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拉帕替尼与绿原酸联合应用抑制巨噬细胞M2型极化及抗乳腺癌转移的作用研究 被引量:6
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作者 张洁琼 姚张婷 +4 位作者 梁桂开 陈羲 吴洪海 金露 丁玲 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期493-499,共7页
目的:研究拉帕替尼与绿原酸联合应用对抑制巨噬细胞M2型极化的影响及其在乳腺癌转移中的作用。方法:采用IL-13建立巨噬细胞M2型极化的体外模型,流式细胞术检测拉帕替尼和绿原酸合用对巨噬细胞M2型表面标志物CD206的影响;实时定量PC... 目的:研究拉帕替尼与绿原酸联合应用对抑制巨噬细胞M2型极化的影响及其在乳腺癌转移中的作用。方法:采用IL-13建立巨噬细胞M2型极化的体外模型,流式细胞术检测拉帕替尼和绿原酸合用对巨噬细胞M2型表面标志物CD206的影响;实时定量PCR检测拉帕替尼和绿原酸合用对巨噬细胞M2型特异性基因表达的影响;采用自发乳腺癌且发生肺转移的MMTV—PyVT小鼠模型考察两药合用对乳腺癌肺转移的影响,观察肺转移灶组织HE染色结果并统计转移灶点数;免疫荧光法分析乳腺癌组织中巨噬细胞的M2型极化情况。结果:拉帕替尼与绿原酸合用能够有效抑制IL-13诱导的F4/80hiCD206hi细胞(即M2型巨噬细胞)增多[(42.17%±2.59%)与(61.15%±7.58%),P〈0.05];两药合用能明显下调由IL-13诱导的Yml基因的上调[(1.8±0.0)与(1.0±0.0),P〈0.05],且其作用比绿原酸单给药组强[(0.9±0.1)与(1.8±0.0),P〈0.051;拉帕替尼与绿原酸合用能显著减少小鼠肺转移灶点数[P〈0.05];两药合用与对照组比较能降低瘤内CD206阳性细胞所占巨噬细胞的比例I(6.08%±2.60%)与(29.04%±5.86%),P〈0.05]。结论:拉帕替尼与绿原酸的联合用药能有效抑制巨噬细胞的M2型极化以及乳腺癌的转移。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤/药物疗法 肿瘤转移 脱氧胞苷/类似物和衍生物 脱氧胞苷/治疗应用 抗肿瘤药(中药)/治疗应用 绿原酸/治疗应用 巨噬细胞 白细胞介素13
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间充质干细胞的肿瘤归巢特性及其肿瘤靶向治疗应用研究进展 被引量:4
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作者 李艾 张添源 高建青 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期20-34,共15页
间充质干细胞(MSC)具有受肿瘤组织或肿瘤微环境释放的多种趋化因子吸引而向肿瘤组织靶向归巢的天然属性,因此有望成为一种新型的活细胞传递载体用于抗肿瘤药物/基因的靶向递送。外源性MSC静脉注射后会首先在肺部被大量截留,经肺清除后... 间充质干细胞(MSC)具有受肿瘤组织或肿瘤微环境释放的多种趋化因子吸引而向肿瘤组织靶向归巢的天然属性,因此有望成为一种新型的活细胞传递载体用于抗肿瘤药物/基因的靶向递送。外源性MSC静脉注射后会首先在肺部被大量截留,经肺清除后向肿瘤组织归巢,可以通过增强趋化因子与MSC上受体的相互作用或改变注射方式减少MSC截留等方法改善MSC的肿瘤归巢效率。基于MSC的传递系统可用于靶向递送阿霉素、紫杉醇和吉西他滨等化疗药物,帮助解决化疗药物半衰期较短、肿瘤靶向性较差等问题。其次,MSC可以通过基因重组的方式有效保护和靶向递送肿瘤细胞杀伤基因、免疫系统调节基因等治疗基因,通过在肿瘤部位特异性表达治疗基因实现肿瘤抑制或杀伤作用。此外,MSC还可以作为细胞传递载体靶向递送诊疗药物,发挥肿瘤诊疗一体化的治疗作用。总之,基于MSC的细胞载体递送系统可实现化疗药物、治疗基因和诊疗药物的靶向递送并在多种类型的肿瘤靶向治疗中取得良好的疗效。相信随着这一细胞载体递送策略的不断改良和优化,基于MSC的靶向传递系统将为肿瘤靶向治疗提供一种新的传递策略和治疗选择。 展开更多
关键词 药物递送系统 药物载体 基因靶向 肿瘤 间充质干细胞 综述
