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4株产TEM型超广谱β内酰胺酶肠杆菌科细菌的研究 被引量:8
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作者 李家斌 李惠 +3 位作者 李旭 余鑫之 马亦林 俞云松 《中国抗感染化疗杂志》 2004年第6期324-327,共4页
目的 :鉴定临床分离的 3株大肠埃希菌和 1株肺炎克雷伯菌所产的TEM型 β内酰胺酶编码基因的序列 ,并进行原核表达 ,了解其相关特性。方法 :聚合酶链反应 (PCR)扩增TEM型β内酰胺酶编码基因片段 ,克隆入 pGEM Teasy载体 ,表达于感受态细... 目的 :鉴定临床分离的 3株大肠埃希菌和 1株肺炎克雷伯菌所产的TEM型 β内酰胺酶编码基因的序列 ,并进行原核表达 ,了解其相关特性。方法 :聚合酶链反应 (PCR)扩增TEM型β内酰胺酶编码基因片段 ,克隆入 pGEM Teasy载体 ,表达于感受态细胞大肠埃希菌DH5α中 ,双脱氧链终止法测定核苷酸序列 ,确定基因型 ;其基因与原核表达载体 (pET 2 8c)连接 ,并在感受态细胞大肠埃希菌DH5α中进行原核表达 ,提取质粒 ,用PCR进行表达鉴定 ,用超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs)表型确认试验鉴定表达菌株的表型 ,另外对这些临床菌株进行接合试验。结果 :PCR扩增结果显示这 4株细菌产生的TEM型β内酰胺酶编码基因片段含 981个核苷酸 ,其表达酶的性质均为ESBLs,临床菌株的质粒接合试验均为阳性。这 4株临床菌株所产生的TEM型 β内酰胺酶的编码基因已被GenBank命名为TEM 10 (GenBank注册号 :U95 36 3)。 结论 :安徽地区这 4株细菌所产TEM型 β内酰胺酶均为TEM 10 ,在国内我们首次从临床分离株中发现TEM 10。 展开更多
关键词 超广谱Β内酰胺酶 序列分析 接合试验 原核表达
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TEM-105编码基因的功能研究 被引量:6
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作者 李家斌 李旭 +1 位作者 马亦林 俞云松 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期162-165,共4页
目的 获得浙江地区临床分离的 4株肺炎克雷伯菌所产的TEM型β 内酰胺酶编码基因的序列,鉴定其基因型,并了解其相关特性。方法 PCR扩增TEM型β 内酰胺酶编码基因片段,克隆入pGEM Teasy载体,表达于感受态细胞大肠埃希菌DH5α中,双脱氧... 目的 获得浙江地区临床分离的 4株肺炎克雷伯菌所产的TEM型β 内酰胺酶编码基因的序列,鉴定其基因型,并了解其相关特性。方法 PCR扩增TEM型β 内酰胺酶编码基因片段,克隆入pGEM Teasy载体,表达于感受态细胞大肠埃希菌DH5α中,双脱氧链终止法测定核苷酸序列,确定基因型;其基因与原核表达载体 (pET 28c)连接,并在感受态细胞大肠埃希菌DH5α中进行原核表达,提取质粒,用PCR进行表达鉴定,用等电聚焦电泳测定原核表达菌株中酶的等电点(pIs),用ESBLs表型确认试验鉴定表达菌株的表型,另外对这些临床菌株进行接合试验。结果 PCR扩增结果显示这 4株细菌产生的TEM型β 内酰胺酶编码基因片段含1 009个核苷酸,其表达酶的性质均为非ESBLs,pIs均为5 4,临床菌株的质粒接合试验均为阳性。这 4株临床菌株所产生的TEM型β 内酰胺酶的编码基因已被GenBank命名为TEM 105(GenBank注册号:AF516720)。结论 浙江地区这 4株细菌所产TEM型β 内酰胺酶均为TEM 105,在世界上我们首次从临床分离株中发现TEM 105。 展开更多
关键词 编码基因 Β-内酰胺酶 原核表达 临床 DH5Α ESBL 大肠埃希菌 感受态细胞 功能研究 菌株
