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实时定量PCR法快速检测水产品中的副溶血性弧菌
被引量：
8
1
作者
陈琳
周青青
+1 位作者
顾青
郦萍
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2019年第5期823-828,共6页
副溶血性弧菌是一种广泛存在于水产品中的食源性致病菌,可污染食物,引起严重的食物中毒。利用实时定量PCR方法建立一种快速检测水产品中副溶血性弧菌的方法,根据随机扩增多态性分析(RAPD)鉴定特异性片段,设计特异性引物。采用建立的实...
副溶血性弧菌是一种广泛存在于水产品中的食源性致病菌,可污染食物,引起严重的食物中毒。利用实时定量PCR方法建立一种快速检测水产品中副溶血性弧菌的方法,根据随机扩增多态性分析(RAPD)鉴定特异性片段,设计特异性引物。采用建立的实时定量PCR方法检测市售水产品20份,检出阳性食品6份,最小检测灵敏度为50 fg DNA,与传统微生物检测结果相比无显著差异。该检测方法特异性强,灵敏度高。
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关键词
副溶血性弧菌
随机扩增多态性分析
实时荧光定量PCR
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职称材料
乳酸菌细菌素plantaricin JK的异源表达、分离纯化及抗菌活性
被引量：
2
2
作者
蒋晗
刘娇
+1 位作者
郦萍
顾青
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2017年第2期332-337,共6页
为获得高产双肽细菌素plantaricin JK,通过PCR扩增获得pln J和pln K基因,构建表达载体p ET32a(+)-pln J-BL21(DE3)和p ET32a(+)-pln K-BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,利用镍亲和层析柱进行分离纯化,重组蛋白经肠激酶酶切纯化后,细菌素pln ...
为获得高产双肽细菌素plantaricin JK,通过PCR扩增获得pln J和pln K基因,构建表达载体p ET32a(+)-pln J-BL21(DE3)和p ET32a(+)-pln K-BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,利用镍亲和层析柱进行分离纯化,重组蛋白经肠激酶酶切纯化后,细菌素pln J和pln K的产量分别为2~3、5~8 mg·L-1。利用牛津杯平板抑菌法研究抗菌活性,结果显示细菌素pln J和pln K对柠檬色葡萄球菌(Staphylococcus citreus)、大肠埃希菌(Escherichia coli)、藤黄微球菌(Micrococcus luteus)和单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)都有明显抑制作用,且双肽细菌素plantaricin JK的抑菌圈直径大于单独的细菌素pln J或pln K。
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关键词
plantaricin
JK
异源表达
分离纯化
抗菌活性
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职称材料
题名
实时定量PCR法快速检测水产品中的副溶血性弧菌
被引量：
8
1
作者
陈琳
周青青
顾青
郦萍
机构
浙江工商大学浙江省食品微生物技术研究重点实验室
杭州娃哈哈集团有限公司
出处
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2019年第5期823-828,共6页
基金
浙江省重大专项(2015C02039
2015C02022)
+3 种基金
国家自然科学基金(31606449
31871775)
浙江省自然科学基金(LY16C200002
LQ18C200004)
文摘
副溶血性弧菌是一种广泛存在于水产品中的食源性致病菌,可污染食物,引起严重的食物中毒。利用实时定量PCR方法建立一种快速检测水产品中副溶血性弧菌的方法,根据随机扩增多态性分析(RAPD)鉴定特异性片段,设计特异性引物。采用建立的实时定量PCR方法检测市售水产品20份,检出阳性食品6份,最小检测灵敏度为50 fg DNA,与传统微生物检测结果相比无显著差异。该检测方法特异性强,灵敏度高。
关键词
副溶血性弧菌
随机扩增多态性分析
实时荧光定量PCR
Keywords
Vibrio parahaemolyticus
randomly amplified polymorphic DNA
real-time polymerase chain reaction
分类号
S917.1 [农业科学—水产科学]
TS254.7 [轻工技术与工程—水产品加工及贮藏工程]
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职称材料
题名
乳酸菌细菌素plantaricin JK的异源表达、分离纯化及抗菌活性
被引量：
2
2
作者
蒋晗
刘娇
郦萍
顾青
机构
浙江工商大学浙江省食品微生物技术研究重点实验室
中国计量
大学
浙江省
海洋
食品
品质及危害物控制
技术
重点
实验室
出处
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2017年第2期332-337,共6页
基金
国家国际科技合作专项(2013DFA32330)
国家自然科学基金项目(31540044
+1 种基金
31271821)
国家高技术研究发展计划(863计划)(2014AA022210-08)
文摘
为获得高产双肽细菌素plantaricin JK,通过PCR扩增获得pln J和pln K基因,构建表达载体p ET32a(+)-pln J-BL21(DE3)和p ET32a(+)-pln K-BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,利用镍亲和层析柱进行分离纯化,重组蛋白经肠激酶酶切纯化后,细菌素pln J和pln K的产量分别为2~3、5~8 mg·L-1。利用牛津杯平板抑菌法研究抗菌活性,结果显示细菌素pln J和pln K对柠檬色葡萄球菌(Staphylococcus citreus)、大肠埃希菌(Escherichia coli)、藤黄微球菌(Micrococcus luteus)和单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)都有明显抑制作用,且双肽细菌素plantaricin JK的抑菌圈直径大于单独的细菌素pln J或pln K。
关键词
plantaricin
JK
异源表达
分离纯化
抗菌活性
Keywords
plantaricin JK
heterologous expression
expression and purification
antibacterial activity
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
实时定量PCR法快速检测水产品中的副溶血性弧菌
陈琳
周青青
顾青
郦萍
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2019
8
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
乳酸菌细菌素plantaricin JK的异源表达、分离纯化及抗菌活性
蒋晗
刘娇
郦萍
顾青
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2017
2
在线阅读
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职称材料
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参考文献
引证文献
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