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小鼠pLCK-CD69-IRES-EGFP表达载体构建及CD69转基因小鼠的建立
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作者 王静 胡燕 +5 位作者 谭笔琴 王佳佳 赵梦婷 翁勤洁 朱狄峰 汪慧英 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期511-516,共6页
目的:构建携小鼠细胞表面活化蛋白CD69和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)在细胞内核糖体切入位点(IRES)的表达载体pLCK—CD69-IRES—EGFP,并基于此创建CD69转基因小鼠。方法:首先通过小鼠肺组织提取RNA,逆转录成为cDNA,经过PubMed搜... 目的:构建携小鼠细胞表面活化蛋白CD69和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)在细胞内核糖体切入位点(IRES)的表达载体pLCK—CD69-IRES—EGFP,并基于此创建CD69转基因小鼠。方法:首先通过小鼠肺组织提取RNA,逆转录成为cDNA,经过PubMed搜索设计PCR引物,PCR法扩增mCD69片断,接着将该DNA片段经测序验证后接入pInsulater—LCK—IRES—EGFP质粒,构建pLCK—CD69-IRES—EGFP转基因载体;再将其转染到293T细胞中,通过荧光显微镜技术确定其在293T细胞中的表达状况;最后将载体显微注射入受精卵并移植入假孕母小鼠,出生小鼠取尾经PCR鉴定获得阳性首建鼠,并通过荧光显微镜和流式细胞术确定淋巴细胞上CD69的表达。结果:经酶切、DNA测序鉴定证实pLCK—CD69-IRES—EGFP表达载体构建成功;荧光倒置显微镜检查证实其在转染的293T细胞内的蛋白表达;小鼠取尾PCR鉴定明确CD69转基因小鼠创建成功;CD69转基因小鼠有外周血淋巴细胞的减少及静息状态下CD69的表达。结论:成功构建pLCK-CD69-IRES—EGFP表达载体及制备CD69转基因小鼠,为CD69在炎症性疾病中作用的整体模型研究奠定了基础。 展开更多
关键词 抗原 核糖体 绿色荧光蛋白质类/代谢 质粒 转染 小鼠 转基因
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舒尼替尼通过调控转化生长因子β介导的上皮—间质转化抑制卵巢癌细胞转移 被引量:3
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作者 陈子博 常琳琳 +4 位作者 周恬伊 王丹丹 陈瑛 赵平鸽 朱虹 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期479-485,共7页
目的:研究舒尼替尼通过调控转化生长因子β(TGF—β)介导的上皮-间质转化抑制卵巢癌细胞转移的作用和机制。方法:运用划痕实验和transwell实验考察舒尼替尼对卵巢癌细胞SKOV3运动能力的影响;采用蛋白质印迹法、实时定量PCR技术和... 目的:研究舒尼替尼通过调控转化生长因子β(TGF—β)介导的上皮-间质转化抑制卵巢癌细胞转移的作用和机制。方法:运用划痕实验和transwell实验考察舒尼替尼对卵巢癌细胞SKOV3运动能力的影响;采用蛋白质印迹法、实时定量PCR技术和免疫荧光技术分析舒尼替尼对TGF-β诱导的钙黏蛋白(E—cadherin)表达的影响;并通过蛋白质印迹法和报告基因检测技术分析舒尼替尼对Snail蛋白水平和Smad转录活性的影响。结果:舒尼替尼可抑制SKOV3细胞的迁移运动,且呈现一定的量效关系。TGF—β刺激SKOV3细胞后,细胞内E-cadherin蛋白表达减少,而舒尼替尼可部分回调TGF—β减少的E—cadherin。TGF—β可诱导Snail蛋白上调,而该效应可被舒尼替尼阻断;TGF-β可增强Smad复合物的转录活性,而舒尼替尼则可削弱TGF—β对该转录活性的诱导作用。结论:舒尼替尼通过干预Smad复合物的转录活性阻断Snail对E—cadherin的负性调控,从而抑制卵巢癌SKOV3细胞发生上皮-间质转化,并干预其运动迁移能力。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤/病理学 间质细胞/病理学 上皮细胞/病理学 肿瘤转移 吡咯类/治疗应用 吲哚类/治疗应用 钙黏着糖蛋白类/生物合成 转录因子/生物合成
