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新型机械敏感离子通道Piezo1和TRPV4蛋白siRNA双沉默模式对骨关节炎大鼠模型的修复作用研究
1
作者
周勇伟
章才华
+1 位作者
李晓飞
蔡迅梓
《中国临床解剖学杂志》
CSCD
北大核心
2021年第6期692-699,共8页
目的探究新型机械敏感离子通道Piezo1和TRPV4蛋白siRNA双沉默模式对骨关节炎大鼠模型的修复作用。方法构建SD大鼠的OA动物模型,根据处理方案的不同,将SD大鼠分成4组,即空白对照组,siRNA-Piezo1组,siRNA-TRPV4组和双基因沉默组。通过HE...
目的探究新型机械敏感离子通道Piezo1和TRPV4蛋白siRNA双沉默模式对骨关节炎大鼠模型的修复作用。方法构建SD大鼠的OA动物模型,根据处理方案的不同,将SD大鼠分成4组,即空白对照组,siRNA-Piezo1组,siRNA-TRPV4组和双基因沉默组。通过HE染色和番红-固绿染色等方法,利用改良Minkin’s评分和OARSI评分进行评估。利用免疫组织化学染色和RT-PCR检测膝关节软骨组织中Aggrecan蛋白和Collagen Ⅱ的表达。结果 HE染色和番红-固绿染色等结果显示,siRNA-Piezo1组和siRNA-TRPV4组膝关节软骨组织的评分要明显优于模型组,siRNA-Piezo1组和siRNA-TRPV4组(P<0.05)。免疫组织化学染色和RT-PCR结果显示,双基因沉默组中Aggrecan和Collagen Ⅱ蛋白的表达量明显高于siRNA-Piezo1组和siRNA-TRPV4组(P<0.05)。结论 Piezo1和TRPV4蛋白siRNA双沉默模式可以促进Aggrecan和Collagen Ⅱ的表达,进而对骨关节炎大鼠模型起到一定的修复作用。
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关键词
机械激活离子通道
骨关节炎
动物模型
修复
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职称材料
敲低IL-33下调炎症因子和NLRP3表达抑制哮喘小鼠炎症反应
被引量：
1
2
作者
林玛丽
李晓飞
+3 位作者
曹丽梅
陈熙泼
徐丽丹
盛放
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第7期577-584,共8页
目的探讨白细胞介素33(IL-33)对哮喘小鼠炎症反应的调控机制。方法利用10μg/mL脂多糖(LPS)构建小鼠骨髓间充质干细胞(BMMSC)的体外细胞炎症模型,根据是否转染IL-33的小干扰RNA(si-IL-33)质粒和过表达(IL-33-OE)质粒,将细胞分成si-IL-33...
目的探讨白细胞介素33(IL-33)对哮喘小鼠炎症反应的调控机制。方法利用10μg/mL脂多糖(LPS)构建小鼠骨髓间充质干细胞(BMMSC)的体外细胞炎症模型,根据是否转染IL-33的小干扰RNA(si-IL-33)质粒和过表达(IL-33-OE)质粒,将细胞分成si-IL-33组,IL-33-OE组和模型组。实时荧光定量PCR检测IL-33、含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)、IL-1β和IL-6的信使RNA(mRNA)表达水平。钙离子荧光探针检测试剂盒(Fluo-3 AM)检测钙离子含量,JC-1线粒体膜电位检测试剂盒检测线粒体膜电位变化。利用腹腔注射致敏剂和激发剂的方法建立小鼠哮喘模型,根据处理方案的不同,将哮喘小鼠分成si-IL-33组、IL-33-OE组和模型组,每组5只。ELISA试剂盒检测小鼠血清IL-1β、IL-6和NLRP3含量,HE染色和Masson染色检测肺组织的病变情况。结果与模型组相比,si-IL-33组的IL-33、NLRP3、IL-1β和IL-6的mRNA表达量均降低,IL-33-OE组的IL-33、NLRP3、IL-1β和IL-6的mRNA表达量增加。BMMSC中钙离子荧光降低,而IL-33-OE组中钙离子荧光升高。si-IL-33组细胞线粒体中JC-1以聚合物形式存在,呈明亮的红色荧光,细胞中的绿色荧光非常弱;说明si-IL-33组细胞线粒体稳定,线粒体功能尚在。使用IL-33-OE质粒处理使线粒体膜电位下降后,JC-1不能以聚合物形式存在于线粒体基质中,此时线粒体内红色荧光强度显著降低,而细胞质中的绿色荧光显著增强。si-IL-33组小鼠血清中IL-1β、IL-6、NLRP3的含量明显降低,而IL-33-OE组小鼠血清中IL-1β、IL-6、NLRP3的含量明显升高。si-IL-33组几乎未见炎细胞浸润,炎症缓解,上皮细胞正常。si-IL-33组肺组织的纤维增生部分趋于正常。与模型组相比,si-IL-33组的支气管壁总面积(WAt)/支气管基底膜周径(Pbm)和气管壁平滑肌面积(WAm)/Pbm降低,IL-33-OE组的WAt/Pbm和WAm/Pbm增加。结论敲低IL-33通过下调NLRP3、IL-1β、IL-6表达抑制哮喘小鼠的炎症反应。
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关键词
哮喘
白细胞介素33(IL-33)
含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)
IL-1Β
IL-6
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职称材料
题名
新型机械敏感离子通道Piezo1和TRPV4蛋白siRNA双沉默模式对骨关节炎大鼠模型的修复作用研究
1
作者
周勇伟
章才华
李晓飞
蔡迅梓
机构
浙江大学
医学院
附属
第二
医院
骨
科
浙江大学医学院附属金华医院骨一科
出处
《中国临床解剖学杂志》
CSCD
北大核心
2021年第6期692-699,共8页
基金
浙江省自然科学基金(Q20H060058)
浙江省医药卫生科技项目(2020KY343)
