依普黄酮体外代谢性药物相互作用研究 被引量：2

1

作者 胡晓渝 姚彤炜 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2004年第1期21-23,共3页

目的 :研究依普黄酮与常用心血管类药物、激素类药物等在细胞色素 P4 5 0酶介导的代谢过程中的相互作用。方法 :以 β-萘黄酮诱导的大鼠肝微粒体为酶源 ,将依普黄酮与普罗帕酮或雌二醇等共孵育 ,用 HPLC法测定孵育液中剩余底物浓度 ,观... 目的 :研究依普黄酮与常用心血管类药物、激素类药物等在细胞色素 P4 5 0酶介导的代谢过程中的相互作用。方法 :以 β-萘黄酮诱导的大鼠肝微粒体为酶源 ,将依普黄酮与普罗帕酮或雌二醇等共孵育 ,用 HPLC法测定孵育液中剩余底物浓度 ,观察依普黄酮与这些药物在体外代谢中的相互影响。结果 :1与未加入依普黄酮相比较 ,10 μg/ml普罗帕酮与 5 0 μg/ml依普黄酮共孵育后 ,普罗帕酮的代谢受到抑制 ,差异均有显著性 (P<0 .0 1) ,而 10μg/ml雌二醇与 10 μg/ml或 10 0 μg/ml依普黄酮共孵育后 ,雌二醇的代谢几无影响 (P>0 .0 5 )。2与未加入其它药物相比较 ,2 0 μg/ml的依普黄酮分别与 0 .5 μg/ml的普奈洛尔或 0 .5 μg/ml的普罗帕酮或 5 .0 μg/ml的雌二醇共孵育后 ,依普黄酮的代谢受到不同程度的抑制 ,差异均有显著性 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 5 ,P<0 .0 2 )。结论 :依普黄酮与普罗帕酮之间代谢互受影响 ,而与雌二醇之间的相互作用程度较低。 展开更多

关键词 依普黄酮 代谢 普罗帕酮 雌二醇 普奈洛尔 药物相互作用

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银杏黄酮的体外葡醛酸反应及其药物相互作用 被引量：10

2

作者 诸敏 姚彤炜 曾苏 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2004年第1期15-20,共6页

目的 :获得银杏黄酮体外代谢情况 ,预测银杏叶制剂与常用心血管类药物之间的代谢性相互作用的可能性。方法 :银杏黄酮与普罗帕酮、硝苯地平、地非三唑和依普黄酮在经 β-萘黄酮诱导的鼠肝微粒体中共孵育 ,以HPLC法测定孵育液中剩余银杏... 目的 :获得银杏黄酮体外代谢情况 ,预测银杏叶制剂与常用心血管类药物之间的代谢性相互作用的可能性。方法 :银杏黄酮与普罗帕酮、硝苯地平、地非三唑和依普黄酮在经 β-萘黄酮诱导的鼠肝微粒体中共孵育 ,以HPLC法测定孵育液中剩余银杏黄酮的浓度 ,观察共孵育药物对银杏黄酮葡醛酸结合反应的影响 ,并计算银杏黄酮 3个苷元的酶动力学参数。结果 :测得银杏黄酮槲皮素、异鼠李素和山奈酚的 Vmax值分别为 (6 0± 0 .2 1)、(48±0 .0 2 )、(34± 0 .0 2 )μmol· g-1· min-1,Km 值分别为 (2 4± 0 .0 5 )、(14 8± 0 .0 9)、(110± 0 .0 3)μmol/ L ;当银杏黄酮浓度一定时 ,共孵育药物硝苯地平、普罗帕酮、依普黄酮和地非三唑对银杏黄酮的 IC50 分别为 5 4～ 70、6 9～ 12 2、85～98和 2 10～ 36 2 μmol。测得地非三唑对银杏黄酮 3种苷元的抑制常数 Ki值分别为 5 7.6、5 0 .5和 33.1mg/ L;普罗帕酮的 Ki值分别为 33.6、5 9.5和 4 5 .2 mg/ L;依普黄酮的 Ki值分别为 13.7、2 4 .0和 15 .7mg/ L。普罗帕酮的 [I]/[Ki]比值为 0 .0 0 2～ 0 .0 0 3。结论 :在银杏黄酮的 3种苷元中槲皮素的代谢能力最强 ;硝苯地平、依普黄酮和普罗帕酮等对槲皮素、异鼠李素和山奈酚的葡醛酸反应均有不同程度的抑制作用 ; 展开更多