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洛伐他汀或辛伐他汀协同组蛋白去乙酰化酶抑制剂对人非小细胞肺癌的抑制作用 被引量:2
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作者 梁桂开 姚张婷 +6 位作者 张洁琼 陈羲 刘瑞阳 陈卉卉 吴洪海 金露 丁玲 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期500-505,共6页
目的:研究他汀类药物能否协同增强组蛋白去乙酰化酶抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)对非小细胞肺癌A549细胞的生长抑制和凋亡诱导作用。方法:采用磺酰罗丹明B比色法检测不同浓度的SAHA与洛伐他汀/辛伐他汀合用对A549细胞存活率的... 目的:研究他汀类药物能否协同增强组蛋白去乙酰化酶抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)对非小细胞肺癌A549细胞的生长抑制和凋亡诱导作用。方法:采用磺酰罗丹明B比色法检测不同浓度的SAHA与洛伐他汀/辛伐他汀合用对A549细胞存活率的影响;采用Annexinv/PI双染结合流式细胞术检测2.5μmol/LSAHA与不同浓度的洛伐他汀联合应用对A549细胞凋亡的影响;并采用蛋白质印迹法检测2.5μmot/LSAHA与5μmol/L洛伐他汀联合作用对凋亡相关标志蛋白聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(c-PARP)及p21蛋白表达水平影响。结果:与SAHA组比较,洛伐他汀/辛伐他汀与SAHA合用组减少A549细胞的存活率。不同浓度的洛伐他汀能协同增加SAHA对A549细胞的凋亡诱导作用,同时合用组c-PARP的表达较单用两组增加,说明洛伐他汀能协同SAHA诱导A549细胞凋亡。2.5μmol/LSAHA单独作用A549细胞48h可以上调A549细胞p21蛋白的表达,5μmol/L洛伐他汀与2.5μmol/LSAHA合用可以回调p21蛋白的表达。结论:洛伐他汀及辛伐他汀能增加SAHA对非小细胞肺癌A549细胞的生长抑制作用,其中洛伐他汀增强SAHA对A549细胞的生长抑制作用可能与其共同作用后p21蛋白表达下调相关。 展开更多
关键词 非小细胞肺/药物疗法 洛伐他汀/药理学 辛伐他汀/药理学 物协同作用 原癌基因蛋白质p21(ras)
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盐酸索他洛尔的合成 被引量:2
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作者 孙登学 章国林 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第1期74-77,共4页
以苯胺为原料,经过甲磺酰化、傅克酰基化、异丙胺化和氢化还原得到盐酸索他洛尔产品(Ⅰ),总收率达到75.9%(以苯胺计),化学纯度达到99.8%,最终产物结构通过IR、1HNMR、ESI-MS及元素分析进行表征。该文对甲磺酰化工序的缚酸剂进行研究,确... 以苯胺为原料,经过甲磺酰化、傅克酰基化、异丙胺化和氢化还原得到盐酸索他洛尔产品(Ⅰ),总收率达到75.9%(以苯胺计),化学纯度达到99.8%,最终产物结构通过IR、1HNMR、ESI-MS及元素分析进行表征。该文对甲磺酰化工序的缚酸剂进行研究,确定碳酸氢钠最佳摩尔比为n(碳酸氢钠)∶n(苯胺)=1.1∶1,反应温度为室温,收率为97%;对氢化还原反应的钯炭含量、用量和回收套用进行研究,确定7%钯炭最佳用量为中间体IV投料质量的5%,回收钯炭套用最佳次数为3次。该法合成步骤简便,工艺绿色环保,经济适用,非常适合于产业化大生产。 展开更多
关键词 抗心律失常 Β受体阻断剂 盐酸索他洛尔 医药原料
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