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螺旋藻基因工程研究(I)——几种抗生素对钝顶螺旋藻的抑制效应
被引量：
5
1
作者
王勇
苏忠亮
钱凯先
《浙江大学学报（工学版）》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期121-123,共3页
为了建立螺旋藻外源基因表达体系,首先必须选择螺旋藻抗性基因.本实验选用三种抗生素进行敏感性研究,实验结果表明:螺旋藻对这三种抗生素的敏感性有明显差异,它们对螺旋藻生长的抑制作用依次为:氯霉素>链霉素>氨苄青霉素.氯霉素...
为了建立螺旋藻外源基因表达体系,首先必须选择螺旋藻抗性基因.本实验选用三种抗生素进行敏感性研究,实验结果表明:螺旋藻对这三种抗生素的敏感性有明显差异,它们对螺旋藻生长的抑制作用依次为:氯霉素>链霉素>氨苄青霉素.氯霉素对螺旋藻生长的抑制作用与氯霉素的浓度和作用时间呈正相关.600mg/L氯霉素处理48h就对螺旋藻有明显的致死作用,致死率分别为:48h为17.51%、144h为68.67%;400mg/L的氯霉素:48h至死率为1.96%、144h为49.76%;200mg/L以下低浓度的氯霉素对螺旋藻的抑制作用需要较长时间,144h才具有明显的致死作用,致死率为19.24%.
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关键词
钝顶螺旋藻
基因工程
抗生素
生长抑制作用
抑制效应
抗性基因
光合表达系统
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职称材料
基因工程酵母菌来源的D-氨基酸氧化酶分离纯化
被引量：
2
2
作者
史训龙
冯美卿
+2 位作者
贺佳音
袁中一
周珮
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第1期71-74,85,共5页
目的 以基因工程酵母表达的胞内D-氨基酸氧化酶(DAAO)为原料,通过破细胞,分离纯化DAAO。 方法 采用机械研磨,反复冻溶,超声波等多种方法破细胞,获得粗酶液,硫酸铵分段沉淀。沉淀透析后,经 DEAE Sephadex A-50,DEAE-DE52,Q-sepharose等...
目的 以基因工程酵母表达的胞内D-氨基酸氧化酶(DAAO)为原料,通过破细胞,分离纯化DAAO。 方法 采用机械研磨,反复冻溶,超声波等多种方法破细胞,获得粗酶液,硫酸铵分段沉淀。沉淀透析后,经 DEAE Sephadex A-50,DEAE-DE52,Q-sepharose等离子交换柱进行第一步分离,获得的含酶粗品,再经Sephaciyl S-100分子筛进一步纯化获得电泳纯的DAAO。结果 超声波破壁为最佳的破壁方法,得到的每毫升酶液所含 的酶活力是其他破壁方法的两倍以上,最高达到12 000 U／mi,。两步硫酸铵沉淀能粗分DAAO,50％硫酸铵沉 淀酶回收率可达85％以上。用Q-sepharose、Sephacryl S-100分子筛柱层析两步纯化,酶活力回收率最高可达 90％,SDS-PAGE显示单一蛋白条带。结论 本实验方法能得到电泳纯的DAAO,总回收率约为40％。
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关键词
S-100
细胞
法能
透析
分离纯化
电泳
表达
硫酸铵沉淀
基因工程酵母
D-氨基酸氧化酶
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职称材料
题名
螺旋藻基因工程研究(I)——几种抗生素对钝顶螺旋藻的抑制效应
被引量：
5
1
作者
王勇
苏忠亮
钱凯先
机构
浙江大学生命科学院生物技术系
出处
《浙江大学学报（工学版）》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期121-123,共3页
文摘
为了建立螺旋藻外源基因表达体系,首先必须选择螺旋藻抗性基因.本实验选用三种抗生素进行敏感性研究,实验结果表明:螺旋藻对这三种抗生素的敏感性有明显差异,它们对螺旋藻生长的抑制作用依次为:氯霉素>链霉素>氨苄青霉素.氯霉素对螺旋藻生长的抑制作用与氯霉素的浓度和作用时间呈正相关.600mg/L氯霉素处理48h就对螺旋藻有明显的致死作用,致死率分别为:48h为17.51%、144h为68.67%;400mg/L的氯霉素:48h至死率为1.96%、144h为49.76%;200mg/L以下低浓度的氯霉素对螺旋藻的抑制作用需要较长时间,144h才具有明显的致死作用,致死率为19.24%.
关键词
钝顶螺旋藻
基因工程
抗生素
生长抑制作用
抑制效应
抗性基因
光合表达系统
Keywords
Spirulina platensis
sensitivity
antibiotics
Chloromycetin
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
Q949.22 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
基因工程酵母菌来源的D-氨基酸氧化酶分离纯化
被引量：
2
2
作者
史训龙
冯美卿
贺佳音
袁中一
周珮
机构
复旦
大学
药
学院
生物
合成药物化学教研室
浙江大学生命科学院生物技术系
中国
科学院
上海
生命
科学院
生物
化学与细胞
生物
学研究所
出处
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第1期71-74,85,共5页
文摘
目的 以基因工程酵母表达的胞内D-氨基酸氧化酶(DAAO)为原料,通过破细胞,分离纯化DAAO。 方法 采用机械研磨,反复冻溶,超声波等多种方法破细胞,获得粗酶液,硫酸铵分段沉淀。沉淀透析后,经 DEAE Sephadex A-50,DEAE-DE52,Q-sepharose等离子交换柱进行第一步分离,获得的含酶粗品,再经Sephaciyl S-100分子筛进一步纯化获得电泳纯的DAAO。结果 超声波破壁为最佳的破壁方法,得到的每毫升酶液所含 的酶活力是其他破壁方法的两倍以上,最高达到12 000 U／mi,。两步硫酸铵沉淀能粗分DAAO,50％硫酸铵沉 淀酶回收率可达85％以上。用Q-sepharose、Sephacryl S-100分子筛柱层析两步纯化,酶活力回收率最高可达 90％,SDS-PAGE显示单一蛋白条带。结论 本实验方法能得到电泳纯的DAAO,总回收率约为40％。
关键词
S-100
细胞
法能
透析
分离纯化
电泳
表达
硫酸铵沉淀
基因工程酵母
D-氨基酸氧化酶
Keywords
D-amino acid oxidase
extraction
purification
分类号
R459.5 [医药卫生—治疗学]
Q93 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
螺旋藻基因工程研究(I)——几种抗生素对钝顶螺旋藻的抑制效应
王勇
苏忠亮
钱凯先
《浙江大学学报（工学版）》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2003
5
在线阅读
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职称材料
2
基因工程酵母菌来源的D-氨基酸氧化酶分离纯化
史训龙
冯美卿
贺佳音
袁中一
周珮
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005
2
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