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新建体外受精实验室显微注射系统操作改进探究 被引量：2
1
作者 饶金鹏 邱枫 +2 位作者 蔡益婷 金帆 金敏 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2019年第9期82-86,共5页
针对新建成的体外受精实验室中显微注射操作系统不稳定,导致卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)卵膜刺破效果不佳或过程中损伤卵子纺锤体等问题,对连接了显微注射针的Eppendorf CellTram vario油压式手动显微注射仪的整体通道进行调整,提高... 针对新建成的体外受精实验室中显微注射操作系统不稳定,导致卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)卵膜刺破效果不佳或过程中损伤卵子纺锤体等问题,对连接了显微注射针的Eppendorf CellTram vario油压式手动显微注射仪的整体通道进行调整,提高卵子破膜及单精子注射的稳定性。通过增加显微注射仪管道内矿物油的更换频次并调节活塞相对位置,保证液压系统的通畅,通过控制显微注射针内介质从针尖至针尾依次为聚乙烯吡咯烷酮、培养油、空气、矿物油,保证针尖不污染、不堵塞,同时控制回吸、破膜、注射和退针的节奏,使ICSI操作得以顺利实施。经过分析及改进,ICSI后卵子退化率显著下降(P<0.05),而受精率、优质胚胎形成率以及临床妊娠率均有所提高。 展开更多
关键词 ICSI 显微注射针 显微注射仪 液压系统 临床妊娠率
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炎症因子在多囊卵巢综合征中作用的研究进展 被引量：22
2
作者 刘兰心 周承亮 +1 位作者 杨倩 黄荷凤 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期328-332,共5页
多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是育龄期女性最常见的内分泌疾病,其主要特征包括稀发排卵或无排卵、卵巢多囊样表现以及高雄激素血症及其引起的痤疮、多毛等症状。目前认为PCOS患者的体内处于一个长期的慢性炎症过程,... 多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是育龄期女性最常见的内分泌疾病,其主要特征包括稀发排卵或无排卵、卵巢多囊样表现以及高雄激素血症及其引起的痤疮、多毛等症状。目前认为PCOS患者的体内处于一个长期的慢性炎症过程,在外周血、颗粒细胞、卵泡液、卵巢组织、脂肪细胞和子宫内膜细胞中均发现炎症因子表达量的增高或炎症水平的升高。通过对炎症因子在PCOS发病中作用的研究,发现这些因子可能通过调控卵泡发育、雄激素水平等对临床结局产生影响。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 炎症 卵泡发育 雄激素 临床结局
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非编码RNA在多囊卵巢综合征中的作用研究进展 被引量：7
3
作者 杨倩 周承亮 +1 位作者 潘洁雪 黄荷凤 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期921-925,共5页
多囊卵巢综合征（PCOS）是一种常见的生殖系统疾病,影响着5%~10%育龄妇女的健康。尽管对其发病机制的研究不断深入,但其发病机制仍不明确。非编码RNA（ncRNA）指不翻译为蛋白的RNA,主要参与基因表达调控、表观遗传学调控等重要功能,近... 多囊卵巢综合征（PCOS）是一种常见的生殖系统疾病,影响着5%~10%育龄妇女的健康。尽管对其发病机制的研究不断深入,但其发病机制仍不明确。非编码RNA（ncRNA）指不翻译为蛋白的RNA,主要参与基因表达调控、表观遗传学调控等重要功能,近年来逐渐成为研究热点。研究发现多种ncRNA在PCOS患者的血清、卵泡液和颗粒细胞中表达量发生改变,并可能作为PCOS诊断的新靶点,这为PCOS发病机制的研究提供新思路。该文综述了近年来ncRNA在PCOS疾病发生发展中作用的研究进展。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 非编码RNA 微RNA 长链非编码RNA
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多囊卵巢综合征患者卵泡液外泌体的提取鉴定及其miRNAs的提取和检测 被引量：12
