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非亲缘异基因脐带血造血干细胞移植治疗儿童白血病二例 被引量:1
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作者 汤永民 宋华 +8 位作者 杨世隆 石淑文 魏健 陈英虎 张玲燕 陈文君 陆亚红 沈红强 钱柏芹 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2007年第6期626-628,共3页
关键词 脐带血造血干细胞移植 造血干细胞移植治疗 异基因骨髓 儿童白血病 外周血造血干细胞移植 非亲缘 自体造血干细胞移植 血液系统恶性肿瘤
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拉布立海治疗肿瘤溶解综合征相关高尿酸血症临床进展 被引量:2
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作者 张晶樱 汤永民 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2020年第4期239-241,245,共4页
肿瘤溶解综合征(tumor lysis syndrome,TLS)是最常见的肿瘤急症之一,在临床上表现为以高尿酸、高钾、高磷、低钙血症为主的代谢紊乱[1]。高尿酸血症所致急性肾损伤代表了TLS最严重的结果,因此,纠正高尿酸血症对于防治TLS至关重要。别嘌... 肿瘤溶解综合征(tumor lysis syndrome,TLS)是最常见的肿瘤急症之一,在临床上表现为以高尿酸、高钾、高磷、低钙血症为主的代谢紊乱[1]。高尿酸血症所致急性肾损伤代表了TLS最严重的结果,因此,纠正高尿酸血症对于防治TLS至关重要。别嘌呤醇是传统的抗尿酸药物,通过抑制黄嘌呤氧化酶,阻止次黄嘌呤转换为黄嘌呤、阻止黄嘌呤生成尿酸;但不能减少已经生成的尿酸,故对于高尿酸血症,别嘌呤醇只能有一部分的预防作用而无治疗作用,限制了其在TLS防治中的广泛使用[2]。 展开更多
关键词 急性肾损伤 肿瘤溶解综合征 高尿酸血症 临床进展 黄嘌呤氧化酶 别嘌呤醇 低钙血症 次黄嘌呤
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儿童非霍奇金淋巴瘤的免疫治疗进展 被引量:1
3
作者 汤永民 冯建华 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2009年第1期4-7,28,共5页
关键词 儿童非霍奇金淋巴瘤 免疫治疗 BURKITT 淋巴母细胞型 NHL 淋巴细胞型 临床特点 放射治疗
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儿童白血病干细胞的研究进展
4
作者 汤永民 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2010年第6期241-244,共4页
关键词 白血病干细胞 儿童 白血病患者 白血病细胞 白血病复发 化疗药物 动物模型 细胞培养
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直标鼠抗人CD14单克隆抗体2F9-FITC的研制及鉴定 被引量:6
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作者 宁铂涛 汤永民 +7 位作者 沈红强 张玲燕 杨世隆 陈英虎 宋华 石淑文 钱柏芹 徐卫群 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2005年第2期167-171,190,共6页
目的研制异硫氰酸荧光素(Fluoresceinisothiocyanate,FITC)标记的直标单克隆抗体2F9-FITC,用于白血病的免疫分型诊断。方法2F9杂交瘤细胞的亚克隆,2F9腹水的制备、纯化、纯度鉴定按照常规方法进行;参考改良Marsshall氏法,制备FITC标记的... 目的研制异硫氰酸荧光素(Fluoresceinisothiocyanate,FITC)标记的直标单克隆抗体2F9-FITC,用于白血病的免疫分型诊断。方法2F9杂交瘤细胞的亚克隆,2F9腹水的制备、纯化、纯度鉴定按照常规方法进行;参考改良Marsshall氏法,制备FITC标记的2F9-FITC单抗;通过流式细胞术鉴定单抗亚型,比较2F9-FITC和标准CD14-FITC在不同类型白血病细胞上的表达情况。结果制备了大量高纯度的IgG1κ亚型2F9单抗,成功研制了直标单抗2F9-FITC,A495/A280比值为0.44;2F9-FITC与CD14-FITC在单核细胞上反应的阳性细胞百分数分别为84.50%及90.08%,而在淋巴细胞仅为0.52%和1.01%;2F9-FITC与标准CD14-FITC在各类白血病细胞上的阳性细胞百分数的差异不显著(n=23,t=0.922,P=0.367)。结论研制的2F9-FITC能够替代进口的同类高质量单抗试剂,用于单核细胞相关性白血病的免疫诊断。 展开更多
