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基于微流控光固化技术制备丝素蛋白/透明质酸复合微球水凝胶
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作者 王如月 陈韫陆 +3 位作者 吴琛琦 李舒婧 刘震杰 陈枫 《浙江大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第4期434-445,共12页
目的:以透明质酸和丝素蛋白为原料开发兼具强韧性和可注射性的复合微球水凝胶生物材料。方法:对透明质酸进行双键化改性、丝素蛋白进行巯基化改性构建前驱体溶液;采用微流控技术制备尺寸均一微液滴,通过420 nm紫外光诱导巯基-烯点击聚... 目的:以透明质酸和丝素蛋白为原料开发兼具强韧性和可注射性的复合微球水凝胶生物材料。方法:对透明质酸进行双键化改性、丝素蛋白进行巯基化改性构建前驱体溶液;采用微流控技术制备尺寸均一微液滴,通过420 nm紫外光诱导巯基-烯点击聚合固化微球;将固化微球与水凝胶预聚液复合形成可注射的巯基化丝素蛋白(TSF)/甲基丙烯酰化透明质酸(HAMA)复合微球水凝胶。使用氢-1核磁共振波谱法表征TSF和HAMA的接枝率;光学显微镜观察微球水凝胶在大豆油中的粒径分布;高级拓展流变仪测定复合微球水凝胶的凝胶点;扫描电镜观察微球水凝胶的微观形貌;X射线能谱仪检测微球水凝胶的元素分布;倒置共聚焦显微镜观察复合微球水凝胶体系的可协调性;压缩测试评估复合微球水凝胶的力学性能;称重法测定复合微球水凝胶的溶胀率、降解率和保水率。钙黄绿素AM/碘化丙啶双染色法和CCK-8法评估细胞毒性、划痕实验观察细胞迁移能力。结果:HAMA和TSF的接枝率分别为48.03%和17.99%,并制备了粒径分别为(43.3±1.2)、(78.1±3.0)和(130.8±1.9)μm的微球水凝胶。复合微球水凝胶的凝胶点时间为48~115 s,具有动态调控特性,压缩强度可达22.7 kPa,且在40%压缩应变下循环20次无破损;在模拟生理环境中呈现差异化脱溶胀行为,减小微球粒径可明显提升其在湿润环境中的稳定性,经200 h降解后,复合微球水凝胶降解率为(49.1±0.9)%,96 h保水率维持在40%~60%。复合微球水凝胶组对细胞生长不产生明显影响。结论:TSF/HAMA复合微球水凝胶具有快速光固化特性、可调力学性能、稳定性以及良好生物安全性和生物相容性,可作为组织修复和再生医学的新型材料。 展开更多
关键词 微球水凝胶 硫基-烯点击化学反应 微流控 光固化 丝素蛋白 透明质酸 理化特征 生物相容性
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遗传性易栓症筛查及相关基因检测分析 被引量:4
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作者 尹黎 李歌 +1 位作者 沈健 刘震杰 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期606-611,共6页
目的:检测和分析遗传性易栓症的相关基因及其突变位点,为中国人群遗传性易栓症患者的基因突变特点积累资料。方法:对2015年6月至2017年12月在浙江大学医学院附属第二医院就诊的遗传性易栓症疑似患者25例进行血清蛋白C、蛋白S,抗凝因子... 目的:检测和分析遗传性易栓症的相关基因及其突变位点,为中国人群遗传性易栓症患者的基因突变特点积累资料。方法:对2015年6月至2017年12月在浙江大学医学院附属第二医院就诊的遗传性易栓症疑似患者25例进行血清蛋白C、蛋白S,抗凝因子相关基因蛋白C(基因名PROC)、蛋白S(基因名PROS1)和抗凝血酶Ⅲ(基因名SERPINC1),凝血因子相关基因凝血因子Ⅴ(基因名F5)、凝血因子Ⅱ(基因名F2)、凝血因子Ⅷ(基因名F8)、高型半胱氨酸血症相关因子(CBS、MTHFR)第二代测序分析。利用千人基因组数据库、ESP6500数据库、Genoma数据库、HGMD突变数据库比对突变位点,根据SIFT、Polyphen、MutationTaster、CADD数据库预测突变位点的致病性。结果:25例患者中,发现抗凝因子相关基因PROC突变患者8例,PROS1突变患者2例,SERPINC1突变患者3例;凝血相关基因F5突变1例,F2突变1例,F8突变1例,CBS突变2例,MTHFR突变1例。结论:应用第二代基因测序分析有助于诊断遗传性易栓症相关静脉血栓,指导精准治疗。 展开更多
关键词 静脉血栓形成/遗传学 血栓形成倾向/遗传学 血液凝固 抗凝血酶类 基因 突变
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基于巯基-烯点击化学制备丝素蛋白/透明质酸复合水凝胶 被引量:2
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作者 陈蕾丹 钟明强 +4 位作者 陈锦仪 刘震杰 况太荣 刘通 陈枫 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期285-295,共11页
目的:以丝素蛋白和透明质酸为原料设计并制备医用天然聚合物水凝胶。方法:对丝素蛋白和透明质酸进行巯基化及双键化改性,在紫外光条件下,利用巯基-烯点击聚合快速固化成胶。通过氢-1核磁共振波谱法表征改性丝素蛋白及透明质酸的接枝率;... 目的:以丝素蛋白和透明质酸为原料设计并制备医用天然聚合物水凝胶。方法:对丝素蛋白和透明质酸进行巯基化及双键化改性,在紫外光条件下,利用巯基-烯点击聚合快速固化成胶。通过氢-1核磁共振波谱法表征改性丝素蛋白及透明质酸的接枝率;流变学测试表征水凝胶的凝胶点;扫描电镜观察水凝胶的内部微观结构;压缩测试表征力学性能;质量法测定溶胀率及降解率;将水凝胶与细胞共培养,通过乳酸脱氢酶法测定细胞毒性,漂浮计数法测定细胞黏附性并用扫描电镜及荧光显微镜观察凝胶表面的细胞生长与分化状况。结果:改性后的丝素蛋白和透明质酸的官能团取代度分别为17.99%和48.03%。制备所得的丝素蛋白/透明质酸复合水凝胶的凝胶点为40~60 s,凝胶内部具有孔状结构,压缩强度达450 kPa且循环十次不破裂。复合水凝胶可吸收自身质量4倍甚至10倍的水。水凝胶可生物降解,35 d后的降解率达28%~42%。复合水凝胶的细胞毒性较弱,细胞黏附性较好,细胞在凝胶表面生长和分化状况良好。结论:光固化丝素蛋白/透明质酸复合水凝胶能快速成胶、力学性能优异、生物相容性好,具有可调的溶胀率及降解度,在生物医学上具有一定的应用潜力。 展开更多
关键词 丝素蛋白 透明质酸 巯基-烯点击化学 光固化 水凝胶 生物相容性
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