半胱氨酰白三烯受体与脑损伤关系的研究进展 被引量：12

1

作者 张丽慧 赵建波 +2 位作者 王艳芳 张纬萍 魏尔清 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2008年第3期315-320,共6页

近年来发现,半胱氨酰白三烯CysLT1和CysLT2受体参与整体水平脑缺血和脑外伤后神经损伤。CysLT1受体调节脑缺血后血脑屏障通透性增高、血管性脑水肿,介导星形胶质细胞增殖及炎症反应;CysLT2受体调节脑缺血后AQP4表达增加、细胞性脑水肿,... 近年来发现,半胱氨酰白三烯CysLT1和CysLT2受体参与整体水平脑缺血和脑外伤后神经损伤。CysLT1受体调节脑缺血后血脑屏障通透性增高、血管性脑水肿,介导星形胶质细胞增殖及炎症反应;CysLT2受体调节脑缺血后AQP4表达增加、细胞性脑水肿,介导星形胶质细胞损伤;新发现的GPR 17也与脑缺血损伤有密切关系。加深CysLT受体在脑损伤及神经保护中作用的认识,将为CysLT受体作为药物靶点筛选和开发防治脑损伤的药物提供新的途径。 展开更多

关键词 半胱氨酰白三烯受体 脑疾病 脑损伤

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GPR17在中枢神经系统损伤修复中的作用研究进展 被引量：1

2

作者 张壮 魏尔清 卢韵碧 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期355-359,共5页

G-蛋白偶联受体17(G-protein-coupled receptor 17,GPR17)原是一种孤儿受体,曾被鉴定为新型尿嘧啶核苷酸/半胱氨酰白三烯受体;2011年国际药理学联合会认为,将GPR17归类于白三烯受体条件尚不成熟。GPR17参与多种病理生理过程,如脑损伤、... G-蛋白偶联受体17(G-protein-coupled receptor 17,GPR17)原是一种孤儿受体,曾被鉴定为新型尿嘧啶核苷酸/半胱氨酰白三烯受体;2011年国际药理学联合会认为,将GPR17归类于白三烯受体条件尚不成熟。GPR17参与多种病理生理过程,如脑损伤、脊髓损伤、少突胶质细胞发育及成熟,这提示GPR17可能成为相关疾病新的治疗靶点。文中就GPR17的配体和拮抗剂、GPR17和其他受体的相互作用及GPR17在中枢神经系统损伤修复中的作用等研究进展进行综述。 展开更多

关键词 中枢神经系统 损伤 受体 G-蛋白偶联 白三烯类 受体 白三烯 半胱氨酸 尿嘧啶核苷酸类

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中枢神经药物对两种品系小鼠行为学作用的比较

3

作者 叶夷露 张建亭 +4 位作者 钟雅文 张纬萍 沈香娣 魏尔清 张琦 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期384-390,共7页

目的:比较中枢神经药物对KM小鼠和ICR小鼠开场自发活动和被动回避试验的影响。方法:KM小鼠和ICR小鼠分别腹腔注射不同剂量的中枢兴奋药咖啡因(3、10、30 mg/kg)和麻黄碱(3、10、30、100 mg/kg),以及中枢抑制药地西泮(1、3、10 mg/kg)和... 目的:比较中枢神经药物对KM小鼠和ICR小鼠开场自发活动和被动回避试验的影响。方法:KM小鼠和ICR小鼠分别腹腔注射不同剂量的中枢兴奋药咖啡因(3、10、30 mg/kg)和麻黄碱(3、10、30、100 mg/kg),以及中枢抑制药地西泮(1、3、10 mg/kg)和水合氯醛(10、30、100 mg/kg)。给药10 min或30 min后,分别记录小鼠在开场内的自发活动2 h或被动回避试验的潜伏时间。分析小鼠的活动轨迹,以总路程、中央区域活动路程占总路程的比值(中央路程比值)、中央区域停留时间和穿梭的潜伏时间等指标,来评价药物对两种品系小鼠行为学活动特点的影响。结果:咖啡因和地西泮使潜伏期延长,麻黄碱和水合氯醛使潜伏期缩短,两种品系小鼠之间无明显差异。在两种品系小鼠的总活动路程上,麻黄碱10 mg/kg、地西泮3 mg/kg和水合氯醛100 mg/kg有差异。麻黄碱10、30、100 mg/kg对ICR小鼠的中央路程比值较KM小鼠增加、中央区域停留时间延长;地西泮3、10 mg/kg对ICR小鼠的中央路程比值较KM小鼠降低、中央区域停留时间缩短。结论:两种品系小鼠对开场自发活动的总路程、中央路程比值和中央区域停留时间有差异,对被动回避试验的潜伏时间无差异,为今后中枢神经药物的研究中动物品系的选择提供了依据。 展开更多

关键词 中枢神经系统药物/药理学 运动活动/药物作用 药物评价 品系差异 被动回避 自发活动 小鼠

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上皮—间质转化在肿瘤发生发展中的作用研究进展 被引量：14