关键词 抗体 单克隆 抗原 CD14 异硫氰酸荧光素 白血病
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抗人CD14新克隆ZCH-7-2F9单抗轻重链可变区基因克隆与序列分析 被引量:1
6
作者 宁铂涛 汤永民 +2 位作者 曹江 沈红强 钱柏芹 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2007年第4期348-354,共7页
目的:获取抗人CD14单克隆抗体(单抗)ZCH-7-2F9(简称2F9)轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)基因,为2F9单链抗体(ScFv2F9)的构建奠定基础。方法:复苏2F9和NS-1细胞株,并亚克隆2F9细胞株,从其最佳克隆93A10提取总RNA,RQ1 RNase-Free DNase处... 目的:获取抗人CD14单克隆抗体(单抗)ZCH-7-2F9(简称2F9)轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)基因,为2F9单链抗体(ScFv2F9)的构建奠定基础。方法:复苏2F9和NS-1细胞株,并亚克隆2F9细胞株,从其最佳克隆93A10提取总RNA,RQ1 RNase-Free DNase处理污染的DNA,与NS-1细胞进行同步对照,通过RT-PCR,扩增获得2F9单抗VL基因和VH基因,分别克隆入pGEM○R-T Easy载体,然后转化DH5α细菌,酶切鉴定并纯化阳性重组子,测序后进行在线核苷酸序列分析。结果:2F9单抗VL基因全长321 bp,编码107个氨基酸,归属于小鼠Ig的Vκ基因,氨基酸序列分析结果显示,VL含有明确的4个框架区(FR)和3个抗原决定簇互补区(CDR),在第23位和第88位为半胱氨酸,是与抗体二硫键形成有关的两种特征性氨基酸;其VH基因全长360 bp,编码120个氨基酸,归属于小鼠Ig的VH基因,氨基酸序列分析结果显示,VH含有明确的4个框架区和3个抗原决定簇互补区,在第22位和第96位为半胱氨酸,是与抗体二硫键形成有关的两种特征性氨基酸。结论:经核苷酸序列分析证明所克隆的基因分别是2F9单抗的VL和VH基因,为2F9基因工程抗体研究奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 抗体 单克隆 抗原 CD14 序列分析 免疫球蛋白可变区/遗传学 基因
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鼠抗人CD14单链抗体ScFv2F9原核表达载体的构建和表达
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作者 宁铂涛 汤永民 +2 位作者 曹江 沈红强 钱柏芹 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2008年第1期51-59,共9页
目的:构建ZCH-7-2F9(简称2F9)单链抗体(ScFv2F9)原核表达载体,获得活性目的蛋白,为2F9免疫毒素及其它类型的基因工程抗体的研究奠定基础。方法:根据VH2F9、VL2F9、(G4S)3基因序列以及pIVEX2.3-MCS空载体多克隆位点内切酶位点NdeI和SmaI... 目的:构建ZCH-7-2F9(简称2F9)单链抗体(ScFv2F9)原核表达载体,获得活性目的蛋白,为2F9免疫毒素及其它类型的基因工程抗体的研究奠定基础。方法:根据VH2F9、VL2F9、(G4S)3基因序列以及pIVEX2.3-MCS空载体多克隆位点内切酶位点NdeI和SmaI的核酸序列设计引物,采用高保真的Taq酶,通过重叠延伸拚接法(splicing by overlap extension,SOE)扩增克隆到ScFv2F9基因,T-A克隆、测序核实后克隆到pIVEX2.3-MCS空载体中,阳性重组质粒转化大肠杆菌菌株E.coli BL21star(DE3)plysS,IPTG诱导目的蛋白表达,镍树脂纯化后体外复性浓缩,流式细胞术观察其识别和结合CD14的能力。