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重型肝炎的治疗 被引量:17
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作者 刘克洲 吴仲文 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2003年第6期323-326,共4页
关键词 重型肝炎 治疗 肝细胞坏死 黄疸 肝性脑病
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复方甘草酸苷联合膦甲酸钠治疗YMDD变异慢性乙型肝炎患者30例 被引量:5
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作者 郑临 杨益大 +1 位作者 林志强 盛吉芳 《医药导报》 CAS 2005年第10期913-914,共2页
目的观察复方甘草酸苷联合膦甲酸钠治疗YMDD变异慢性乙型肝炎的疗效。方法YMDD变异慢性乙型肝炎患者60例,分为治疗组和对照组各30例。治疗组给予复方甘草酸苷注射液100 mL,加入10%葡萄糖注射液500 mL中静脉滴注,qd,同时联用膦甲酸钠注射... 目的观察复方甘草酸苷联合膦甲酸钠治疗YMDD变异慢性乙型肝炎的疗效。方法YMDD变异慢性乙型肝炎患者60例,分为治疗组和对照组各30例。治疗组给予复方甘草酸苷注射液100 mL,加入10%葡萄糖注射液500 mL中静脉滴注,qd,同时联用膦甲酸钠注射液250 mL,b id,疗程为4周。疗程结束后继续服用复方甘草酸苷片2片,tid,至16周。对照组在使用膦甲酸钠注射液基础上给予甘草酸二铵30 mL,静脉滴注,qd,共4周,继用甘草酸二铵胶囊3粒,tid,至16周。结果治疗组肝功能改善较对照组明显(P<0.05)。治疗组4,16周HBV-DNA阴转率分别为36.7%和53.3%,对照组分别为16.7%和20.0%,两组比较差异均有显著性(P<0.05)。治疗组显著提高辅助性T细胞(CD4+)和CD4+/CD8+比例。结论复方甘草酸苷联合膦甲酸钠治疗YMDD变异慢性乙型肝炎具有很好的疗效。 展开更多
关键词 甘草酸苷 复方 膦甲酸钠 YMDD变异 肺炎 乙型 慢性
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HIV Tat蛋白与单核细胞表达辅助受体CCR5和感染HIV病毒相互关系的研究
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作者 杨益大 郑临 +2 位作者 吕国才 陈亚岗 Maria Salvato 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2004年第6期532-534,545,共4页
目的 :研究 HIV Tat蛋白对单核细胞表达 HIV辅助受体 CCR5的影响 ,并观察 Tat蛋白对单核细胞感染嗜单核细胞 HIVBa-L病毒的影响。方法 :以流式细胞仪方法测定单核细胞表面表达的 CCR5 ,单核细胞表达分泌的HIV gag p2 4蛋白由 ELISA方法... 目的 :研究 HIV Tat蛋白对单核细胞表达 HIV辅助受体 CCR5的影响 ,并观察 Tat蛋白对单核细胞感染嗜单核细胞 HIVBa-L病毒的影响。方法 :以流式细胞仪方法测定单核细胞表面表达的 CCR5 ,单核细胞表达分泌的HIV gag p2 4蛋白由 ELISA方法检测。结果 :HIV Tat蛋白能增加单核细胞表达 CCR5 ,此作用能被多克隆 Tat蛋白抗体所抑制 ;同时 HIV Tat蛋白能明显增加嗜单核细胞 HIV病毒 (HIVBa-L)感染单核细胞 ,表现为 HIV gag p2 4蛋白表达明显增加。结论 :HIV Tat蛋白增加单核细胞表面 CCR5受体的表达 ,并增加 HIVBa-L感染单核细胞 ,表明HIV Tat蛋白在 HIV感染和发病中起着十分重要的作用。 展开更多
关键词 HIV TAT蛋白 辅助受体CCR5 单核细胞 感染
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