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题名人脑胶质瘤特异抗原肽白介素13α2受体的原核表达
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作者
俞文桥
陈作兵
张匀
梁忠炎
张绍阳
郑伟明
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机构
浙江大学医学院附属第一医院急诊外科
温州医学院附属第一医院神经外科
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出处
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第9期488-491,共4页
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文摘
目的:构建白介素13 α2受体(Interleukin-13α2 Receptor,IL-13Rα2)基因的表达质粒,并检测其在体外原核表达情况,为脑胶质瘤的免疫治疗奠定基础。方法:用RT-PCR技术从U251胶质瘤细胞株扩增IL-13Rα2基因,并与克隆质粒pMDl9 Simple T载体连接转入DH5α菌克隆,筛选重组阳性菌落,用Xhol和HindⅢ将目的基因从克隆质粒上切下并与同样双酶切后的表达质粒pET-28a连接,转入BL21(DE3)菌,提取重组质粒进行酶切及测序鉴定正确后,在IPTG诱导下原核表达IL-13R α2抗原肽,并利用镍柱进行纯化回收,SDS-PACE检测表达蛋白。结果:成功扩增出IL-13Rα2基因序列,大小为1142 bp,并表达纯化出IL-13Rα2抗原肽,大小为60 kD,于诱导第3 h表达量最高,以包涵体形式表达。结论:IL-13Rα2基因表达质粒能在体外成功构建,并能在IPTG诱导下成功表达及纯化得到IL-13Rα2抗原肽。
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关键词
胶质瘤
IL-13RΑ2
抗原肽
表达质粒
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Keywords
Gliomas
IL-13Rα2 antigen
Expression plasmid
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分类号
R739.41
[医药卫生—肿瘤]
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