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鳕鱼皮胶原蛋白肽在Caco-2细胞单层模型中的吸收机制
被引量：
6
1
作者
陈锐
丁国芳
+6 位作者
杨最素
余方苗
黄芳芳
唐云平
张小军
陈思
梅光明
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2018年第19期154-161,共8页
目的:鳕鱼皮胶原蛋白肽(cod skin collagen peptide,CSCP)对肝损伤具有较好的保护作用,但其吸收机制尚不明确,本实验拟采用人结肠腺癌Caco-2细胞单层模型对CSCP在肠道中的吸收机制进行研究,为CSCP在动物肠道内的吸收机制提供依据。方法...
目的:鳕鱼皮胶原蛋白肽(cod skin collagen peptide,CSCP)对肝损伤具有较好的保护作用,但其吸收机制尚不明确,本实验拟采用人结肠腺癌Caco-2细胞单层模型对CSCP在肠道中的吸收机制进行研究,为CSCP在动物肠道内的吸收机制提供依据。方法:在进行转运实验前,先对CSCP在人工胃、肠液、不同pH值条件及在Caco-2细胞单层中的稳定性进行评价;采用CCK-8(cell counting kit-8)法确定CSCP在转运实验中的最高质量浓度,然后建立Caco-2细胞单层模型并测定跨膜电阻值和碱性磷酸酶活力以检验细胞单层的致密性、完整性和极化现象;考察转运时间、CSCP质量浓度、维拉帕米、MK-571、氧化苯砷和去氧胆酸钠对转运的影响,利用高效液相色谱法检测CSCP质量浓度并计算累积转运量和表观渗透系数。结果:在3h内,CSCP在人工胃、肠液及接近胃肠道pH值环境中基本保持稳定,转运过程中未见多肽发生水解。CSCP的转运具有时间和浓度依赖性,不受维拉帕米和氧化苯砷的影响,去氧胆酸钠和MK-571对CSCP的转运具有非常显著的促进作用(P<0.05)。结论:CSCP跨Caco-2细胞单层转运的机制为细胞旁路途径,其外排受到多药耐药蛋白的介导。
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关键词
鳕鱼皮
胶原蛋白肽
胃肠道稳定性
CACO-2细胞
转运机制
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职称材料
双齿围沙蚕抗凝血肽的制备及其抗血栓作用
被引量：
3
2
作者
郑媛媛
丁国芳
+4 位作者
杨最素
余方苗
贾盈露
吴宗泽
陈锐
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017年第23期171-177,共7页
目的:探讨双齿围沙蚕抗凝血肽(anticoagulant peptides from Perinereis aibuhitensis,PAAP)的制备及其抗血栓作用。方法:以抗凝活力为检测指标,筛选最佳酶对沙蚕进行酶解。酶解产物经超滤、阴离子交换层析、凝胶过滤层析和反相高效液...
目的:探讨双齿围沙蚕抗凝血肽(anticoagulant peptides from Perinereis aibuhitensis,PAAP)的制备及其抗血栓作用。方法:以抗凝活力为检测指标,筛选最佳酶对沙蚕进行酶解。酶解产物经超滤、阴离子交换层析、凝胶过滤层析和反相高效液相色谱法分离纯化,得到具有最强抗凝活力的沙蚕寡肽,将此肽命名为PAAP并测定其急性毒性作用。采用角叉菜胶所致的小鼠尾部血栓形成实验、三氯化铁所致的大鼠动脉血栓形成实验及二磷酸腺苷(adenonisine disphosphate,ADP)诱导的血小板聚集实验,研究PAAP的抗血栓作用。结果:选取碱性蛋白酶作为最佳酶对沙蚕进行酶解,经过分离纯化后得到一条氨基酸序列:脯氨酸-缬氨酸-谷氨酸-精氨酸-赖氨酸(Pro-Val-Glu-Arg-Lys)。经测定,该寡肽的体外抗凝活力可达(1 320.0±20.3)U/g。PAAP的最大耐受量为11.0 g/(kg·d)且未出现小鼠异常及死亡现象,体内实验表明PAAP对小鼠尾部血栓的形成、大鼠动脉血栓的形成及ADP诱导的血小板聚集均有明显抑制作用。结论:从双齿围沙蚕中提取出的抗凝肽PAAP具有抗血栓作用。
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关键词
双齿围沙蚕
抗凝血肽
碱性蛋白酶
分离纯化
抗血栓
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职称材料
题名
鳕鱼皮胶原蛋白肽在Caco-2细胞单层模型中的吸收机制
被引量：
6
1
作者
陈锐
丁国芳
杨最素
余方苗
黄芳芳
唐云平
张小军
陈思
梅光明
机构
浙江海洋大学食品与医药学院浙江省海洋生物医用制品重点工程技术研究中心
浙江省
海洋
水产
研究
所
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2018年第19期154-161,共8页
基金
国家自然科学基金面上项目(81773629)
国家级星火计划项目(2015GA700044)
+3 种基金
国家海洋局国家科技支撑计划项目(2015186)