关键词 黄酮类 药代动力学 黄酮类 代谢 普罗帕酮 硝苯地平 地非三唑 药物相互作用

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人葡糖醛酸基转移酶介导的黄酮Ⅱ相代谢研究进展 被引量：3

3

作者 谢升谷 尤琳雅 曾苏 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期438-443,共6页

人葡糖醛酸基转移酶(UGT)同工酶在黄酮类化合物Ⅱ相代谢反应中呈重要的作用。本综述总结了近年来国内外学者对黄酮类化合物Ⅱ相代谢中UGT的研究情况,包括各同工酶间的底物差异,结构-代谢活性关系,基因多态性的影响以及黄酮对UGT调控的... 人葡糖醛酸基转移酶(UGT)同工酶在黄酮类化合物Ⅱ相代谢反应中呈重要的作用。本综述总结了近年来国内外学者对黄酮类化合物Ⅱ相代谢中UGT的研究情况,包括各同工酶间的底物差异,结构-代谢活性关系,基因多态性的影响以及黄酮对UGT调控的研究。结果表明,人UGT1A1,1A3,1A8,1A9,1A10和2B15主要参与了广泛黄酮类化合物的葡醛酸结合反应,而UGT1A5,1A7和2B7对黄酮代谢的作用有待于进一步研究证明,UGT的基因多态性、结构-代谢关系、调控机制为生物黄酮的合理利用以及此类化合物的合理药物设计提供了重要的参考依据。 展开更多

关键词 人葡糖醛酸基转移酶 黄酮 葡醛酸结合反应

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银杏叶片剂指纹图谱分析方法的建立 被引量：6

4

作者 徐亚萍 姚彤炜 江君微 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2004年第1期24-28,36,共6页

目的 :建立银杏叶片剂的指纹图谱测定方法。方法 :应用高效液相二极管阵列法 (HPL C- DAD)检测银杏叶片剂中主要化学成分 ,以 Diamonsil TM (钻石 ) C18(2 0 0 mm× 4 .6 mm,5 μm)柱为分析柱、CH3 CN和 0 .0 1mol/ LKH2 PO4缓冲液 ... 目的 :建立银杏叶片剂的指纹图谱测定方法。方法 :应用高效液相二极管阵列法 (HPL C- DAD)检测银杏叶片剂中主要化学成分 ,以 Diamonsil TM (钻石 ) C18(2 0 0 mm× 4 .6 mm,5 μm)柱为分析柱、CH3 CN和 0 .0 1mol/ LKH2 PO4缓冲液 (p H2 )为流动相、梯度洗脱、二极管阵列检测器检测 ,测定 3批银杏叶片剂和银杏叶对照提取物的指纹图谱 ;应用相似度计算软件 ,将对照提取物和片剂的整体化学成分信息进行分析。结果 :银杏叶对照提取物中各个成分的相对峰高与不同浓度呈现良好的线性 (r>0 .999) ,3批片剂 (生产日期跨度 1年 )之间整体化学成分无明显差异 ,片剂与对照提取物有较好的相似度 (>0 .96 5 )。结论 :该方法精确、简便 ,可用于各种银杏制剂的质量控制。 展开更多

关键词 银杏叶 黄酮类 色谱法 高效液相 指纹图谱

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佐米曲普坦的含量测定与有关物质检查的方法学研究 被引量：4

5

作者 胡云珍 姚彤炜 王向军 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2004年第1期37-40,共4页

目的 :建立佐米曲普坦的质量控制方法。方法 :采用反相高效液相色谱法 ,以 Shimadzu CLC- C8为分析柱 ,乙腈 - 10 mmol/ L KH2 PO4(2 5∶ 75 ,p H7.5 )溶液为流动相 ,检测波长 2 2 9nm测定佐米曲普坦的含量 ,并对其纯度进行考察。结果 ... 目的 :建立佐米曲普坦的质量控制方法。方法 :采用反相高效液相色谱法 ,以 Shimadzu CLC- C8为分析柱 ,乙腈 - 10 mmol/ L KH2 PO4(2 5∶ 75 ,p H7.5 )溶液为流动相 ,检测波长 2 2 9nm测定佐米曲普坦的含量 ,并对其纯度进行考察。结果 :建立的方法能够有效地分离合成原料、中间体、降解产物和其它有关杂质 ,含量测定结果与非水电位滴定法结果一致 (P>0 .0 5 )。结论 :高效液相色谱法可以有效地控制佐米曲普坦中微量有关杂质 ,非水滴定法和高效液相法均可有效地控制本品的含量。 展开更多