4

作者 刘志娴 魏尔清 卢韵碧 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期211-216,共6页

上皮—间质转化（ EMT ）是上皮细胞失去其形态和功能逐渐转化为间质样细胞的过程，与肿瘤复发和转移相关。 EMT的调控因素有很多，如E-钙黏蛋白、转化生长因子β、Wnt信号通路、微RNA及转录因子等。本文就目前关于EMT在肿瘤中的作用以... 上皮—间质转化（ EMT ）是上皮细胞失去其形态和功能逐渐转化为间质样细胞的过程，与肿瘤复发和转移相关。 EMT的调控因素有很多，如E-钙黏蛋白、转化生长因子β、Wnt信号通路、微RNA及转录因子等。本文就目前关于EMT在肿瘤中的作用以及EMT的调节机制的研究进展做一综述，以期对肿瘤的治疗提供新的线索。 展开更多

关键词 肿瘤 钙黏着糖蛋白类 转录因子 间质细胞/病理学 上皮细胞/病理学 生物转化 综述

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水通道蛋白AQP4基因缺失加重NMDA诱导的小鼠脑损伤 被引量：5

5

作者 史文珍 赵春贞 +4 位作者 黄雪琴 张纬萍 方三华 卢韵碧 魏尔清 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期145-149,共5页

目的:评价水通道蛋白AQP4在兴奋性氨基酸NMDA诱导脑损伤中起的作用。方法:在AQP4基因敲除小鼠,皮层注射NMDA 150 nmol诱导损伤。甲苯胺蓝染色评价损伤面积,Fluro-Jade B染色评价变性神经元,免疫组化法评价血脑屏障通透性增高。结果:与... 目的:评价水通道蛋白AQP4在兴奋性氨基酸NMDA诱导脑损伤中起的作用。方法:在AQP4基因敲除小鼠,皮层注射NMDA 150 nmol诱导损伤。甲苯胺蓝染色评价损伤面积,Fluro-Jade B染色评价变性神经元,免疫组化法评价血脑屏障通透性增高。结果:与野生型小鼠比较,AQP4基因缺失加重NMDA诱导的皮层损伤,增加损伤区变性神经元密度,加重血脑屏障通透性的增高。结论:AQP4在NMDA诱导的脑损伤中可能起保护作用。 展开更多

关键词 水通道蛋白质4 小鼠 基因敲除 N-甲基天冬氨酸/药理学 脑损伤 AQP4 基因敲除 皮层注射 NMDA

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5-脂氧酶在全脑缺血海马CA1神经元损伤中的作用 被引量：6

6

作者 陈文健 李成檀 +4 位作者 赵建波 张晓燕 韩华阳 魏尔清 张丽慧 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期61-66,共6页

目的:观察全脑缺血后海马神经元损伤中5-脂氧酶(5-LOX)的表达变化,并探讨5-LOX选择性抑制剂zileuton对全脑缺血海马神经元损伤的保护作用。方法:在双侧颈总动脉阻断结合降压药诱导大鼠全脑缺血模型,Western blot方法检测脑缺血损伤中5-... 目的:观察全脑缺血后海马神经元损伤中5-脂氧酶(5-LOX)的表达变化,并探讨5-LOX选择性抑制剂zileuton对全脑缺血海马神经元损伤的保护作用。方法:在双侧颈总动脉阻断结合降压药诱导大鼠全脑缺血模型,Western blot方法检测脑缺血损伤中5-LOX的表达改变;免疫组织化学及免疫荧光双标染色方法观察5-LOX的分布特征。应用5-LOX选择性抑制剂zileuton(10、30、50 mg/kg,缺血前后2 h灌胃给药,以后每日2次,共3 d)观察脑缺血后海马神经元的损伤变化。结果:大鼠全脑缺血后3～14 d,海马CA1神经元产生迟发性神经元死亡;海马5-LOX表达在全脑缺血后1～7 d增高,并于3 d达高峰;在海马CA1区,5-LOX主要表达在神经元胞浆,脑缺血后5-LOX发生核移位现象。5-LOX抑制剂zileuton(30和50 mg/kg)能减少全脑缺血后海马CA1神经元的死亡。结论:5-LOX参与大鼠全脑缺血诱导的海马神经元损伤,5-LOX抑制剂zileuton对全脑缺血海马神经元损伤有保护作用。 展开更多

关键词 羟基脲/治疗应用 脂氧合酶抑制剂/药理学 脑缺血/药物疗法 海马/细胞学 神经元/细胞学 疾病模型 动物

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白首乌C-21甾体苷体外抑制大鼠胶质瘤细胞生长的作用 被引量：6

7

作者 王一奇 杨波 +1 位作者 张如松 魏尔清 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期402-407,共6页

