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穿山龙醇提取物对高尿酸血症小鼠的治疗作用 被引量:10
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作者 单海丽 单瑞平 傅旭春 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期49-53,共5页
目的:研究穿山龙醇提取物对高尿酸血症小鼠的降血尿酸作用。方法:分别用次黄嘌呤灌胃同时皮下注射氧嗪酸钾(模型A)和皮下注射尿酸(模型B)的方法建立两种小鼠高尿酸血症模型,并用穿山龙醇提取物干预两种模型,评估其降尿酸的效果... 目的:研究穿山龙醇提取物对高尿酸血症小鼠的降血尿酸作用。方法:分别用次黄嘌呤灌胃同时皮下注射氧嗪酸钾(模型A)和皮下注射尿酸(模型B)的方法建立两种小鼠高尿酸血症模型,并用穿山龙醇提取物干预两种模型,评估其降尿酸的效果。用高效液相色谱法测定血尿酸含量。结果:对于次黄嘌呤和氧嗪酸钾诱导的小鼠高尿酸血症模型,模型A组、空白对照组和穿山龙醇提取物组的血尿酸水平分别为(40.03±27.24)、(4.08±1.47)和(18.10±8.87) g/mL,穿山龙醇提取物组与模型组比较差异有统计学意义( P<0.05);对于尿酸诱导的小鼠高尿酸血症模型,模型B组、空白对照组和穿山龙醇提取物组的血尿酸水平分别为(18.57±3.83)、(4.29±2.36)和(15.36±2.71)g/mL,穿山龙醇提取物组与模型组比较差异有统计学意义( P<0.05)。结论:对于上述两种高尿酸血症动物模型,穿山龙醇提取物组均有显著的降血尿酸作用。 展开更多
关键词 穿山龙/治疗应用 中草药提取物 高尿酸血症/药物疗法 次黄嘌呤 尿酸 疾病模型 动物
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稳定转染H_3受体基因的HEK293细胞株的鉴定及新型非咪唑类H_3受体拮抗剂的筛选
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作者 何萍 谭丽 +3 位作者 胡薇薇 戴海斌 胡永洲 陈忠 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期276-282,共7页
目的:鉴定转染大鼠组胺H3受体基因的HEK293细胞株受体表达情况,筛选具有H3受体拮抗活性的新型非咪唑类化合物。方法:利用RT-PCR和免疫印迹的方法检测转染细胞株组胺H3受体的表达,以阳性刺激物forskolin诱导细胞内cAMP含量升高为指标,初... 目的:鉴定转染大鼠组胺H3受体基因的HEK293细胞株受体表达情况,筛选具有H3受体拮抗活性的新型非咪唑类化合物。方法:利用RT-PCR和免疫印迹的方法检测转染细胞株组胺H3受体的表达,以阳性刺激物forskolin诱导细胞内cAMP含量升高为指标,初步筛选具有拮抗作用的化合物。结果:细胞鉴定结果显示,稳定转染H3受体基因的HEK293细胞株高表达大鼠H3受体。H3受体选择性激动剂(R)-α-甲基组胺可浓度依赖性抑制阳性刺激物forskolin(10μmol/L)诱导的cAMP含量升高(P<0.05),当(R)-α-甲基组胺浓度达到30 nmol/L时,抑制率接近平台值(P>0.05)。而H3受体拮抗剂噻普酰胺和新合成的非咪唑类化合物XHA23及XHA25则能够浓度依赖性阻断(R)-α-甲基组胺对forskolin诱导的cAMP含量升高的抑制作用(P<0.05),IC50分别为3.62μmol/L、0.49μmol/L、0.14μmol/L。结论:高表达H3受体的HEK293细胞株可用于有H3受体拮抗活性化合物的筛选,而非咪唑类化合物XHA23和XHA25具有一定的H3受体拮抗剂样活性。 展开更多
关键词 环AMP 受体 组胺H3 组胺H3拮抗剂 咪唑类 转染 基因 基因表达 逆转录聚合酶链反应 免疫印迹法
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基于光镜表型的促神经元亚型分化药物初筛法 被引量:2