关键词 佐米曲普坦 分析 色谱法 高效液相

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鸡肝散药效成分木犀草素在大鼠体内的排泄研究

6

作者 应景艳 李翔 +1 位作者 王锦磊 姚彤炜 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2008年第2期139-145,共7页

目的：建立RP—HPLC法测定大鼠尿、粪便、胆汁中鸡肝散药效成分——木犀草素的含量，研究木犀草素在SD大鼠中的排泄情况。方法：给SD大鼠灌胃鸡肝散提取物后，于不同时间段采集尿样、粪便、胆汁，经处理后，以苷元木犀草素为目标物，分... 目的：建立RP—HPLC法测定大鼠尿、粪便、胆汁中鸡肝散药效成分——木犀草素的含量，研究木犀草素在SD大鼠中的排泄情况。方法：给SD大鼠灌胃鸡肝散提取物后，于不同时间段采集尿样、粪便、胆汁，经处理后，以苷元木犀草素为目标物，分别测定其在不同时间段尿样、粪便、胆汁中的浓度。结果：尿样、粪便、胆汁中木犀草素的方法回收率为98．00％～106．00％，提取回收率为85．00％～108．00％，日内及日间精密度均小于10．00％。木犀草素的总累积排泄率约为37％（测得尿中约11％；粪便和胆汁中各约26％）。结论：建立的大鼠尿、粪便、胆汁中木犀草素的含量测定方法具有灵敏、准确，专属性强等特点。 展开更多

关键词 木犀草素/分析 胆汁 尿 粪便 色谱法 高压液相 反相高效液相色谱 鸡肝散提取物 排泄

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去铁酮与人有机阳离子转运体及有机阴离子转运体1体外相互作用研究 被引量：1

7

作者 孔思思 涂美娟 +4 位作者 杨希 赵垒 周慧 曾苏 蒋惠娣 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期129-134,共6页

目的：建立细胞裂解液中去铁酮测定的液相色谱-串联质谱（ LC-MS/MS）方法，体外考察去铁酮与人有机阳离子转运体（ hOCTs）及有机阴离子转运体1（hOAT1）的相互作用。方法：以Agilent Eclipse Plus C18柱（2．1 mm ×50 mm，3．5μ... 目的：建立细胞裂解液中去铁酮测定的液相色谱-串联质谱（ LC-MS/MS）方法，体外考察去铁酮与人有机阳离子转运体（ hOCTs）及有机阴离子转运体1（hOAT1）的相互作用。方法：以Agilent Eclipse Plus C18柱（2．1 mm ×50 mm，3．5μm）为分析柱；0．1％甲酸-水（ v/v）和0．1％甲酸-乙腈（ v/v）为流动相，梯度洗脱；应用电喷雾离子源（ ESI源）、多反应监测（ MRM）模式进行检测；应用稳定表达hOCTs及hOAT1的细胞模型（ MDCK-hOCTs和MDCK-hOAT1）考察去铁酮对经典底物在细胞内积聚的影响；比较去铁酮在转空载体的mock细胞及MDCK-hOCTs中积聚的差异，以及经典抑制剂对其积聚的影响。结果：去铁酮在5～300 nmol/L的浓度范围内线性关系良好；准确度大于94％，日内相对标准偏差小于2％。300μmol/L去铁酮使hOCTs经典底物MPP＋在MDCK-hOCTs的积聚降低至阴性对照的70．4％～87．1％；去铁酮在MDCK-hOCTs细胞和mock细胞中的积聚无明显差别，且经典抑制剂对去铁酮的积聚无明显抑制作用；100μmol/L去铁酮对hOAT1经典底物6-CF在MDCK-hOAT1细胞中的积聚无显著影响。结论：本实验建立的方法适用于细胞裂解液中去铁酮的定量分析；去铁酮对hOCT1和hOCT3有一定的抑制作用，对hOCT2和hOAT1则无明显抑制作用；hOCTs在去铁酮跨膜转运中不起主导作用。 展开更多

关键词 酮类 铁螯合剂 质谱分析法 色谱法 液相 有机阳离子转运子 有机阴离子转运子1

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非索非那定对映体柱前手性衍生化反相高效液相色谱分析方法的建立 被引量：1

8

作者 姚青青 屈伯宣 +1 位作者 周权 曾苏 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期155-159,共5页

