探索柑橘碎叶病毒(citrus tatter leaf virus,CTLV)的起源和演化。【方法】对浙江省11个地级市的柑橘产区开展调查和抽样检测,测定202个CTLV分离物外... 【目的】明确柑橘碎叶病在浙江省的发生、分布情况及其病原物种群的多样性和遗传分化,探索柑橘碎叶病毒(citrus tatter leaf virus,CTLV)的起源和演化。【方法】对浙江省11个地级市的柑橘产区开展调查和抽样检测,测定202个CTLV分离物外壳蛋白基因序列,并进行同源性分析和系统发育分析。【结果】柑橘碎叶病在浙江省柑橘产区发生普遍,11个地级市中10个有检出,951份样品中有311份为阳性,阳性率为32.70%。阳性率在不同地区间和不同寄主品种间存在明显差异,以绍兴市和宁波市较高,分别为57.14%和55.91%;杭州市和湖州市较低,为6.52%和0.00%。在检测的43个品种(品系)中,以佛手和枸头橙最高,达100.00%;以枳壳、柠檬、脆蜜金柑和金橘最低,为0.00%。CTLV各分离物之间的遗传多样性丰富,外壳蛋白基因的核苷酸序列和氨基酸序列相似率分别为87.70%~100.00%和91.60%~100.00%。基于外壳蛋白基因序列的系统发育分析发现,来自浙江8个地级市20个寄主品种的111个CTLV分离物明显地分为2个大的分支,其分支与地理来源和寄主品种不存在明显的相关性。【结论】柑橘碎叶病在浙江柑橘产区发生普遍,且广泛危害不同的柑橘品种(品系),其病原物种群存在丰富的遗传多样性,但其分化与地理隔离和寄主品种不存在明显的相关性。研究结果为进一步探究CTLV的起源、系统演化和致病性分化研究奠定了基础,同时也揭示了规范化品种引进和苗木调运程序是预防该病害发生的关键。 展开更多
关键词 柑橘碎叶病 发生 分布 检测 外壳蛋白基因 遗传多样性
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浙江省金华市柑橘黄龙病检测及柑橘木虱分布情况调查 被引量：3
2
作者 刘顺民 吕佳 +6 位作者 杜丹超 蒲占湑 张利平 朱莉 黄振东 陈国庆 鹿连明 《浙江农业科学》 2023年第11期2723-2728,共6页
为了解浙江省金华市柑橘主要种植区内柑橘黄龙病及媒介昆虫柑橘木虱的发生情况,本研究在金华市5个县市区16个乡镇街道进行柑橘黄龙病和柑橘木虱发生情况调查与采样,调查研究结果如下,采集的210份样品中检测出13份样品携带黄龙病菌,黄龙... 为了解浙江省金华市柑橘主要种植区内柑橘黄龙病及媒介昆虫柑橘木虱的发生情况,本研究在金华市5个县市区16个乡镇街道进行柑橘黄龙病和柑橘木虱发生情况调查与采样,调查研究结果如下,采集的210份样品中检测出13份样品携带黄龙病菌,黄龙病菌检出率达6.2%,其中永康市唐先镇样品检出率最高,达20.0%,此外武义县白洋街道,婺城区洋埠镇、罗埠镇,永康市花街镇样品检出率均超过10.0%;通过对黄龙病菌16S rDNA进行特异性扩增,发现克隆后的测序结果与已报道的亚洲柑橘黄龙病菌(Candidatus Liberibacter asiaticus)相似性均在99.5%以上。金华市下辖的兰溪市、婺城区、金东区、武义县及永康市均有柑橘木虱的发生,其中永康市柑橘木虱发生率最高,达到83.3%,兰溪市柑橘木虱发生密度最高,成虫虫口密度为21.0头·株^(-1),有虫株率为41.9%。综合黄龙病检测结果与柑橘木虱发生情况表明,金华市下辖的兰溪市、婺城区、武义县和永康市属于黄龙病和柑橘木虱发生重叠区。 展开更多
关键词 黄龙病 柑橘木虱 实时荧光定量PCR检测
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刀孢蜡蚧菌ZJLP09可湿性粉剂的研制及对柑橘木虱的防效
3
作者 鹿连明 杜丹超 +5 位作者 苏光浪 刘顺民 吴仁超 瞿思民 安宝聚 陈国庆 《中国生物防治学报》 北大核心 2025年第4期796-807,共12页