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作者 高益宁 王丹音 +4 位作者 潘宗富 梅宇钦 王志强 朱丹雁 楼宜嘉 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期373-380,共8页
目的:建立基于光镜表型的促胚胎干(embryonic stem,ES)细胞神经元亚型分化药物筛选法,供早期发现促神经再生药初筛用。方法:采用悬滴培养4-/4+法,形成拟胚体,继而贴壁培养向神经细胞分化,光镜确认表型呈神经元样的基础上进一步评价各类... 目的:建立基于光镜表型的促胚胎干(embryonic stem,ES)细胞神经元亚型分化药物筛选法,供早期发现促神经再生药初筛用。方法:采用悬滴培养4-/4+法,形成拟胚体,继而贴壁培养向神经细胞分化,光镜确认表型呈神经元样的基础上进一步评价各类亚型。以10-7mol/L异补骨脂甲素(Isobavachin,IBA)和10-6mol/L淫羊藿苷(Icariin,ICA)为例,分化终点以光镜下轴突为胞体三倍长以上者为神经元样细胞,继续以免疫荧光成像法确认神经元(β-tubulinⅢ阳染),并进一步以特异性抗体(ChAT、GABA)阳染共定位鉴别相应神经元亚型。结果:基于光镜表型评价,在分化终点即可剔除轴突分化不全的细胞,取代了以往免疫荧光成像所需的人力、物力与时间;并避免进一步ELISA或流式细胞术评价的假阳性。光镜显示IBA处理者大部分显示神经元样表型,而ICA处理的细胞却不然,免疫荧光成像结果与此相一致。因此,仅对IBA处理的神经元做亚型鉴定,显示胆碱能神经元以及γ-氨基丁酸能神经元亚型。结论:基于光镜表型的促神经元分化初筛法在化合物促神经元亚型分化上具有简便易行、节约物力与时间,避免假阳性的独到之处;经该法初筛后供后续研究,可见IBA具有促胆碱能和γ-氨基丁酸能神经元分化活性。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 神经元/细胞学 神经元表型 异补骨脂甲素 淫羊藿苷 乙酰胆碱能神经元 Γ-氨基丁酸能神经元
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葡萄籽原花青素对氯化钴诱导的视网膜神经节细胞RGC-5缺氧损伤的保护作用 被引量:3
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作者 林卡娜 林美丽 魏尔清 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期24-29,共6页
目的:探讨体外葡萄籽原花青素对氯化钴致视网膜神经节细胞RGC-5缺氧损伤模型的保护作用。方法:采用氯化钴(400μmol/L)诱导RGC-5细胞化学缺氧损伤,观察葡萄籽原花青素(40μg/mL )对缺氧的抗损伤作用。以MTT法检测细胞存活率... 目的:探讨体外葡萄籽原花青素对氯化钴致视网膜神经节细胞RGC-5缺氧损伤模型的保护作用。方法:采用氯化钴(400μmol/L)诱导RGC-5细胞化学缺氧损伤,观察葡萄籽原花青素(40μg/mL )对缺氧的抗损伤作用。以MTT法检测细胞存活率;Hoechst 33342荧光染色法观察细胞凋亡情况;以H2 DCFDA荧光法检测细胞内活性氧的变化;实时定量PCR检测细胞Bcl-2、半胱酰胺天冬氨酸蛋白酶( caspase )9和caspase 3 mRNA水平。结果:与缺氧对照组比较,葡萄籽原花青素预处理可提高细胞存活率( P<0.001)、减少细胞凋亡( P<0.001) ,并减少细胞内的活性氧( P <0.001);葡萄籽原花青素还显著升高 Bcl-2基因的表达( P <0.001) ,显著降低caspase 9和caspase 3基因的表达( P<0.001)。结论:葡萄籽原花青素对氯化钴诱导的视网膜神经节RGC-5细胞缺氧损伤起保护作用,其保护作用可能与细胞内活性氧减少、Bcl-2基因表达上调及casepase 9和casepase 3基因表达下调有关。 展开更多