目的：建立适用于体外细胞模型的OATP1 B1手性底物非索非那定柱前手性衍生化分析方法，为测定细胞中非索非那定对映体提供分析手段。方法：选择R-（＋）-苯乙基异氰酸酯作为手性衍生化试剂，与非索非那定生成氨基甲酸酯衍生物，应用液... 目的：建立适用于体外细胞模型的OATP1 B1手性底物非索非那定柱前手性衍生化分析方法，为测定细胞中非索非那定对映体提供分析手段。方法：选择R-（＋）-苯乙基异氰酸酯作为手性衍生化试剂，与非索非那定生成氨基甲酸酯衍生物，应用液相色谱-串联质谱法确定对映体衍生物色谱峰，通过反相高效液相色谱法实现对映体的分离分析。结果：在建立的手性分离条件下，成功实现非索非那定对映体分离分析，非索非那定两个对映体衍生物在25～100 ng/ml浓度范围内线性关系良好（R2＝0．9992，0．9989），日内、日间精密度均小于10％。结论：本实验建立的非索非那定对映体柱前手性衍生化反相高效液相色谱分析方法灵敏、准确，可用于体外细胞模型中盐酸非索非那定立体选择性分析。 展开更多

关键词 特非那定 化学 异氰酸盐类 立体异构现象 色谱法 高压液相 方法 指示剂和试剂

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体外细胞模型中氟伐他汀对映体的手性分离和含量测定方法学研究

9

作者 屈伯宣 田野 +3 位作者 余露山 蒋惠娣 周权 曾苏 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期12-16,共5页

目的:建立手性固定相(CSP)正相高效液相色谱法分离细胞裂解液中氟伐他汀对映体的分析方法。方法:采用直链淀粉-三[3,5-二甲基氨基甲酸酯]衍生物(Chiralpak AD)手性色谱柱(4.6 mm×250 mm),流动相:正己烷-无水乙醇-三氟乙酸(90∶10∶... 目的:建立手性固定相(CSP)正相高效液相色谱法分离细胞裂解液中氟伐他汀对映体的分析方法。方法:采用直链淀粉-三[3,5-二甲基氨基甲酸酯]衍生物(Chiralpak AD)手性色谱柱(4.6 mm×250 mm),流动相:正己烷-无水乙醇-三氟乙酸(90∶10∶0.1),流速0.5 ml/min,检测波长:239 nm。结果:在建立的手性分离方法下,氟伐他汀消旋体在20μmol/L^300μmol/L浓度范围内线性关系良好,两个对映异构体的相关系数r2分别为0.9993、0.9997,方法回收率为(99.4±0.8)%,日内、日间精密度(RSD)均小于10%。结论:建立的正相手性固定相高效液相色谱法分离和测定细胞裂解液中氟伐他汀对映体的方法准确、可靠,可用于体外细胞模型中氟伐他汀的立体选择性研究。 展开更多

关键词 氟伐他汀/分离和提纯 色谱法 高压液相/方法 立体异构现象

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HPLC法测定不同采收期杭白菊中木犀草素及其苷的含量 被引量：39

10

作者 胡碧波 蒋惠娣 +1 位作者 杨俊 曾苏 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2004年第1期29-32,共4页

目的 :测定杭白菊中木犀草素和木犀草素 - 7- β- D-葡萄糖苷的含量 ,考察它们在采摘期内的含量变化。方法 :反相高效液相色谱法测定 2 0 0 1、2 0 0 2年度不同采摘期杭白菊中两者的含量。结果 :杭白菊中木犀草素含量大大低于木犀草素 -... 目的 :测定杭白菊中木犀草素和木犀草素 - 7- β- D-葡萄糖苷的含量 ,考察它们在采摘期内的含量变化。方法 :反相高效液相色谱法测定 2 0 0 1、2 0 0 2年度不同采摘期杭白菊中两者的含量。结果 :杭白菊中木犀草素含量大大低于木犀草素 - 7- β- D-葡萄糖苷含量 ;木犀草素含量在采摘期中无显著变化 ,而木犀草素 - 7- β- D-葡萄糖苷含量在采摘初期变化不明显 ,而在采摘后期则呈下降趋势。结论 :杭白菊中木犀草素 - 7- β- D-葡萄糖苷含量更能反映杭白菊品质。 展开更多

关键词 杭白菊 分析 黄酮类 色谱法 高效液相

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顶空毛细管气相法测定三七提取物中有机溶剂残留量 被引量：7

11

作者 王翰华 倪珍珍 姚彤炜 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2007年第6期598-603,共6页