4
作者 杨倩 刘兰心 黄荷凤 《上海交通大学学报（医学版）》 CSCD 北大核心 2017年第8期1085-1089,共5页
目的·从多囊卵巢综合征患者卵泡液中分离提取外泌体并进行鉴定,明确卵泡液中外泌体的存在;从外泌体中分离提取miRNAs并检测其表达量。方法·利用膜亲和法提取卵泡液中外泌体,透射电镜观察大小和形态;利用流式细胞仪检测外泌体... 目的·从多囊卵巢综合征患者卵泡液中分离提取外泌体并进行鉴定,明确卵泡液中外泌体的存在;从外泌体中分离提取miRNAs并检测其表达量。方法·利用膜亲和法提取卵泡液中外泌体,透射电镜观察大小和形态;利用流式细胞仪检测外泌体蛋白标志物CD63和CD81的表达;提取纯化外泌体miRNAs,利用Taq Man探针real-time PCR检测miR-125b、miR-19b和miR-222的表达。结果·透射电镜下观察到卵泡液外泌体呈圆形或椭圆形,直径30~100 nm,有完整的膜结构,内含低密度物质;流式细胞仪检测外泌体CD63和CD81呈阳性表达。Real-time PCR检测到外泌体中miR-125b、miR-19b和miR-222的表达。结论·多囊卵巢综合征患者卵泡液中可以收集到外泌体,可以通过电子显微镜和流式细胞仪对卵泡液中的外泌体进行鉴定。卵泡液外泌体中含有miR-125b、miR-19b和miR-222。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 卵泡液 外泌体 生物标志物 鉴定 MIRNAS
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脂质体介导SV40LT基因转染构建羊水染色体核型分析质控细胞系研究 被引量：2
5
作者 翁炳焕 徐威 +4 位作者 苏岚 沈敏 李蓉 虞晓鹏 李兰娟 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期520-524,共5页
目的:研究羊水染色体核型分析质控细胞系的构建方法。方法:以T4DNA连接经BamHⅠ单酶切的SV40LTag-pcDNA和pcDNA3.1 (-) DNA,重组SV40LTag-pcDNA3.1(-)克隆,以脂质体介导法将重组克隆转染至染色体结构异常的羊水细胞,以G418筛选阳性克隆... 目的:研究羊水染色体核型分析质控细胞系的构建方法。方法:以T4DNA连接经BamHⅠ单酶切的SV40LTag-pcDNA和pcDNA3.1 (-) DNA,重组SV40LTag-pcDNA3.1(-)克隆,以脂质体介导法将重组克隆转染至染色体结构异常的羊水细胞,以G418筛选阳性克隆,观察细胞系的传代生长特性及其作为染色体核型分析质量评估的可行性。结果:构建了染色体核型为46,XY,t(8; 19)(q24.3;q13.1)的羊水细胞系,传至第15代的细胞系经染色体核型分析,其核型与原代细胞一致。结论:染色体结构异常的羊水细胞转染SV40LT基因后可转化为无限扩增且染色体核型稳定的细胞系,从而制成羊水细胞染色体核型分析的质控细胞系。 展开更多
关键词 猴病毒40/免疫学 猴病毒40/遗传学 脂质体 转染 羊水/细胞学 遗传载体 质量控制 细胞 培养的
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高龄孕妇外周血胎儿游离DNA产前筛查胎儿常见非整倍体的临床意义 被引量：9
6
作者 朱晖 苗正友 +4 位作者 钱叶青 李红阁 金晶磊 贺晶 董旻岳 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期256-261,共6页
目的:评估孕妇外周血胎儿游离DNA检测这一无创产前筛查(NIPS)技术在高龄孕妇产前筛查中的效率,并据此提出高龄孕妇产前筛查及诊断的优化策略。方法:以2015年2月至2016年9月在浙江大学医学院附属妇产科医院和嘉兴市妇幼保健院行NIPS并完... 目的:评估孕妇外周血胎儿游离DNA检测这一无创产前筛查(NIPS)技术在高龄孕妇产前筛查中的效率,并据此提出高龄孕妇产前筛查及诊断的优化策略。方法:以2015年2月至2016年9月在浙江大学医学院附属妇产科医院和嘉兴市妇幼保健院行NIPS并完成妊娠结局随访的10 584名高龄孕妇为研究对象,统计NIPS在高龄孕妇中检测胎儿常见染色体非整倍体的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值,并分析孕妇年龄与胎儿常见染色体非整倍体疾病的相关性。