期刊文献+
共找到4篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
TRAIL基因修饰联合阿霉素对大肠癌细胞株RKO作用的研究 被引量:1
1
作者 何超 梁建华 +2 位作者 胡晓彤 劳伟峰 陈萍 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2004年第2期119-123,共5页
目的:探讨肿瘤坏死因子(tumor necrsis factor,TNF)相关的凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)基因联合阿霉素后,应用于人大肠癌细胞株RKO基因治疗的实验研究。方法:将重组腺病毒载体(Ad)介导的TRAIL基因作用于... 目的:探讨肿瘤坏死因子(tumor necrsis factor,TNF)相关的凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)基因联合阿霉素后,应用于人大肠癌细胞株RKO基因治疗的实验研究。方法:将重组腺病毒载体(Ad)介导的TRAIL基因作用于大肠癌细胞株RKO,并联合低剂量的阿霉素协同作用。通过MTT比色法与流式细胞仪研究分析其对RKO细胞的作用效果,并以RT—PCR检测联合应用阿霉素前后TRAIL基因的表达水平。结果:病毒载体对RKO细胞的生长有轻微的抑制作用,作用4 d抑制率为11.9%,但不增加RKO细胞的凋亡率。TRAIL对RKO细胞的生长抑制率及凋亡诱导率分别为50.1%和19.8%。联合阿霉素后,TRAIL对RKO细胞株的生长抑制率及凋亡率均有显著的增强作用,分别达60.3%及49.0%。RT-PCR结果提示联合应用阿霉素后,TRAIL基因的表达并未增强。结论:TRAIL能有效抑制RKO的生长,联合阿霉素后,其对RKO的生长抑制作用及凋亡诱导作用均明显增强。阿霉素不是通过增加TRAIL基因的表达来实现上述作用的。 展开更多
关键词 TRAIL 结直肠肿瘤 基因治疗 阿霉素
在线阅读 下载PDF
(His)_6-eIF3s4融合蛋白在人乳腺癌细胞Bcap37中的表达 被引量:2
2
作者 魏群 朱逢佳 +3 位作者 王以 陈萍 王林波 曹江 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期627-629,632,共4页
目的:构建真核细胞翻译起始因子3第4亚单位(eIF3s4)真核表达载体用于进一步功能研究。方法:设计引物,以K562细胞的总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增eIF3s4的全长编码区cDNA,克隆于pGEM-TEasy载体,经DNA测序并与GenBank数据库序列进行比对... 目的:构建真核细胞翻译起始因子3第4亚单位(eIF3s4)真核表达载体用于进一步功能研究。方法:设计引物,以K562细胞的总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增eIF3s4的全长编码区cDNA,克隆于pGEM-TEasy载体,经DNA测序并与GenBank数据库序列进行比对后,将该cDNA序列亚克隆于真核表达载体pcDNA4/HisMaxB载体,构建成(His)6-eIF3s4融合蛋白的表达载体,用LipofectamineTM2000瞬时转染人乳腺癌细胞株Bcap37,利用Westernblot方法检测(His)6-eIF3s4融合蛋白的表达。结果:DNA序列测定表明,利用RT-PCR方法克隆的eIF3s4全长编码区cDNA序列与GenBank数据库序列一致,Westernblot结果证实(His)6-eIF3s4融合蛋白在Bcap37细胞中获得预期表达。结论:成功地构建了eIF3s4的真核表达载体并在人乳腺癌细胞Bcap37中表达,为建立稳定的eIF3s4高表达细胞系,进而研究eIF3s4与肿瘤细胞多药耐药相关性打下了基础。 展开更多
关键词 真核翻译起始因子 克隆 融合蛋白
在线阅读 下载PDF
抗氧化剂和NF-κB对大肠癌细胞IL-8表达的作用及机制 被引量:1
3
作者 周文鹏 吴金民 +6 位作者 张行 潘宏铭 方勇 曹厚军 王宏 张俊平 张在云 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期1779-1782,共4页
目的:探讨NF-κB在大肠癌细胞IL-8诱导表达中的作用及抗氧化剂对大肠癌细胞IL-8诱导表达的影响及其机制。方法:IL-8mRNA表达采用逆转录/聚合酶链反应(RT/PCR)检测,培养上清IL-8蛋白含量用ELISA检测,EMSA法测定细胞核内NF-κB结合活性。... 目的:探讨NF-κB在大肠癌细胞IL-8诱导表达中的作用及抗氧化剂对大肠癌细胞IL-8诱导表达的影响及其机制。方法:IL-8mRNA表达采用逆转录/聚合酶链反应(RT/PCR)检测,培养上清IL-8蛋白含量用ELISA检测,EMSA法测定细胞核内NF-κB结合活性。结果:抗氧化剂可阻断大肠癌细胞培养体系TNF-α诱导的IL-8生成及IL-8mRNA的表达,TNF-α可诱导大肠癌细胞NF-κB的激活并被抗氧化剂阻断。结论:TNF-α诱导的大肠癌细胞IL-8基因和蛋白表达依赖于NF-κB的激活;抗氧化剂可通过抑制NF-κB的活化而阻断IL-8基因和蛋白的诱导表达。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 白细胞介素-8 NF-ΚB 二硫氨基甲酸吡啶
在线阅读 下载PDF
HAI-1基因不同功能域的原核表达载体构建及融合蛋白表达
4
作者 曾蕾 曹江 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期174-177,共4页
目的:分段克隆1型肝细胞生长因子激活剂抑制因子(HAI-1)基因的功能域并在大肠杆菌中表达,为进一步研究HAI-1的生物学功能打下基础。方法:针对HAI-1的不同功能域设计相应的5对引物,分别扩增KD1、KD1+LDLR、KD2、LDLR+KD2和KD1+LDLR+KD2... 目的:分段克隆1型肝细胞生长因子激活剂抑制因子(HAI-1)基因的功能域并在大肠杆菌中表达,为进一步研究HAI-1的生物学功能打下基础。方法:针对HAI-1的不同功能域设计相应的5对引物,分别扩增KD1、KD1+LDLR、KD2、LDLR+KD2和KD1+LDLR+KD2片段。将PCR产物克隆至pGEM-TEasy载体中并经测序鉴定。将5个cDNA片段亚克隆至具有6个组氨酸标签(His-Tag)的原核表达载体pIVEX2.3-MCS中。以上述表达不同功能域的载体转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,用IPTG诱导融合蛋白的表达,表达产物以Westernblot进行鉴定,并进一步通过镍亲和层析柱纯化His-Tag标记的KD1+LDLR+KD2融合蛋白。结果:成功地构建了HAI-1各功能域基因片段的原核表达载体。Westernblot分析证实,在大肠杆菌BL21(DE3)中分段表达了5种HAI-1不同功能域的His-Tag融合蛋白,并通过亲和层析法纯化到了相对分子质量为22200的KD1+LDLR+KD2融合蛋白。结论:重组质粒pIVEX2.3-MCS/HAI-1能在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,纯化的融合蛋白可用于研究HAI-1不同功能域的生物学作用。 展开更多
关键词 1型肝细胞生长因子激活剂抑制因子 克隆 原核表达 融合蛋白
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部