目的：建立三七提取物中7种有机溶剂残留量的测定方法。方法：采用顶空毛细管气相色谱法，以标准溶液加入法测定三七提取物中有机溶剂残留量。结杲：在考察的浓度范围内7种有机溶剂呈现良好的线性关系（乙醇r=0．9994、正己烷r=0．9982... 目的：建立三七提取物中7种有机溶剂残留量的测定方法。方法：采用顶空毛细管气相色谱法，以标准溶液加入法测定三七提取物中有机溶剂残留量。结杲：在考察的浓度范围内7种有机溶剂呈现良好的线性关系（乙醇r=0．9994、正己烷r=0．9982、苯r=0．9999、甲苯r=0．9991、二甲苯r=0．9994、苯乙烯r=0．9997、二乙烯苯r=0．9932），回收率81．74%～111．2%，理论板数均大于15000，相邻峰的分离度均大于2，日内、日间精密度RSD均小于10％。结论：该方法简单、准确、灵敏度高、重现性好，排除了基质的干扰，适用于三七提取物中有机溶剂残留量的测定。 展开更多

关键词 色谱法 气相 药物残留物 三七提取物 顶空进样法 毛细管气相色谱法 标准溶液加入法 有机溶剂残留量

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顶空气相色谱法测定盐酸格拉司琼中硫酸二甲酯残留量 被引量：19

12

作者 邓桂凤 姚彤炜 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2008年第2期156-158,共3页

目的:建立盐酸格拉司琼中硫酸二甲酯残留量的测定法。方法:采用顶空气相色谱法,载气为氮气,FID检测器,色谱柱为Angilent INNOWAX毛细管柱,柱温50℃,单点对照法检测盐酸格拉司琼中硫酸二甲酯的含量。结果:盐酸格拉斯琼中硫酸二甲酯未检... 目的:建立盐酸格拉司琼中硫酸二甲酯残留量的测定法。方法:采用顶空气相色谱法,载气为氮气,FID检测器,色谱柱为Angilent INNOWAX毛细管柱,柱温50℃,单点对照法检测盐酸格拉司琼中硫酸二甲酯的含量。结果:盐酸格拉斯琼中硫酸二甲酯未检出。且在同一色谱条件下,硫酸二甲酯的保留时间与可能存在的其它残留溶剂乙醇、乙酸乙酯、异丙醇、二氯甲烷和氯仿等的保留时间不同,方法的专属性良好;测得硫酸二甲酯的检出限为0.0016%。结论:建立的方法能有效控制盐酸格拉司琼中硫酸二甲酯的残留量。 展开更多

关键词 格兰塞隆/分析 色谱法 气相 药物残留物/分析 盐酸格拉司琼 有机溶剂残留量 硫酸二甲酯

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银杏黄酮山奈酚的体外葡醛酸结合反应 被引量：5

13

作者 顾少君 姚彤炜 胡静 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期451-456,共6页

目的　旨在了解银杏黄酮山奈酚代谢的有关酶系及酶动力学参数。方法　采用苯巴比妥 (PB)、地塞米松 (DEX)、β 萘黄酮 (BNF)和地非三唑 (DIPH)诱导SD大鼠 ,与未诱导大鼠分别作为体外代谢的 5种不同酶源。取山奈酚和鼠肝微粒体 2 5℃下... 目的　旨在了解银杏黄酮山奈酚代谢的有关酶系及酶动力学参数。方法　采用苯巴比妥 (PB)、地塞米松 (DEX)、β 萘黄酮 (BNF)和地非三唑 (DIPH)诱导SD大鼠 ,与未诱导大鼠分别作为体外代谢的 5种不同酶源。取山奈酚和鼠肝微粒体 2 5℃下共孵育 ,HPLC法测定孵育液中剩余底物浓度。比较不同诱导剂处理的鼠肝微粒体对山奈酚代谢的催化活性 ,以未作任何处理的鼠肝微粒体为空白对照。结果　山奈酚在BNF和DIPH诱导的鼠肝微粒体中有较强的代谢作用 ,而在PB ,DEX诱导的鼠肝微粒体和空白组微粒体中的代谢较弱。在 0 .2g·L- 1的微粒体蛋白质浓度的孵育液中 ,山奈酚 (40mg·L- 1)经4 5min孵育后 ,分别有 6 2 .9% (DIPH ) ,4 0 .1%(BNF) ,2 1.1% (PB) ,2 3.7% (DEX)和 18.0 % (空白组 )的量被代谢。测得山奈酚在空白对照组、BNF和DIPH诱导的微粒体中的Km 值分别为 (1.85±1.0 5 ) ,(9.4 1± 2 .4 5 )和 (72 .4± 3.0 8) μmol·L- 1;Vmax值分别为 (2 .4 5± 0 .6 3) ,(7.5 5± 1.4 0 )和 (2 5 .2±1.0 8) μmol·g- 1·min- 1。结论　山奈酚在各种微粒体中被广泛代谢 ;BNF和DIPH葡醛酸转移酶的强诱导剂可使山奈酚Ⅱ相葡萄糖醛酸苷结合反应增强。 展开更多

