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基于鲁米诺增强发光体系的喹乙醇CLEIA技术研究
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作者 王士桢 杨加成 +3 位作者 董晓涵 倪云梅 黄雅丽 金仁耀 《核农学报》 北大核心 2025年第3期594-604,共11页
为建立高效的喹乙醇化学发光酶免疫检测方法(OLA-CLEIA),本研究以鲁米诺-HRP-H2O2增强体系为发光体系,探究OLA-CLEIA的最佳化学发光条件和免疫反应条件,并采用高效液相色谱法(HPLC)进行验证。结果表明,化学发光的最佳条件为鲁米诺浓度1.... 为建立高效的喹乙醇化学发光酶免疫检测方法(OLA-CLEIA),本研究以鲁米诺-HRP-H2O2增强体系为发光体系,探究OLA-CLEIA的最佳化学发光条件和免疫反应条件,并采用高效液相色谱法(HPLC)进行验证。结果表明,化学发光的最佳条件为鲁米诺浓度1.0 mmol·L^(-1),H_(2)O_(2)浓度2.0 mmol·L^(-1)、稀释比1500,4-溴苯酚浓度2.0 mmol·L^(-1),4%的二甲基亚砜(DMSO)助溶,三羟甲基氨基甲烷盐酸盐(Tris-HCl)缓冲液浓度0.02 mol·L^(-1)、pH值9.0;间接竞争免疫反应的最佳条件为包被抗原浓度0.94μg·mL^(-1),抗体稀释比1∶4800;根据抑制率与喹乙醇浓度得到的线性回归方程为y=17.305 lnx+3.6224,R^(2)=0.9971,检测限(IC_(10))和灵敏度(IC_(50))分别为1.45、14.60 ng·mL^(-1);对鱼饲料样品的加标回收率为91.0%~104.0%,批内、批间精密度变异系数均低于6.0%;通过HPLC测得OLA-CLEIA具有较高的准确性与稳定性。综上,本研究建立的OLA-CLEIA具有准确可靠、操作简便、特异性强等优点,可用于多种饲料中喹乙醇的残留检测分析。本研究可为其他小分子残留的CLEIA技术提供参考。 展开更多
关键词 鲁米诺 喹乙醇 残留检测 化学发光酶免疫分析
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基于Eu^3+标记的喹乙醇TRFIA研究
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作者 郭建军 桑丽雅 +3 位作者 王振国 陈笑笑 王伟萍 金仁耀 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1799-1807,共9页
为了评价Eu^(3+)免疫探讨标记喹乙醇克隆抗体的效果,以环化二乙烯三胺五醋酸酐(cy DTPA)为螯合剂,将Eu^(3+)偶联到喹乙醇单克隆抗体(OLA-m Ab)上,制备喹乙醇铕标抗体(Eu^(3+)-OLA-m Ab),并在此基础上进行TRFIA反应条件的优化。结果表明... 为了评价Eu^(3+)免疫探讨标记喹乙醇克隆抗体的效果,以环化二乙烯三胺五醋酸酐(cy DTPA)为螯合剂,将Eu^(3+)偶联到喹乙醇单克隆抗体(OLA-m Ab)上,制备喹乙醇铕标抗体(Eu^(3+)-OLA-m Ab),并在此基础上进行TRFIA反应条件的优化。结果表明,优化后的直接竞争时间分辨荧光免疫分析(TRFIR)反应条件为包被抗原(OLA-OVA)浓度1.2μg·m L-1、铕标抗体浓度2.0μg·m L-1、CBS浓度0.05 mol·L-1、PBS稀释液0.01 mol·L-1、p H值7.0,采用含5%甲醇的PBS配制喹乙醇标样。反应条件筛选优化后建立标准曲线,其IC50和IC10浓度分别为9.29、0.66 ng·m L-1。以饲料为样品进行添加回收率试验,其回收率处于84.80%~113.60%之间,变异系数小于14%。本研究建立的TRFIA方法具有灵敏度高、稳定性好等特点,为下一步研发喹乙醇TRFIA快速检测试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 喹乙醇 单克隆抗体 TRFIA 铕标记物
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不同养殖模式下加州鲈鱼肉质比较分析 被引量:22
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作者 周聃 崔雁娜 +4 位作者 周冬仁 盛鹏程 吴琦芳 戴志远 郝贵杰 《江苏农业科学》 北大核心 2021年第6期146-149,共4页