关键词 葡萄/化学 原花青素类/药理学 钴/药理学 视网膜神经节细胞/药物作用 缺氧/治疗
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微球改性生物材料表面的构建及其细胞相容性研究 被引量:1
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作者 王志宇 周丽娟 楼伟建 《中国生物医学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第4期305-310,共6页
本研究采用两亲共聚物PEO-PPO-PEO作为表面活性剂制备得到了较窄粒径分布范围的聚乳酸微球,然后将这些微球按不同分布密度结合到聚乳酸基材表面,制备得到不同表面微球分布密度的微球改性聚乳酸生物材料表面。激光共聚焦显微镜、扫描电... 本研究采用两亲共聚物PEO-PPO-PEO作为表面活性剂制备得到了较窄粒径分布范围的聚乳酸微球,然后将这些微球按不同分布密度结合到聚乳酸基材表面,制备得到不同表面微球分布密度的微球改性聚乳酸生物材料表面。激光共聚焦显微镜、扫描电镜对改性表面的稳定和表面形貌的测试结果显示,该方法成功地获得了稳定的、具有不同表面微球分布密度的微球改性聚乳酸表面;软骨细胞相容性测试结果表明不同表面微球分布密度的微球改性聚乳酸膜片具有不同的细胞相容性,表面拓扑结构能在较在程度上对材料表面的细胞相容性产生影响。 展开更多
关键词 聚乳酸微球 微球改性聚乳酸表面 表面拓扑结构 细胞相容性
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G蛋白偶联受体17在视网膜神经节细胞缺氧损伤中的作用
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作者 林卡娜 林美丽 +2 位作者 顾莹芬 张顺国 黄诗颖 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期487-492,共6页
目的:探讨G蛋白偶联受体17(GPR17)在视网膜神经节细胞缺氧损伤中的作用。方法:采用氯化钴(400μmol/L)诱导RGC-5细胞化学缺氧损伤,观察GPR17的表达及GPR17配体的作用,并通过小干扰RNA(siRNA)降低GPR17的表达深入研究GPR17在细胞缺氧损... 目的:探讨G蛋白偶联受体17(GPR17)在视网膜神经节细胞缺氧损伤中的作用。方法:采用氯化钴(400μmol/L)诱导RGC-5细胞化学缺氧损伤,观察GPR17的表达及GPR17配体的作用,并通过小干扰RNA(siRNA)降低GPR17的表达深入研究GPR17在细胞缺氧损伤中的作用。MTT法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率; RT-PCR法检测GPR17 mRNA相对表达量。结果:氯化钴处理后,细胞中GPR17 mRNA相对表达量由0.26±0.08上调至0.36±0.05(P<0.01)。与未经GPR17配体预处理的缺氧细胞比较,GPR17激动剂尿苷5'-二磷酸二钠盐、尿苷5'-二磷酸葡萄糖二钠盐、LTD4预处理细胞的存活率分别降低了29.6%、31.8%、33.9%(均P<0.01);而其拮抗剂坎格雷洛预处理细胞的存活率升高了33.2%(P<0.01)。GPR17 siRNA处理可以抑制缺氧导致的GPR17 mRNA表达上调(P<0.01),减少缺氧导致的细胞凋亡[未加siRNA、NC siRNA和GPR17siRNA组细胞的凋亡率分别为(39.73±2.06)%,(42.50±3.64)%和(24.98±2.16)%,P<0.01]。结论:GPR17介导了RGC-5细胞的缺氧损伤,抑制GPR17表达可减轻缺氧损伤。 展开更多
关键词 受体 G-蛋白偶联/拮抗剂和抑制剂 钴/药理学 视网膜神经节细胞/药物作用 细胞系 缺氧/药物疗法 细胞凋亡 细胞 培养的
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