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农杆菌介导佛手遗传转化主要影响因素的研究
被引量：
15
1
作者
周春丽
郭卫东
+2 位作者
路梅
陈瑾
李玉萍
《热带亚热带植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期374-381,共8页
采用根癌农杆菌介导的佛手叶盘转化法,在建立转海藻糖合酶基因(TPS)佛手体系过程中,对影响农杆菌转化频率的各种因素进行了研究。结果表明,佛手叶盘需在黑暗条件下MT培养基上预培养2-3d,与农杆菌共培养3d较合适;农杆菌菌液浓度OD600约为...
采用根癌农杆菌介导的佛手叶盘转化法,在建立转海藻糖合酶基因(TPS)佛手体系过程中,对影响农杆菌转化频率的各种因素进行了研究。结果表明,佛手叶盘需在黑暗条件下MT培养基上预培养2-3d,与农杆菌共培养3d较合适;农杆菌菌液浓度OD600约为0.6-0.8,感染时间20min;抑制农杆菌生长的抗生素浓度以头孢霉素(Cef)250mgL-1和羧苄青霉素(Cb)250mgL-1且延迟筛选时间4d最好;共培养基中添加100μmol/L乙酰丁香酮(AS)和400mgL-1半胱氨酸(L-Cys)对佛手遗传转化有明显的促进作用。经GUS报告基因和PCR技术检测,初步证实TPS基因已整合到佛手基因组中,且GUS报告基因瞬时表达率为5.9%。
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关键词
佛手
农杆菌
遗传转化
海藻糖合酶基因(TPS)
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职称材料
题名
农杆菌介导佛手遗传转化主要影响因素的研究
被引量：
15
1
作者
周春丽
郭卫东
路梅
陈瑾
李玉萍
机构
江西科技
师范
学院
生命
科学院
浙江师范大学环境与生命科学院
出处
《热带亚热带植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期374-381,共8页
基金
浙江省科技计划项目(2003C32043)资助
文摘
采用根癌农杆菌介导的佛手叶盘转化法,在建立转海藻糖合酶基因(TPS)佛手体系过程中,对影响农杆菌转化频率的各种因素进行了研究。结果表明,佛手叶盘需在黑暗条件下MT培养基上预培养2-3d,与农杆菌共培养3d较合适;农杆菌菌液浓度OD600约为0.6-0.8,感染时间20min;抑制农杆菌生长的抗生素浓度以头孢霉素(Cef)250mgL-1和羧苄青霉素(Cb)250mgL-1且延迟筛选时间4d最好;共培养基中添加100μmol/L乙酰丁香酮(AS)和400mgL-1半胱氨酸(L-Cys)对佛手遗传转化有明显的促进作用。经GUS报告基因和PCR技术检测,初步证实TPS基因已整合到佛手基因组中,且GUS报告基因瞬时表达率为5.9%。
关键词
佛手
农杆菌
遗传转化
海藻糖合酶基因(TPS)
Keywords
Citrus medica L. var. sarcodactlis
Agrobacterium
Genetic
分类号
S666.9 [农业科学—果树学]
S567.19 [农业科学—中草药栽培]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
农杆菌介导佛手遗传转化主要影响因素的研究
周春丽
郭卫东
路梅
陈瑾
李玉萍
《热带亚热带植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
15
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