结果:NIPS检测高龄孕妇胎儿21三体的敏感度为100.00%、特异度为99.96%、阳性预测值为91.67%、阴性预测值为100.00%;检测18三体的敏感度为100.00%、特异度为99.93%、阳性预测值为68.18%、阴性预测值为100.00%;检测13三体的敏感度为100.00%、特异度为99.97%、阳性预测值为25.00%、阴性预测值为100.00%。胎儿21三体的高风险率和真阳性率随孕妇年龄的增长而升高(均P<0.01)。其中,35~37岁组与38~40岁组21三体的高风险率和真阳性率差异有统计学意义(均P<0.05);38~40岁组与41岁以上年龄组21三体的高风险率差异有统计学意义(P<0.05),但真阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:NIPS用于高龄孕妇的产前筛查具有良好的检测效率。对于预产期年龄38岁以下的孕妇,NIPS可作为优先选项;对于预产期年龄超过41岁的孕妇,建议选择介入性产前诊断;而对于预产期年龄为38~<41岁的孕妇,则可充分告知后酌情选择。 展开更多
关键词 孕妇/血液 DNA 新生儿筛查 母亲年龄 非整倍性 产前诊断 染色体畸变
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肠道菌群在多囊卵巢综合征发生和发展中的作用 被引量：9
7
作者 王尹瑜 刘晔 黄荷凤 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期454-457,共4页
多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是一种病因复杂的妇科内分泌疾病,严重影响女性的生育功能,其发病机制尚未明确。近年来,肠道菌群成为感染性、免疫性以及代谢性疾病的研究热点。同时,越来越多的研究证实肠道菌群能调控... 多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是一种病因复杂的妇科内分泌疾病,严重影响女性的生育功能,其发病机制尚未明确。近年来,肠道菌群成为感染性、免疫性以及代谢性疾病的研究热点。同时,越来越多的研究证实肠道菌群能调控胰岛素的合成与分泌,影响雄激素的代谢和卵泡发育。这为揭示PCOS的病因提供了新思路。因此,纠正肠道内环境、改善异常代谢活动的粪菌移植可能成为PCOS治疗的新手段。该文综述了肠道菌群在PCOS发生和发展中作用的研究进展。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 胰岛素抵抗 肠道菌群 粪菌移植
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经产妇发生妊娠期糖尿病的危险因素研究 被引量：7
8
作者 王尹瑜 刘晔 +2 位作者 刘含 董则含 黄荷凤 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期637-642,共6页
目的·探究经产妇发生妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)的危险因素。方法·选取2012年1月—2017年1月在国际和平妇幼保健院有连续2次分娩记录的经产妇。按照前次妊娠孕前年龄进行1:4配比,病例组116例,对照组46... 目的·探究经产妇发生妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)的危险因素。方法·选取2012年1月—2017年1月在国际和平妇幼保健院有连续2次分娩记录的经产妇。按照前次妊娠孕前年龄进行1:4配比,病例组116例,对照组464例。通过病史调取这些孕产妇的临床资料和口服糖耐量试验(oral glucose tolerance test,OGTT)、血脂等生化指标。通过多因素回归分析计算校正比值比(odds ratio,OR)和95%CI,找出经产妇发生GDM的危险因素。结果·相比对照组,病例组孕产妇2次妊娠孕前体质量指数(BMI)增加(校正OR=1.35,95%CI为1.07～1.69),前次妊娠OGTT 1 h血糖(校正OR=1.99,95%CI为1.55～2.55)和2 h血糖(校正OR=2.02,95%CI为1.51～2.70)越高,以及本次妊娠孕早期空腹血糖(校正OR=1.96,95%CI为1.16～3.32)、总胆固醇(校正OR=1.37,95%CI为1.06～1.77)和三酰甘油(校正OR=1.53,95%CI为1.10～2.14)越高,发生GDM的风险越大。结论·2次妊娠间BMI增加,以及血糖和血脂持续性增长是引起经产妇GDM发生的危险因素。 展开更多
关键词 经产妇 妊娠期糖尿病 危险因素 生化指标 病例对照研究
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