关键词 山奈酚 葡萄糖醛酸苷结合 微粒体 药物代谢 色谱法 高效液相

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高效液相色谱法测定人肝细胞色素P4503A4转基因细胞中氨氯地平 被引量：3

14

作者 吴永江 潘云雪 曾苏 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2003年第6期510-513,共4页

目的 :研究氨氯地平经人肝细胞色素 P4 5 0 3A4 (CYP3A4 )的代谢 ,建立反相高效液相色谱的测定人肝转基因细胞 CYP3A4酶 S9孵育液中氨氯地平浓度的方法。方法 :与人肝转基因细胞提取的 S9上清液孵育之后的样品 ,用 3倍量的甲醇沉淀后离... 目的 :研究氨氯地平经人肝细胞色素 P4 5 0 3A4 (CYP3A4 )的代谢 ,建立反相高效液相色谱的测定人肝转基因细胞 CYP3A4酶 S9孵育液中氨氯地平浓度的方法。方法 :与人肝转基因细胞提取的 S9上清液孵育之后的样品 ,用 3倍量的甲醇沉淀后离心 ,取上清液用 0 .4 5μm微孔滤膜滤过后进样。采用 Hypersil C18柱 ,以乙腈 -磷酸盐缓冲液 (4 5∶ 5 5 ,v/ v,p H4 .5 )为流动相 ,普萘洛尔为内标 ,在 2 5 0 nm波长处测定。结果 :氨氯地平浓度在 0 .2～ 30 .0μg/ ml范围内线性关系良好 ,r=0 .9993,方法平均回收率为 (98.2± 2 .4 ) % (n=5 ) ,日内和日间相对标准偏差(RSD)均小于 10 % ,检测限为 2 0 ng/ ml,定量限为 0 .2 μg/ ml(回收率为 10 4 .0 % ,RSD为 11.4 % ,n=5 )。结论 :建立的反相高效液相色谱方法简便、准确 ,可用于研究氨氯地平在人肝 CYP3A4转基因细胞中的代谢。 展开更多

关键词 氨氯地平 反相高效液相色谱 细胞色素-P450 转基因细胞 孵育

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RP-HPLC法测定眼房水中三种不同剂型匹罗卡品含量 被引量：1

15

作者 王向军 陈滨 +2 位作者 姚彤炜 张惠成 曾苏 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2004年第1期33-36,共4页

目的 :建立反相高效液相色谱法 (RP- HPLC)测定眼房水中匹罗卡品含量的方法。方法 :RP- HPLC法采用 ODS- C18柱 ,流动相 :0 .5 %三乙胺的 KH2 PO4(10 mmol/ L)缓冲液 (p H 2 .5 ) -乙腈 (98/ 2 ,v/ v) ,流速 :1.0 ml/ min,检测波长 :2 1... 目的 :建立反相高效液相色谱法 (RP- HPLC)测定眼房水中匹罗卡品含量的方法。方法 :RP- HPLC法采用 ODS- C18柱 ,流动相 :0 .5 %三乙胺的 KH2 PO4(10 mmol/ L)缓冲液 (p H 2 .5 ) -乙腈 (98/ 2 ,v/ v) ,流速 :1.0 ml/ min,检测波长 :2 15 nm。 90只兔均分为 3组 ,分别于每只兔眼滴入不同剂型滴眼剂 5 0μl,分别测定给药后 5、10、30、4 0、6 0、90、12 0、180、2 4 0及 36 0 min时眼房水中匹罗卡品滞留量 ,用二氯甲烷提取房水中药物。结果 :RP- HPLC法适用于眼房水中匹罗卡品的含量测定 ,匹罗卡品质量浓度在 0 .1～ 2 0μg/ ml范围内线性良好 (r=0 .9998) ,平均提取回收率为 6 8.1%± 2 .7%(n=9) ,日内精密度为 2 .87%,日间精密度为 4 .33%。 3种不同剂型匹罗卡品 5 0μl滴眼后 ,药 -时曲线下面积以 1%脂质体为最高 ,且维持时间最长。结论 :本方法易行 ,重现性好 ,线性范围广。将匹罗卡品滴眼液的剂型改为脂质体可以明显提高匹罗卡品的生物利用度 ,具有较好的应用前景。 展开更多

关键词 毛果芸香碱 投药和剂量 色谱法 高效液相 兔

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气相色谱法测定3-氯-7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸中残留溶剂 被引量：2