为分析循环水养殖和池塘养殖下加州鲈鱼肉质区别,探索循环水养殖模式优点。采集同龄段、同一饲料喂养的2种养殖模式下的加州鲈鱼,通过测定加州鲈鱼的基础营养成分、肉质相关指标和质构特性(TPA分析)来评价2种养殖模式下鲈鱼肉质,并采用... 为分析循环水养殖和池塘养殖下加州鲈鱼肉质区别,探索循环水养殖模式优点。采集同龄段、同一饲料喂养的2种养殖模式下的加州鲈鱼,通过测定加州鲈鱼的基础营养成分、肉质相关指标和质构特性(TPA分析)来评价2种养殖模式下鲈鱼肉质,并采用扫描电镜,对2种加州鲈鱼进行观察,分析其微观结构差异。结果显示,循环水养殖加州鲈鱼较池塘养殖比,其粗蛋白含量显著提高(P<0.05),粗脂肪含量显著降低(P<0.05);滴水损失率、冷冻渗出率和蒸煮损失率均高于池塘养殖组(P<0.05);循环水养殖组鲈鱼鱼肉硬度、胶着性和咀嚼性均高于池塘养殖组(P<0.05),肌纤维排布更加整齐致密。说明循环水养殖的加州鲈鱼的鱼肉营养和肉质均有一定程度的提升,适宜进一步推广和研究。 展开更多
关键词 循环水养殖 池塘养殖 加州鲈鱼 基础营养成分 质构特性 微观组织结构
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基于双功能螯合剂NOTA的重金属铜人工抗原的合成与鉴定 被引量:8
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作者 郭建军 桑丽雅 +2 位作者 王振国 陈笑笑 金仁耀 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期2012-2018,共7页
为研究杂环类双功能螯合剂在重金属铜人工抗原制备方面的效果,以2-S-(4-氨基苯)-1,4,7三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸(P-NH_2-Bn-NOTA,简写为NOTA)为双功能螯合剂,采用戊二醛法将重金属铜离子分别与载体蛋白BSA、OVA偶联制备免疫原和包被原... 为研究杂环类双功能螯合剂在重金属铜人工抗原制备方面的效果,以2-S-(4-氨基苯)-1,4,7三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸(P-NH_2-Bn-NOTA,简写为NOTA)为双功能螯合剂,采用戊二醛法将重金属铜离子分别与载体蛋白BSA、OVA偶联制备免疫原和包被原,并用合成的免疫原免疫制备免多克隆抗体,建立间接竞争ELISA(ic-ELISA)。结果表明,所建立的ic-ELISA线性回归方程为y=7.8632Ln(x)+9.6765(R2=0.9934),IC50和IC20值分别为168.70、3.72 ng·m L-1。交叉反应试验结果显示,除与锌交叉反应率达16%外,该抗体与其他重金属铁、铅和镉的交叉反应率均小于5.6%。本研究成功合成了重金属铜人工抗原并制备了兔多克隆抗体,为杂环类双功能螯合剂应用于重金属快速检测技术奠定了理论基础。 展开更多
关键词 双功能螯合剂 NOTA 重金属 人工抗原 抗体
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前置固相吸附材料对烟熏鲟鱼片的影响及工艺优化
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作者 李崇豪 张卓潍 +2 位作者 陈康 戴志远 沈清 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期375-383,共9页
为降低烟熏即食鱼片中的苯并芘(BaP)含量,同时保留其感官特征和风味品质,开发熏烟在线筛滤技术,优化烟熏即食鱼片的加工工艺。本试验通过比较不同固相吸附材料(棉花、硅胶、分子筛、活性氧化铝)对烟熏即食鱼片品质的影响,采用高效液相色... 为降低烟熏即食鱼片中的苯并芘(BaP)含量,同时保留其感官特征和风味品质,开发熏烟在线筛滤技术,优化烟熏即食鱼片的加工工艺。本试验通过比较不同固相吸附材料(棉花、硅胶、分子筛、活性氧化铝)对烟熏即食鱼片品质的影响,采用高效液相色谱(HPLC)和气相色谱/质谱联用(GC/MS)对熏鱼的BaP和风味物质进行检测。比较不同固相吸附材料发现,当吸附剂为硅胶时,BaP含量下降至4.88μg·kg^(-1),产品质地、色泽、熏香等感官评分较高,酚类等友好型挥发性物质得到保留。响应面优化后的烟熏鲟鱼片最佳工艺条件为硅胶25 g,烟熏时间30 min,烟熏温度85℃。本研究结果对健康烟熏食品的开发具有重要的参考意义。 展开更多
关键词 固相吸附材料 BAP 风味 烟熏 鲟鱼片
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