浙江省科技厅重大专项(2013C03036)
浙江省自然科学基金一般项目(LS15H30001
LQ16H300001)
文摘
目的:鳕鱼皮胶原蛋白肽(cod skin collagen peptide,CSCP)对肝损伤具有较好的保护作用,但其吸收机制尚不明确,本实验拟采用人结肠腺癌Caco-2细胞单层模型对CSCP在肠道中的吸收机制进行研究,为CSCP在动物肠道内的吸收机制提供依据。方法:在进行转运实验前,先对CSCP在人工胃、肠液、不同pH值条件及在Caco-2细胞单层中的稳定性进行评价;采用CCK-8(cell counting kit-8)法确定CSCP在转运实验中的最高质量浓度,然后建立Caco-2细胞单层模型并测定跨膜电阻值和碱性磷酸酶活力以检验细胞单层的致密性、完整性和极化现象;考察转运时间、CSCP质量浓度、维拉帕米、MK-571、氧化苯砷和去氧胆酸钠对转运的影响,利用高效液相色谱法检测CSCP质量浓度并计算累积转运量和表观渗透系数。结果:在3h内,CSCP在人工胃、肠液及接近胃肠道pH值环境中基本保持稳定,转运过程中未见多肽发生水解。CSCP的转运具有时间和浓度依赖性,不受维拉帕米和氧化苯砷的影响,去氧胆酸钠和MK-571对CSCP的转运具有非常显著的促进作用(P<0.05)。结论:CSCP跨Caco-2细胞单层转运的机制为细胞旁路途径,其外排受到多药耐药蛋白的介导。
关键词
鳕鱼皮
胶原蛋白肽
胃肠道稳定性
CACO-2细胞
转运机制
Keywords
cod skin
collagen peptide
gastrointestinal tract stability
Caco-2 cell
transport mechanism
分类号
R151.3 [医药卫生—营养与食品卫生学]
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职称材料
题名
双齿围沙蚕抗凝血肽的制备及其抗血栓作用
被引量：
3
2
作者
郑媛媛
丁国芳
杨最素
余方苗
贾盈露
吴宗泽
陈锐
机构
浙江海洋大学食品与医药学院浙江省海洋生物医用制品重点工程技术研究中心
浙江省
海洋
水产
研究
所
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017年第23期171-177,共7页
基金
国家自然科学基金青年科学基金项目(81001393)
2015年度国家星火计划项目(2015GA700044)
+4 种基金
国家海洋局重大计划项目(2015862)
浙江省科技厅重大科技专项计划项目(2013C03036)
浙江省自然科学基金项目(LS15H30001)
浙江省自然科学基金青年资金项目(LQ16H300001)
舟山市公益类科技项目(2015C31012)
文摘
目的:探讨双齿围沙蚕抗凝血肽(anticoagulant peptides from Perinereis aibuhitensis,PAAP)的制备及其抗血栓作用。方法:以抗凝活力为检测指标,筛选最佳酶对沙蚕进行酶解。酶解产物经超滤、阴离子交换层析、凝胶过滤层析和反相高效液相色谱法分离纯化,得到具有最强抗凝活力的沙蚕寡肽,将此肽命名为PAAP并测定其急性毒性作用。采用角叉菜胶所致的小鼠尾部血栓形成实验、三氯化铁所致的大鼠动脉血栓形成实验及二磷酸腺苷(adenonisine disphosphate,ADP)诱导的血小板聚集实验,研究PAAP的抗血栓作用。结果:选取碱性蛋白酶作为最佳酶对沙蚕进行酶解,经过分离纯化后得到一条氨基酸序列:脯氨酸-缬氨酸-谷氨酸-精氨酸-赖氨酸(Pro-Val-Glu-Arg-Lys)。经测定,该寡肽的体外抗凝活力可达(1 320.0±20.3)U/g。PAAP的最大耐受量为11.0 g/(kg·d)且未出现小鼠异常及死亡现象,体内实验表明PAAP对小鼠尾部血栓的形成、大鼠动脉血栓的形成及ADP诱导的血小板聚集均有明显抑制作用。结论:从双齿围沙蚕中提取出的抗凝肽PAAP具有抗血栓作用。
关键词
双齿围沙蚕
抗凝血肽
碱性蛋白酶
分离纯化
抗血栓
Keywords
Perinereis aibuhitensis
anticoagulant peptides
alkaline protease
separation and purification
antithrombosis
分类号
R282.77 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鳕鱼皮胶原蛋白肽在Caco-2细胞单层模型中的吸收机制
陈锐
丁国芳
杨最素
余方苗
黄芳芳
唐云平
张小军
陈思
梅光明
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2018
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
双齿围沙蚕抗凝血肽的制备及其抗血栓作用
郑媛媛
丁国芳
杨最素
余方苗
贾盈露
吴宗泽
陈锐
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017
3
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