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题名稳定表达CD200的U937细胞株的建立
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作者
郝兵
高嵩
侯治富
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机构
浙江大学第一附属医院卫生部多器官联合移植重点实验室
浙江大学医学院附属第二医院检验科
吉林大学中日联谊医院中心实验室
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出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第11期1019-1021,1025,共4页
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文摘
目的:构建稳定表达CD200蛋白的人单核细胞系U937细胞株,为研究该基因的作用机制奠定基础。方法:用电转染基因法将含有人CD200 cDNA的真核表达载体pcDNA3-CD200质粒和pcDNA3质粒分别转入人单核细胞系U937细胞中,经G418筛选,转染阳性细胞连续传代培养,并应用RT-PCR及流式细胞术检测CD200 mRNA和蛋白表达情况。结果:经G418筛选,U937细胞全部死亡,转染pcDNA3质粒和pcDNA3-CD200重组质粒的U937细胞存活,并可连续传代培养30代;转染pcDNA3-CD200重组质粒的U937细胞RT-PCR检测有一特异性扩增带;流式细胞术检测CD200表达结果显示:转染pcD-NA3-CD200重组质粒的U937细胞CD200表达阳性细胞率(77.20%)显著高于转染pcDNA3质粒(3.20%)和U937细胞组(2.10%)(F=133996.40,P<0.01);各代间差异无显著性(F=1.03,P>0.05)。结论:用基因转染法成功地建立了稳定表达CD200蛋白的人单核细胞株U937-pcDNA3-CD200。
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关键词
CD200
U937细胞
电转染
流式细胞术
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Keywords
CD200
U937 cells
Electrotransfer
Flow cytometry
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分类号
Q786
[生物学—分子生物学]
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