刀孢蜡蚧菌Lecanicillium psalliotae ZJLP09对柑橘木虱具有强致病性,为进一步提升该菌株在柑橘生产中的实际应用效果,本研究从性能和生物相容性方面对载体和助剂进行了筛选,明确了刀孢蜡蚧菌ZJLP09可湿性粉剂的配方:10%菌株ZJLP09分生... 刀孢蜡蚧菌Lecanicillium psalliotae ZJLP09对柑橘木虱具有强致病性,为进一步提升该菌株在柑橘生产中的实际应用效果,本研究从性能和生物相容性方面对载体和助剂进行了筛选,明确了刀孢蜡蚧菌ZJLP09可湿性粉剂的配方:10%菌株ZJLP09分生孢子粉、1%润湿剂W-2002、1%分散剂Dispwet WP-410、0.3%紫外保护剂抗坏血酸、0.1%孢子萌发促进剂氯化钙、0.05%粘着剂黄原胶、87.55%载体凹凸棒土。所研制的可湿性粉剂的质量指标符合相关生防菌制剂的行业标准,以1.0×10^(8)个孢子/mL浓度处理5 d,制剂在室内条件下对柑橘木虱的校正死亡率可达92.50%,在田间大棚条件下也达80.55%。相较纯孢子悬浮液,刀孢蜡蚧菌ZJLP09可湿性粉剂对柑橘木虱的致死效果显著提升,有望用于柑橘木虱的生物防治。 展开更多
关键词 刀孢蜡蚧菌 可湿性粉剂 柑橘木虱 防效
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‘玉环柚’与‘早玉文旦’果实转录组测序SSR、SNP和Indel标记分析
4
作者 王罗云 孙立方 +4 位作者 徐建国 聂振朋 黄秀 崔长江 柯甫志 《西北农业学报》 北大核心 2025年第4期667-675,共9页
为分析‘玉环柚’和‘早玉文旦’转录组中SSR、SNP和Indel位点的分布特征和差异,以期开发出更多鉴定‘玉环柚’和‘早玉文旦’遗传差异的分子标记,丰富柚类植物的特异DNA分子标记库。本研究以‘玉环柚’和‘早玉文旦’为材料,在果实发育... 为分析‘玉环柚’和‘早玉文旦’转录组中SSR、SNP和Indel位点的分布特征和差异,以期开发出更多鉴定‘玉环柚’和‘早玉文旦’遗传差异的分子标记,丰富柚类植物的特异DNA分子标记库。本研究以‘玉环柚’和‘早玉文旦’为材料,在果实发育的6个不同时期进行取样,获取RNA,进一步测序建库,并利用MI-SA和Samtools软件对两个品种果实转录组数据进行SSR、SNP和Indel位点特征分析。结果表明,基于转录组数据共发现了12697个SSR位点分布于9401个基因序列,发生频率为29.61%;重复基元以单碱基重复数量最多,其次为三碱基重复,五碱基重复最少。出现频率最高的基元为A/T(6859个,占比54.02%)。共检测到742606个SNP位点和77132个Indel位点,两个品种果实在不同发育时期的SNP和Indel位点个数均有不同。分别对SNP和Indel位点出现频率最高的基因进行分析发现,均包含独属于‘玉环柚’或‘早玉文旦’的SNP和Indel位点,基因功能多与抗病性、细胞核结构或者细胞质组成相关。综上认为,柚类转录组中SSR、SNP和Indel位点丰富,‘玉环柚’和‘早玉文旦’的SNP和Indel位点存在差异。 展开更多
关键词 ‘玉环柚’ ‘早玉文旦’ 转录组 SSR SNP INDEL
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温州蜜柑裂果的形态结构特征研究 被引量：6
5
作者 温明霞 吴韶辉 +1 位作者 王鹏 石学根 《浙江农业科学》 2016年第7期1096-1098,共3页
研究温州蜜柑裂果的形态结构特征,可为有效防治裂果提供基础数据。以温州蜜柑为研究对象,采用田间调查与试验分析相结合的方式,对正常果和裂果的形态结构、田间表现以及果形指数等进行了分析。结果表明,裂果果皮和果肉的细胞均出现了结... 研究温州蜜柑裂果的形态结构特征,可为有效防治裂果提供基础数据。以温州蜜柑为研究对象,采用田间调查与试验分析相结合的方式,对正常果和裂果的形态结构、田间表现以及果形指数等进行了分析。结果表明,裂果果皮和果肉的细胞均出现了结构改变、排列松散、间隙增大等现象,细胞之间出现了不可逆转的变化,与果实细胞的衰老密切相关;裂果一般发生在树体的中部及以下部位;果形指数越小,果实越容易裂果。裂果的发生可能与多种因素有关,在防治时要进行综合考虑。 展开更多
关键词 温州蜜柑 裂果 形态结构
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柑橘黄脉病毒一步法RT-PCR快速检测技术探究 被引量：1
6
