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非洲猪瘟病毒基因Ⅰ型和Ⅱ型PCR-RFLP鉴别方法的建立
1
作者
孙仁杰
徐慧玲
+6 位作者
孙思琪
柴娟
虞一聪
谢荣辉
李肖梁
赵灵燕
张传亮
《浙江农业学报》
北大核心
2025年第5期1017-1028,共12页
本研究旨在建立一种非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)基因Ⅰ型和Ⅱ型的PCR-RFLP鉴别方法。通过对ASFV基因Ⅰ型与基因Ⅱ型基因组序列的比对分析,针对B385R基因和B125R基因保守区设计1对特异性PCR-RFLP引物,与其他临床上常...
本研究旨在建立一种非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)基因Ⅰ型和Ⅱ型的PCR-RFLP鉴别方法。通过对ASFV基因Ⅰ型与基因Ⅱ型基因组序列的比对分析,针对B385R基因和B125R基因保守区设计1对特异性PCR-RFLP引物,与其他临床上常见的9种猪病病毒均无交叉反应。通过该引物扩增获得覆盖B646L基因全长的DNA片段作为检测靶标,结合BmgBⅠ酶切进行RFLP图谱分析,即可实现对B646L基因全序列的快速检测,有效区分ASFV基因Ⅰ型和Ⅱ型,最低检测DNA质量浓度可达到5 pg·mL^(-1)。模拟临床样本的研究结果表明,本方法还能够有效应对实际检测中基因Ⅰ型和Ⅱ型的混合感染。综上,本方法操作简便、准确性高、特异性强、灵敏度高、成本较低,具有良好的应用前景,为基层兽医技术人员开展非洲猪瘟疫情的监测和流行病学研究提供了一种新方法。
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关键词
非洲猪瘟病毒
聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性
基因Ⅰ型
基因Ⅱ型
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职称材料
题名
非洲猪瘟病毒基因Ⅰ型和Ⅱ型PCR-RFLP鉴别方法的建立
1
作者
孙仁杰
徐慧玲
孙思琪
柴娟
虞一聪
谢荣辉
李肖梁
赵灵燕
张传亮
机构
浙江
省动物疫病预防控制
中心
浙江大学
-
新昌
联合
创新
中心
(
天
姥
实验室
)
浙江大学
动物科学学院
出处
《浙江农业学报》
北大核心
2025年第5期1017-1028,共12页
基金
浙江省自然科学基金(LQ23C180001)
浙江省万人计划(2021R52041)
+1 种基金
浙江省“三农九方”科技协作项目(2023SNJF059)
浙江省农业重大技术协同推广计划项目(2023ZDXT14-5)。
文摘
本研究旨在建立一种非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)基因Ⅰ型和Ⅱ型的PCR-RFLP鉴别方法。通过对ASFV基因Ⅰ型与基因Ⅱ型基因组序列的比对分析,针对B385R基因和B125R基因保守区设计1对特异性PCR-RFLP引物,与其他临床上常见的9种猪病病毒均无交叉反应。通过该引物扩增获得覆盖B646L基因全长的DNA片段作为检测靶标,结合BmgBⅠ酶切进行RFLP图谱分析,即可实现对B646L基因全序列的快速检测,有效区分ASFV基因Ⅰ型和Ⅱ型,最低检测DNA质量浓度可达到5 pg·mL^(-1)。模拟临床样本的研究结果表明,本方法还能够有效应对实际检测中基因Ⅰ型和Ⅱ型的混合感染。综上,本方法操作简便、准确性高、特异性强、灵敏度高、成本较低,具有良好的应用前景,为基层兽医技术人员开展非洲猪瘟疫情的监测和流行病学研究提供了一种新方法。
关键词
非洲猪瘟病毒
聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性
基因Ⅰ型
基因Ⅱ型
Keywords
African swine fever virus
PCR-RFLP
genotypeⅠ
genotypeⅡ
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
非洲猪瘟病毒基因Ⅰ型和Ⅱ型PCR-RFLP鉴别方法的建立
孙仁杰
徐慧玲
孙思琪
柴娟
虞一聪
谢荣辉
李肖梁
赵灵燕
张传亮
《浙江农业学报》
北大核心
2025
0
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