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2005-2008年浙江省生猪主产区猪戊型肝炎血清流行病学调查 被引量:6
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作者 帅江冰 张晓峰 +2 位作者 徐晶靓 陈宁 方维焕 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1037-1042,共6页
本研究旨在建立检测猪戊型肝炎病毒(HEV)感染的间接ELISA方法,并将其用于分析浙江省生猪主产区猪群的HEV感染状况。首先人工合成并原核表达了HEV ORF2蛋白的主要抗原表位区,免疫印迹显示表达产物对HEV抗体阳性的猪血清具有良好的反应性... 本研究旨在建立检测猪戊型肝炎病毒(HEV)感染的间接ELISA方法,并将其用于分析浙江省生猪主产区猪群的HEV感染状况。首先人工合成并原核表达了HEV ORF2蛋白的主要抗原表位区,免疫印迹显示表达产物对HEV抗体阳性的猪血清具有良好的反应性。以此纯化蛋白为包被抗原建立了猪血清中HEV特异性抗体的ELISA检测方法,检测结果显示其与商品化HEV抗体诊断试剂盒的检测符合率达91.5%。对2005-2008年采集自浙江省不同地区46个猪场的1330份血清进行了检测,有741份血清检测为猪HEV抗体阳性,平均阳性率为55.7%。其中2005和2006年HEV抗体阳性率分别为62.7%(175/279)和61.4%(301/490),明显高于2007年的43.1%(59/137)和2008年的48.6%(206/424)。同时,66-100日龄中猪的血清HEV抗体阳性率(58.2%,110/189)显著高于30-65日龄小猪(39.7%,73/184)和101-160日龄大猪(44.1%,83/188)。从猪场水平来看,仅有3个猪场未检测到HEV抗体,场阳性率93.2%。结果表明本研究建立的ELISA方法切实可行,检测结果显示浙江省猪场中HEV感染相当普遍。 展开更多
关键词 猪戊型肝炎病毒 间接ELISA ORF2蛋白 血清学调查
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PRRSV浙江分离株Nsp2基因序列分析 被引量:1
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作者 张涵淞 扈鸿霞 +4 位作者 赵灵燕 周彩琴 李肖梁 方维焕 徐辉 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第11期20-25,共6页
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)临床上主要表现为流产、早产、死胎、仔猪成活率下降和育成猪呼吸系统病变等。本研究用RT-PCR对2008年-2009年采集于浙江省部分发病猪场的41株疑似猪繁殖与呼吸综合征病猪的脾、肺、淋巴结混合组织样本进行PRRS... 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)临床上主要表现为流产、早产、死胎、仔猪成活率下降和育成猪呼吸系统病变等。本研究用RT-PCR对2008年-2009年采集于浙江省部分发病猪场的41株疑似猪繁殖与呼吸综合征病猪的脾、肺、淋巴结混合组织样本进行PRRSV病毒检测和Nsp2基因序列分析。结果显示,41株PRRSV流行毒株中20份为NSP2缺失毒株,与国内分离株JXA1、HuN、HUN4等具有相同的缺失特征。41个毒株之间同源性为89.2%~100.0%,其中20个缺失株之间核苷酸同源性为94.2%~99.8%;21个非缺失株之间核苷酸同源性为99.2%~100.0%。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 NSP2 序列分析
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不同猪瘟疫苗类型及剂量的抗体反应特性研究 被引量:4
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作者 毛文杰 陈宁 +2 位作者 曲健 唐宇龙 方维焕 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第1期87-90,共4页
随机选择3个猪场,从9头母猪生下的仔猪中挑选81头仔猪。随机分成9组,每组又分为3个小组,每小组3头,分别免疫猪瘟组织苗(A)、猪瘟细胞苗(B)和猪瘟脾淋苗(C),各疫苗分别采用1头份、2头份和3头份3个剂量。于25日龄首免疫前后不同时间点采血... 随机选择3个猪场,从9头母猪生下的仔猪中挑选81头仔猪。随机分成9组,每组又分为3个小组,每小组3头,分别免疫猪瘟组织苗(A)、猪瘟细胞苗(B)和猪瘟脾淋苗(C),各疫苗分别采用1头份、2头份和3头份3个剂量。于25日龄首免疫前后不同时间点采血,分离血清。应用ELISA和IHA两种方法分别对采集的540份血清检测猪瘟抗体。不同类型的猪瘟疫苗免疫试验结果表明:猪瘟脾淋苗免疫效果较好,但不同疫苗之间的抗体水平差异不显著。不同免疫剂量的试验结果显示:3种疫苗以3头份的剂量免疫后抗体反应略高于1头份和2头份,二免后都能获得较高的抗体水平。 展开更多
关键词 猪瘟疫苗 抗体水平 酶联免疫吸附试验 正向间接血凝试验
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猪瘟病毒石门株E2蛋白在杆状病毒系统中的表达 被引量:2
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作者 周向阳 万婧 +4 位作者 廖迅 朱竹君 陈晓玮 刘菲芬 方维焕 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第1期28-32,共5页
以杆状病毒Bac-to-Bac表达系统表达猪瘟病毒(CSFV)石门株的E2蛋白,将CSFV石门株的E2囊膜糖蛋白基因亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTA中,获得重组转移质粒pFastBacHTA-E2。转化大肠埃希菌DH10Bac感受态细胞,获得重组Bacmid质粒后转染... 以杆状病毒Bac-to-Bac表达系统表达猪瘟病毒(CSFV)石门株的E2蛋白,将CSFV石门株的E2囊膜糖蛋白基因亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTA中,获得重组转移质粒pFastBacHTA-E2。转化大肠埃希菌DH10Bac感受态细胞,获得重组Bacmid质粒后转染Sf9昆虫细胞,获得重组病毒。传毒3代后对表达蛋白进行Western blot和间接免疫荧光试验检测。结果显示,E2蛋白获得高效表达,能被抗E2蛋白的单克隆抗体2B10和6×His-单克隆抗体特异性识别,表明CSFV石门株E2囊膜糖蛋白在Sf9昆虫细胞中得到成功表达,具有良好的抗原反应性。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 E2囊膜糖蛋白 杆状病毒表达系统
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杆状病毒在载体疫苗中应用的研究进展 被引量:2
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作者 万婧 周向阳 方维焕 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期35-41,共7页
目前利用来源于哺乳动物的病毒作病毒载体介导动物和人体的免疫应答存在诸多问题,如预存免疫和高致病力重组病毒的出现等。将自然条件下宿主为非哺乳类动物的病毒发展为载体的过程中,由于杆状病毒内在的免疫刺激活性、广泛的组织趋向性... 目前利用来源于哺乳动物的病毒作病毒载体介导动物和人体的免疫应答存在诸多问题,如预存免疫和高致病力重组病毒的出现等。将自然条件下宿主为非哺乳类动物的病毒发展为载体的过程中,由于杆状病毒内在的免疫刺激活性、广泛的组织趋向性及生物安全性使杆状病毒成为疫苗载体发展中的有效工具。随着分子生物学的深入发展,国内外学者应用基因工程技术对杆状病毒转移载体进行了深入研究,并取得丰富的研究成果。对杆状病毒作为转移载体在未来载体疫苗发展中的应用进行综述。 展开更多
关键词 杆状病毒 载体疫苗 免疫 传染性疾病
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