金华市公益类项目(2019-4-002)。
文摘
目的探究新型机械敏感离子通道Piezo1和TRPV4蛋白siRNA双沉默模式对骨关节炎大鼠模型的修复作用。方法构建SD大鼠的OA动物模型,根据处理方案的不同,将SD大鼠分成4组,即空白对照组,siRNA-Piezo1组,siRNA-TRPV4组和双基因沉默组。通过HE染色和番红-固绿染色等方法,利用改良Minkin’s评分和OARSI评分进行评估。利用免疫组织化学染色和RT-PCR检测膝关节软骨组织中Aggrecan蛋白和Collagen Ⅱ的表达。结果 HE染色和番红-固绿染色等结果显示,siRNA-Piezo1组和siRNA-TRPV4组膝关节软骨组织的评分要明显优于模型组,siRNA-Piezo1组和siRNA-TRPV4组(P<0.05)。免疫组织化学染色和RT-PCR结果显示,双基因沉默组中Aggrecan和Collagen Ⅱ蛋白的表达量明显高于siRNA-Piezo1组和siRNA-TRPV4组(P<0.05)。结论 Piezo1和TRPV4蛋白siRNA双沉默模式可以促进Aggrecan和Collagen Ⅱ的表达,进而对骨关节炎大鼠模型起到一定的修复作用。
关键词
机械激活离子通道
骨关节炎
动物模型
修复
Keywords
Mechanical sensing ion channels
Osteoarthritis
Animal model
Repair
分类号
R684.3 [医药卫生—骨科学]
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职称材料
题名
敲低IL-33下调炎症因子和NLRP3表达抑制哮喘小鼠炎症反应
被引量：
1
2
作者
林玛丽
李晓飞
曹丽梅
陈熙泼
徐丽丹
盛放
机构
浙江大学
医学院
附属
金华
医院
妇女儿童院区(
金华
市妇幼保健院
浙江大学医学院附属金华医院骨一科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第7期577-584,共8页
基金
浙江省医药卫生科技计划项目(2021KY1176,2023KY383)
金华市公益类项目(2020-4-008)。
文摘
目的探讨白细胞介素33(IL-33)对哮喘小鼠炎症反应的调控机制。方法利用10μg/mL脂多糖(LPS)构建小鼠骨髓间充质干细胞(BMMSC)的体外细胞炎症模型,根据是否转染IL-33的小干扰RNA(si-IL-33)质粒和过表达(IL-33-OE)质粒,将细胞分成si-IL-33组,IL-33-OE组和模型组。实时荧光定量PCR检测IL-33、含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)、IL-1β和IL-6的信使RNA(mRNA)表达水平。钙离子荧光探针检测试剂盒(Fluo-3 AM)检测钙离子含量,JC-1线粒体膜电位检测试剂盒检测线粒体膜电位变化。利用腹腔注射致敏剂和激发剂的方法建立小鼠哮喘模型,根据处理方案的不同,将哮喘小鼠分成si-IL-33组、IL-33-OE组和模型组,每组5只。ELISA试剂盒检测小鼠血清IL-1β、IL-6和NLRP3含量,HE染色和Masson染色检测肺组织的病变情况。结果与模型组相比,si-IL-33组的IL-33、NLRP3、IL-1β和IL-6的mRNA表达量均降低,IL-33-OE组的IL-33、NLRP3、IL-1β和IL-6的mRNA表达量增加。BMMSC中钙离子荧光降低,而IL-33-OE组中钙离子荧光升高。si-IL-33组细胞线粒体中JC-1以聚合物形式存在,呈明亮的红色荧光,细胞中的绿色荧光非常弱;说明si-IL-33组细胞线粒体稳定,线粒体功能尚在。使用IL-33-OE质粒处理使线粒体膜电位下降后,JC-1不能以聚合物形式存在于线粒体基质中,此时线粒体内红色荧光强度显著降低,而细胞质中的绿色荧光显著增强。si-IL-33组小鼠血清中IL-1β、IL-6、NLRP3的含量明显降低,而IL-33-OE组小鼠血清中IL-1β、IL-6、NLRP3的含量明显升高。si-IL-33组几乎未见炎细胞浸润,炎症缓解,上皮细胞正常。si-IL-33组肺组织的纤维增生部分趋于正常。与模型组相比,si-IL-33组的支气管壁总面积(WAt)/支气管基底膜周径(Pbm)和气管壁平滑肌面积(WAm)/Pbm降低,IL-33-OE组的WAt/Pbm和WAm/Pbm增加。结论敲低IL-33通过下调NLRP3、IL-1β、IL-6表达抑制哮喘小鼠的炎症反应。
关键词
哮喘
白细胞介素33(IL-33)
含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)
IL-1Β
IL-6
Keywords
asthma
interleukin 33(IL-33)
NLR family pyrin domain containing 3(NLRP3)
IL-1β
IL-6
分类号
R256.12 [医药卫生—中医内科学]
R562.25 [医药卫生—呼吸系统]
R364.5 [医药卫生—病理学]
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题名
作者
出处
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被引量
操作
1
新型机械敏感离子通道Piezo1和TRPV4蛋白siRNA双沉默模式对骨关节炎大鼠模型的修复作用研究
周勇伟
章才华
李晓飞
蔡迅梓
《中国临床解剖学杂志》
CSCD
北大核心
2021
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
敲低IL-33下调炎症因子和NLRP3表达抑制哮喘小鼠炎症反应
林玛丽
李晓飞
曹丽梅
陈熙泼
徐丽丹
盛放
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024
1
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