结果:成功构建ScFv2F9的原核表达载体pIVEX2.3-MCS/ScFv2F9;对大肠杆菌的包涵体进行纯化复性,其复性率为32.6%;通过流式细胞术观察到复性ScFv2F9对亲本单抗2F9-FITC有部分的阻滞效果,复性ScFv2F9阻滞1次后阳性细胞百分数、平均荧光强度(MFI)和高峰频道(peakCh)分别下降了11.73%、11.96%和31.57%,阻滞2次后分别下降了26.44%、21.75%和42.11%。结论:ScFv2F9在原核细胞中获得成功表达,复性后目的蛋白对人CD14有一定的识别和结合能力,为2F9单抗的进一步改造打下了坚实的基础。 展开更多
关键词 抗原 CD14/免疫学 原核细胞 大肠杆菌 重组 遗传 抗体 单克隆 流式细胞术 质粒 基因表达
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新单抗ZCH-7-2D3与白血病细胞的反应性及其临床意义
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作者 郭莉 汤永民 +4 位作者 沈红强 钱柏芹 宁铂涛 张海忠 张怡 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2006年第4期390-393,共4页
目的:观察新抗人白细胞分化抗原ZCH-7-2D 3单克隆抗体(单抗)与白血病细胞的反应性及其在白血病免疫学诊断分型中的意义。方法:采用CD 45设门和多色流式细胞术,对经30余种标准单抗业已定型的100例白血病患者新鲜的骨髓细胞或外周血标本... 目的:观察新抗人白细胞分化抗原ZCH-7-2D 3单克隆抗体(单抗)与白血病细胞的反应性及其在白血病免疫学诊断分型中的意义。方法:采用CD 45设门和多色流式细胞术,对经30余种标准单抗业已定型的100例白血病患者新鲜的骨髓细胞或外周血标本进行流式细胞术分析。结果:2D 3抗原在急性淋巴细胞性白血病(ALL)病例中的阳性率(10/31)明显低于急性髓细胞性白血病(AM L)(39/55,P<0.01);2D 3在3例B系/髓系混合型白血病病例中均有表达,而在6例慢性粒细胞性白血病(CM L)中不表达,在慢性淋巴细胞性白血病(CLL)中阳性率(3/5)与B系ALL病例中的阳性率(9/28)差异无显著意义(P=0.2389)。2D 3在ALL各免疫亚型中的表达差异无显著意义(P=0.5632);在AM L各亚型中除2例AM L-M 6患者不表达外,其余AM L亚型间无统计学意义(P>0.05)。结论:单抗2D 3主要与AM L细胞反应,但在识别白血病细胞分化阶段上未发现特殊性。 展开更多
关键词 白血病 单克隆抗体 流式细胞术 免疫分型
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3例黏多糖贮积症Ⅰ型患儿行脐血干细胞移植的护理
9
作者 张超琅 高建娣 +1 位作者 魏林琳 奚璐 《护理学杂志》 CSCD 北大核心 2022年第13期41-43,共3页
总结3例黏多糖贮积症Ⅰ型患儿行脐血干细胞移植术的护理经验。护理要点包括密切观察病情变化,做好植入前综合征的护理;精准使用免疫抑制剂,做好移植物抗宿主病的护理;落实基础护理;做好安全护理;进行多种形式健康宣教,提升家庭照护能力... 总结3例黏多糖贮积症Ⅰ型患儿行脐血干细胞移植术的护理经验。护理要点包括密切观察病情变化,做好植入前综合征的护理;精准使用免疫抑制剂,做好移植物抗宿主病的护理;落实基础护理;做好安全护理;进行多种形式健康宣教,提升家庭照护能力。经过精心治疗及护理,患儿均顺利出院,出院后随访1~8个月,恢复良好。 展开更多
关键词 儿童 黏多糖贮积症 Hurler综合征 脐血 造血干细胞 干细胞移植 护理
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伴N-RAS及CBL突变的幼年型粒单核细胞白血病快速急变后单倍体移植1例报告并文献复习
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作者 廖婵 赵芬英 +4 位作者 宋华 王迪 沈笛颖 梁娟 汤永民 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2019年第1期32-37,共6页