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作者 马丽 姚彤炜 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期40-43,共4页

目的:建立3-氯-7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸(7-ACCA)中丙酮、甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、异丁醇、吡啶、甲苯残留量的测定方法。方法:采用气相色谱法,载气为氮气,FID检测器,色谱柱为Agilent INNOWAX毛细管柱,柱温为程序升温:起始温度70℃... 目的:建立3-氯-7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸(7-ACCA)中丙酮、甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、异丁醇、吡啶、甲苯残留量的测定方法。方法:采用气相色谱法,载气为氮气,FID检测器,色谱柱为Agilent INNOWAX毛细管柱,柱温为程序升温:起始温度70℃,保持6 min,以10℃/min升温至160℃,保持1 min;进样量1.0μl,分流进样,分流比10∶1,外标法检测7-ACCA中丙酮、甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、异丁醇、吡啶、甲苯的含量。结果:在本研究建立的色谱条件下,丙酮、甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、异丁醇、吡啶、甲苯的最低检出质量浓度分别为2.5μg/ml、1.5μg/ml、15μg/ml、2.5μg/ml、2.5μg/ml、2.5μg/ml、11μg/ml。样品中仅检测到丙酮,且其残留量远在药典规定的限量以下。结论:建立的方法能有效控制7-ACCA中丙酮、甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、异丁醇、吡啶、甲苯的残留量。 展开更多

关键词 色谱法 气相/方法 头孢菌素类/分析 药物残留物 甲醇/分析 二氯甲烷/分析 甲苯/分析 丙酮/分析

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牛血清白蛋白手性柱直接拆分亚叶酸钙消旋体 被引量：1

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作者 沈水杰 曾苏 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2004年第1期11-14,共4页

目的 :建立牛血清白蛋白手性柱直接拆分亚叶酸钙消旋体的方法。方法 :采用高效液相色谱法 ,使用 EC15 0 / 4RESOLVOSIL BSA- 7(15 0 mm× 4 mm)手性色谱柱 ,0 .2 0 mol/ L、p H5 .0磷酸盐缓冲液为流动相 ,对亚叶酸钙消旋体进行拆分 ... 目的 :建立牛血清白蛋白手性柱直接拆分亚叶酸钙消旋体的方法。方法 :采用高效液相色谱法 ,使用 EC15 0 / 4RESOLVOSIL BSA- 7(15 0 mm× 4 mm)手性色谱柱 ,0 .2 0 mol/ L、p H5 .0磷酸盐缓冲液为流动相 ,对亚叶酸钙消旋体进行拆分 ,考察了流动相缓冲液浓度、p H值以及柱温对拆分效果的影响。结果 :流动相的缓冲液浓度、p H和柱温对亚叶酸钙对映体的容量因子 k′,以及分离度 Rs,均有较大影响。左旋亚叶酸钙和右旋亚叶酸钙分别在18.5 min和 2 2 .6 min出峰 ,分离度 Rs=1.4 9。结论 :用本方法可以成功拆分亚叶酸钙对映体。 展开更多

关键词 叶醛酸 牛血清白蛋白 手性拆分

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应用反相高效液相色谱法同时测定积雪草提取物中羟基积雪草苷、积雪草苷及其苷元 被引量：5

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作者 申潜 余露山 +1 位作者 周慧 曾苏 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期135-140,共6页

目的：采用反相高效液相色谱建立同时测定积雪草提取物中羟基积雪草苷、积雪草苷、羟基积雪草酸及积雪草酸4种主要成分的分析方法。方法：采用Agilent 1100高效液相色谱仪系统，ZORBAX Eclipse XDB -C8色谱柱（4．6 mm ×150 mm，5... 目的：采用反相高效液相色谱建立同时测定积雪草提取物中羟基积雪草苷、积雪草苷、羟基积雪草酸及积雪草酸4种主要成分的分析方法。方法：采用Agilent 1100高效液相色谱仪系统，ZORBAX Eclipse XDB -C8色谱柱（4．6 mm ×150 mm，5μm）；流动相为1 mmol/L磷酸二氢钾水溶液-乙腈，梯度洗脱；检测波长205 nm。结果：羟基积雪草苷、积雪草苷、羟基积雪草酸及积雪草酸的色谱响应线性范围良好（R2≥0．9998）；平均回收率分别为97．4％、93．7％、97．5％、99．8％，相对标准偏差值分别为3．4％、1．4％、4．7％、4．4％（n＝9）。结论：采用反相高效液相色谱建立同时测定羟基积雪草苷、积雪草苷及其苷元的方法高效灵敏、重现性好，可以作为积雪草提取物质量控制的检测方法。 展开更多