作者 刘顺民 杜丹超 +6 位作者 蒲占湑 朱莉 张利平 吕佳 黄振东 陈国庆 鹿连明 《浙江农业科学》 2023年第11期2742-2748,共7页
本研究通过对柑橘黄脉病毒(citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)的三基因盒基因、病毒外壳蛋白基因及23 K基因序列分析并设计出7对引物,对引物特异性和灵敏度进行比较,筛选出能够应用于实验室一步法RT-PCR快速检测CYVCV的引物,由... 本研究通过对柑橘黄脉病毒(citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)的三基因盒基因、病毒外壳蛋白基因及23 K基因序列分析并设计出7对引物,对引物特异性和灵敏度进行比较,筛选出能够应用于实验室一步法RT-PCR快速检测CYVCV的引物,由此建立起针对CYVCV一步法RT-PCR快速检测体系。结果表明:引物对TGB1-F/R能从柑橘总RNA稀释160000倍(0.004 ng·μL^(-1))的稀释液中检测出CYVCV,利用该体系对607份田间随机样品进行检测,CYVCV的感染率为10.05%,说明该体系可靠稳定,适用于实验室里的大量检测;一步法RT-PCR获得CYVCV的TGB1、TGB2、TGB3、CP和23 K的特异性片段,片段序列长度分别为678、327、183、978和669 bp,通过克隆和测序结果比对显示,各片段与已报道的CYVCV病毒序列具有较高的同源性,同源性均在99%以上。 展开更多
关键词 柑橘黄脉病毒 一步法RT-PCR 快速检测
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胡颓子科叶绿体基因组系统发育分析与演化趋势推断 被引量：2
7
作者 罗晗睿 王罗云 +1 位作者 张建国 曾艳飞 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期891-903,共13页
[目的]探索胡颓子科叶绿体基因组演化趋势,为胡颓子科植物物种鉴定以及资源开发利用提供理论依据。[方法]该研究从头组装并注释了沙棘属和野牛果属共4个类群的叶绿体基因组,结合已发表的叶绿体基因组序列,比较了胡颓子科各类群叶绿体基... [目的]探索胡颓子科叶绿体基因组演化趋势,为胡颓子科植物物种鉴定以及资源开发利用提供理论依据。[方法]该研究从头组装并注释了沙棘属和野牛果属共4个类群的叶绿体基因组,结合已发表的叶绿体基因组序列,比较了胡颓子科各类群叶绿体基因组的基因构成、重复序列和结构特征,建立了系统发育树,并通过高分化区定位了该科叶绿体基因组的潜在DNA条形码区域。[结果]胡颓子科各属叶绿体基因组在四分体结构、基因数量和排列上高度相似;沙棘属和野牛果属的反向重复区(IR)和整个基因组重复序列数目较胡颓子属有扩张和增加的趋势。胡颓子科18个类群的叶绿体全基因组序列的系统发育树中,胡颓子属个体聚为一支,最先分化出来,沙棘属和野牛果属各自聚为一支,具有最近的共同祖先;从长单拷贝区(LSC)和短单拷贝区(SSC)筛选出3个DNA条形码候选区,其中ycf1基因的鉴定效果最佳。[结论]胡颓子科的叶绿体基因组结构保守,但其非编码区序列在各属间存在明显差异,且IR区序列与重复序列在演化过程中分别有扩张和增多的趋势。研究选定的DNA条形码序列能很好区分胡颓子科各属之间以及胡颓子属内物种间关系。 展开更多
关键词 胡颓子科 叶绿体基因组 系统发育 DNA条形码
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海洋放线菌A3202在不同培养基中的培养特征比较 被引量：1
8
作者 鹿连明 杜丹超 +4 位作者 胡秀荣 蒲占湑 黄振东 张利平 陈国庆 《浙江农业科学》 2017年第3期446-449,共4页
为明确海洋放线菌A3202发酵培养所需的最佳条件,促进对其活性代谢产物抑菌活性研究的深入开展,测定了菌株A3202在不同固体和液体培养基中的形态特征。结果表明:菌株A3202在不同琼脂含量高氏1号培养基上的培养特征存在明显差异,琼脂含量2... 为明确海洋放线菌A3202发酵培养所需的最佳条件,促进对其活性代谢产物抑菌活性研究的深入开展,测定了菌株A3202在不同固体和液体培养基中的形态特征。结果表明:菌株A3202在不同琼脂含量高氏1号培养基上的培养特征存在明显差异,琼脂含量2.0%以下的培养基不利于菌株A3202的气生菌丝生长及孢子形成;该菌株在相同配方但不同黄豆粉来源的黄豆粉培养基上的形态特征也表现出明显差异,现磨生黄豆粉制备的培养基更利于菌株菌丝生长和产孢。 展开更多