目的减少对幼年型粒单核细胞白血病(JMML)的误诊,探讨单倍体造血干细胞移植治疗急变后未获得完全缓解JMML的可行性,并分析JMML快速急变的原因。方法 3岁患儿历经误诊为免疫性血小板减少症(ITP)和传染性单核细胞增多症后确诊为JMML,伴有N... 目的减少对幼年型粒单核细胞白血病(JMML)的误诊,探讨单倍体造血干细胞移植治疗急变后未获得完全缓解JMML的可行性,并分析JMML快速急变的原因。方法 3岁患儿历经误诊为免疫性血小板减少症(ITP)和传染性单核细胞增多症后确诊为JMML,伴有N-RAS及CBL基因突变,但快速急变为急性髓细胞性白血病AML-M4型,伴有EVI1阳性表达。患儿接受母亲单倍体(HLA 7/10相合)造血干细胞移植,预处理方案为阿糖胞苷+白舒非+猪抗人T细胞免疫球蛋白+环磷酰胺,移植后采用环孢素A+霉酚酸酯(MMF)+短程甲氨蝶呤+甲基强的松龙方案预防移植物抗宿主病(GVHD)。结果移植后+14d白细胞植活,+18d血小板植活,未发生重度GVHD。移植后2个月减停全部免疫抑制剂,随访至2018年8月1日,患儿无病存活。结论 JMML急变后未获得完全缓解行单倍体造血干细胞移植治疗是可行的,同时存在N-RAS及CBL基因突变且有EVI1阳性可能是患儿快速急变的原因。 展开更多
关键词 幼年型粒单核细胞白血病 单倍体移植 N-RAS基因 CBL基因 EVI 1基因
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急性B淋巴细胞白血病动物模型的建立 被引量:4
11
作者 李丽霞 汤永民 +4 位作者 顾伟忠 汤宏峰 钱柏芹 沈红强 罗春芳 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2008年第5期511-514,共4页
目的:建立急性B淋巴细胞系白血病动物模型,为药物进行体内靶向杀伤研究奠定基础。方法:裸鼠用环磷酰胺预处理后,尾静脉注射5×106个Nalm-6细胞,观察小鼠症状,记录发病时间,取其各个组织做病理检查,了解肿瘤细胞浸润情况。结果:小鼠... 目的:建立急性B淋巴细胞系白血病动物模型,为药物进行体内靶向杀伤研究奠定基础。方法:裸鼠用环磷酰胺预处理后,尾静脉注射5×106个Nalm-6细胞,观察小鼠症状,记录发病时间,取其各个组织做病理检查,了解肿瘤细胞浸润情况。结果:小鼠注射肿瘤细胞(19.4±0.55)d后出现严重消瘦、脊柱侧弯和弓背症状,平均死亡时间(24.75±0.87)d;病理切片观察到小鼠骨髓、肝、脾、肾、脑膜、脑实质、卵巢、肺都有肿瘤细胞浸润,部分肝脾组织出现坏死。结论:采用裸鼠成功建立了急性B淋巴细胞系白血病的动物模型,为靶向治疗白血病研究奠定了基础。 展开更多
关键词 白血病 B细胞 急性 疾病模型 动物 白血病 环磷酰胺/药理学
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基于信息化短距离沟通延伸护理对白血病患儿及家属的影响 被引量:6
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作者 杨婷 王燕青 童婵娟 《中国医药导报》 CAS 2022年第35期176-180,共5页
目的探讨基于信息化短距离沟通延伸护理对白血病患儿及家属的影响。方法选取2019年12月至2021年12月在浙江大学医学院附属儿童医院诊治的120例白血病患儿及120名家属,采用随机数字表法将其分为常规组和干预组,各60例患儿及60名家属。常... 目的探讨基于信息化短距离沟通延伸护理对白血病患儿及家属的影响。方法选取2019年12月至2021年12月在浙江大学医学院附属儿童医院诊治的120例白血病患儿及120名家属,采用随机数字表法将其分为常规组和干预组,各60例患儿及60名家属。常规组给予常规护理干预,干预组在常规组的基础上再行基于信息化短距离沟通延伸护理。比较干预3周后两组知识认知、希望水平及患儿心理弹性情况。结果干预后,两组家属白血病知识认知评分高于干预前,且干预组高于常规组,差异有统计学意义(P<0.05);两组患儿心理弹性量表评分均高于干预前,且干预组高于常规组,差异有统计学意义(P<0.05);两组家属Herth希望量表评分均高于干预前,且干预组评分高于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论给予白血病患儿基于信息化短距离沟通延伸护理,可帮助家属提高疾病知识认知,提升家属希望水平及患儿心理弹性。 展开更多
关键词 白血病 信息化 短距离沟通延伸护理 知识认知 心理弹性
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