关键词 色谱法 高压液相 积雪草 化学 积雪草 分离和提纯 三萜类 药理学

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重组人尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶2B7三个功能性突变体的构建、表达及活性比较 被引量：5

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作者 袁玲敏 陈静 曾苏 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期274-283,共10页

目的构建人尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶(UGT)2B7重组酶的3个功能性突变体UGT2B7*71S(A71S,211G>T),UGT2B7*2(H268Y,802C>T)和UGT2B7*5(D398N,1192G>A),以进一步研究该酶野生型和其突变体在对底物作用过程中的功能差异。方法应用... 目的构建人尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶(UGT)2B7重组酶的3个功能性突变体UGT2B7*71S(A71S,211G>T),UGT2B7*2(H268Y,802C>T)和UGT2B7*5(D398N,1192G>A),以进一步研究该酶野生型和其突变体在对底物作用过程中的功能差异。方法应用细菌/杆状病毒系统,将构建的pFastBac-UGT2B7*71S,pFastBac-UGT2B7*2和pFastBac-UGT2B7*5重组质粒转化E.coli DH10Bac大肠杆菌,通过转座作用获得各自的重组粘粒(bac-mid),然后将其转染草地夜蛾(Sf)9细胞后,产生重组杆状病毒。这些病毒再感染Sf9细胞,即可获得野生型UGT2B7*1及其突变体的重组酶。野生型及突变体酶的活性以7-羟基-4-三氟甲基香豆素(7-HFC)为底物,用荧光法测定并分析比较。结果利用杆状病毒/昆虫细胞系统,成功地构建人UGT2B7重组酶的3个功能性突变体。UGT2B7*1对7-HFC的Km值为(0.331±0.018)mmol·L-1,Vmax值为(2.14±0.04)μmol·min-1·g-1蛋白;UGT2B7*71S对7-HFC的Km值为(0.260±0.026)mmol·L-1,Vmax值为(1.36±0.05)μmol·min-1·g-1蛋白;UGT2B7*2对7-HFC的Km值为(0.53±0.06)mmol·L-1,Vmax值为(9.5±0.5)μmol·min-1·g-1蛋白;UGT2B7*5对7-HFC的Km值为(0.59±0.05)mmol·L-1,Vmax值为(7.52±0.28)μmol·min-1·g-1蛋白。结论应用细菌/杆状病毒系统,成功构建了UGT2B7的3个功能性突变体,这些突变体可进一步用于对其他底物的代谢活性比较。 展开更多

关键词 尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶 突变蛋白质类

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人谷胱甘肽硫转移酶的克隆表达及活性鉴定 被引量：1

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作者 柴晓鹃 胡海红 +1 位作者 余露山 曾苏 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期168-174,共7页

目的：克隆表达人谷胱甘肽硫转移酶GSTA1、GSTT1和GSTP1，用于研究化合物的代谢途径。方法：采用反转录PCR得到人谷胱甘肽硫转移酶GSTA1、GSTT1和GSTP1基因全长cDNA。将测序正确的cDNA连接到pET-28 a阳性表达载体上并在大肠杆菌BL21（ ... 目的：克隆表达人谷胱甘肽硫转移酶GSTA1、GSTT1和GSTP1，用于研究化合物的代谢途径。方法：采用反转录PCR得到人谷胱甘肽硫转移酶GSTA1、GSTT1和GSTP1基因全长cDNA。将测序正确的cDNA连接到pET-28 a阳性表达载体上并在大肠杆菌BL21（ DE3）中稳定表达。利用亲和色谱纯化表达得到重组酶，以2，4-二硝基氯苯为底物，测定340 nm波长处吸收度的变化，检测酶活性。结果：PCR产物与克隆载体pMD19-T连接后的质粒测序结果表明，目的基因的cDNA序列完全正确。表达质粒在大肠杆菌BL21（ DE3）中获得良好的可溶性表达，经镍离子亲和柱纯化后目的蛋白较纯，具有较好的催化活性。所表达的 hGSTA1、hGSTT1和hGSTP1酶比活性分别为17．55、0．02、18．75μmol· min-1· mg-1蛋白。结论：成功构建了人谷胱甘肽硫转移酶GSTA1、GSTT1和GSTP1的原核表达系统，得到的重组酶可用于药物代谢研究。 展开更多

关键词 谷胱甘肽转移酶 生物合成 克隆 分子 基因表达 色谱法 亲和 基因扩增 质粒 逆转录聚合酶链反应

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