关键词 海洋放线菌 培养基 培养特征 黄豆粉
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乙基多杀菌素在杨梅果实和土壤中的残留消解特征及其安全性评价 被引量：7
9
作者 王天玉 林媚 +3 位作者 姚周麟 王鹏 平新亮 方华 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期43-51,共9页
为明确乙基多杀菌素在杨梅园中使用后的环境安全性,建立了杨梅和土壤中乙基多杀菌素的残留分析方法,并在浙江和福建2地进行了为期2年的乙基多杀菌素在杨梅果实和土壤中的残留消解规律研究。植物样品采用乙腈作为提取剂,N-丙基乙二胺和... 为明确乙基多杀菌素在杨梅园中使用后的环境安全性,建立了杨梅和土壤中乙基多杀菌素的残留分析方法,并在浙江和福建2地进行了为期2年的乙基多杀菌素在杨梅果实和土壤中的残留消解规律研究。植物样品采用乙腈作为提取剂,N-丙基乙二胺和无水硫酸镁作为分散净化剂;土壤样品用水和乙腈作为提取剂,用N-丙基乙二胺进行净化,利用超高效液相色谱-串联质谱法检测,通过外标法定量。结果表明:乙基多杀菌素在0.001~0.5 mg/L范围内的质量浓度和峰面积之间具有良好的线性关系(R^(2)>0.999);在0.005~0.5 mg/kg添加水平下,乙基多杀菌素在杨梅果实中的平均回收率为89.40%~101.85%,相对标准偏差为3.63%~7.25%;其在土壤中的平均回收率为95.09%~102.66%,相对标准偏差为3.05%~3.61%;在杨梅果实和土壤中其定量限均为5.0×10^(-3)mg/kg,检测限均为5.2×10^(-5)mg/kg。消解动态试验结果表明:按1.5倍的最高推荐剂量(60 mg/L)于杨梅刚开始转色时喷施1次,乙基多杀菌素在杨梅果实和土壤中的消解动态均符合一级动力学方程,其半衰期分别为4.4~5.2和1.2~1.9 d,属于易降解性农药。田间最终残留试验结果显示,7 d后,乙基多杀菌素在杨梅果实中的残留量为0.073~0.353 mg/kg,在土壤中的残留量为低于定量限~0.094 mg/kg。综上所述,采用该方法能够实现杨梅和土壤中乙基多杀菌素的残留检测,简便、准确、灵敏度高;按照田间试验推荐的使用浓度和次数后,乙基多杀菌素的降解半衰期短,其最终残留量远低于国标规定的在杨梅中的最大临时限量标准(1 mg/kg),说明乙基多杀菌素在安全间隔期内用于杨梅树上害虫防治是安全的。 展开更多
关键词 乙基多杀菌素 超高效液相色谱-串联质谱法 杨梅果实 土壤 残留 消解动态
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庆元甜橘柚黄龙病菌的Real-time PCR检测与分析
10
作者 吴远海 王梦萍 +6 位作者 徐选美 姚月华 陈白 吴振伙 尹瑞安 吴利荣 鹿连明 《浙江农业科学》 2020年第2期290-291,295,共3页
为了解庆元县甜橘柚柑橘黄龙病的发生分布情况,为该病害的有效防控提供依据,通过Real-time PCR方法检测了庆元不同地区甜橘柚样品中黄龙病菌的存在情况。结果显示:在所检测的69个样品中,有13个样品表现为柑橘黄龙病阳性,阳性率达18.8%;... 为了解庆元县甜橘柚柑橘黄龙病的发生分布情况,为该病害的有效防控提供依据,通过Real-time PCR方法检测了庆元不同地区甜橘柚样品中黄龙病菌的存在情况。结果显示:在所检测的69个样品中,有13个样品表现为柑橘黄龙病阳性,阳性率达18.8%;其中松源街道和屏都街道样品的黄龙病菌检出率最高,可达33.3%。此检测结果表明,柑橘黄龙病已在庆元甜橘柚果园中普遍存在,应加强对该病害的防控。 展开更多
关键词 甜橘柚 黄龙病菌 REAL-TIME PCR检测
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