目的:评价白首乌C-21甾体苷(CGB)体外抑制大鼠胶质瘤C6细胞生长的作用。方法:C6细胞在CGB处理24、48、72 h后,以MTT法检测细胞活性;AnnexinV/PI双染或用PI单染后,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期。结果:CGB 30、60、120 mg/L显著抑制C... 目的:评价白首乌C-21甾体苷(CGB)体外抑制大鼠胶质瘤C6细胞生长的作用。方法:C6细胞在CGB处理24、48、72 h后,以MTT法检测细胞活性;AnnexinV/PI双染或用PI单染后,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期。结果:CGB 30、60、120 mg/L显著抑制C6细胞活性(P<0.001),呈浓度、时间依赖性;CGB 60、120 mg/L显著提高细胞凋亡率(P<0.001),并能明显阻滞细胞周期,增加G0/G1期细胞比例(P<0.05),降低S期细胞比例(P<0.01)。结论:CGB能显著抑制体外培养的大鼠胶质瘤细胞的生长,并能诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期。 展开更多

关键词 何首乌/化学 细胞凋亡/药物作用 白首乌 C-21甾体苷 胶质瘤 凋亡 细胞周期

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鱼藤酮诱导BV2小胶质细胞半胱氨酰白三烯受体1表达变化 被引量：6

8

作者 骆江云 张壮 +8 位作者 余舒莹 赵冰 赵春贞 王欣欣 方三华 张纬萍 张丽慧 魏尔清 卢韵碧 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期131-138,共8页

目的:制备和鉴定半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1受体)抗体,以此观察鱼藤酮诱导BV2小胶质细胞损伤过程中CysLT1受体表达变化。方法:以KLH偶联的CysLT1受体多肽(小鼠)免疫家兔制备多克隆抗体,用ELISA法测定抗体效价,以抗原阻断法测定抗体敏... 目的:制备和鉴定半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1受体)抗体,以此观察鱼藤酮诱导BV2小胶质细胞损伤过程中CysLT1受体表达变化。方法:以KLH偶联的CysLT1受体多肽(小鼠)免疫家兔制备多克隆抗体,用ELISA法测定抗体效价,以抗原阻断法测定抗体敏感性及特异性。用新制备的抗体以Western blotting检测鱼藤酮(0.01～1μmol/L,作用24 h)损伤BV2细胞过程中,BV2细胞上CysLT1受体的表达变化,并以RT-PCR检测验证CysLT1受体mRNA表达水平,同时以免疫组化观察CysLT1受体的亚细胞分布变化。结果:ELISA测定显示,制备的兔抗小鼠CysLT1受体抗体的效价大于1/32728,对CysLT1受体的特异性强,对CysLT2受体和GPR17基本无交叉反应。Western blotting和RT-PCR显示,鱼藤酮作用BV2细胞24 h剂量依赖性诱导CysLT1受体mRNA及蛋白水平表达升高;免疫组化显示在鱼藤酮诱导BV2细胞损伤过程中,随鱼藤酮剂量增加,CysLT1受体发生核移位。结论:制备的CysLT1受体多克隆抗体具有高效价和高特异性,能满足Western blotting和免疫组化检测的要求;CysLT1受体参与鱼藤酮诱导的BV2细胞损伤。 展开更多

关键词 半胱氨酸 受体 白三烯 抗体 鱼藤酮/药理学 半胱氨酰白三烯受体 多克隆抗体 BV2小胶质细胞

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半胱氨酰白三烯受体2多克隆抗体制备及其鉴定 被引量：6

9

作者 陈丽萍 赵春贞 +8 位作者 史文珍 戚玲玲 卢韵碧 张咏梅 张丽慧 方三华 鲍建芳 沈建根 魏尔清 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期591-597,共7页

目的:制备半胱氨酰白三烯受体2(CysLT2)多克隆抗体,并鉴定其免疫学特性及应用。方法:以KLH偶联的CysLT2受体多肽免疫家兔制备抗体,用间接ELISA法测定抗体效价,以抗原阻断法测定抗体敏感性及特异性;同时,以新制备的抗体进行Western blot... 目的:制备半胱氨酰白三烯受体2(CysLT2)多克隆抗体,并鉴定其免疫学特性及应用。方法:以KLH偶联的CysLT2受体多肽免疫家兔制备抗体,用间接ELISA法测定抗体效价,以抗原阻断法测定抗体敏感性及特异性;同时,以新制备的抗体进行Western blot和免疫组化,检测CysLT2受体的组织表达。结果:ELISA测定显示,获得的家兔抗CysLT2受体抗体的效价大于1/1 047 296,对CysLT2受体的特异性强,对CysLT1受体和GPR17基本无交叉反应。Western blot结果显示,CysLT2受体在大鼠、小鼠肾、脑和肺中有较高的表达,其分子量在40 kD左右。免疫组化结果表明,CysLT2受体主要表达在大鼠神经元,也表达在部分星形胶质细胞。结论:制备的CysLT2受体多克隆抗体具有高效价和高特异性,能满足Western blot和免疫组化检测的要求。 展开更多

关键词 半胱氨酸/遗传 受体 白三烯/遗传 半胱氨酰白三烯受体 CysLT2受体 多克隆抗体

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稳定表达Keap1的H460-N5细胞株的建立及增敏抗肿瘤药物作用的研究 被引量：4

10

作者 曲丽艳 高鹏 +2 位作者 王洪燕 王秀君 唐修文 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期6-10,共5页

目的:建立野生型Keap1过表达的H460细胞株降表达Nrf2,检测Nrf2-ARE信号通路对肿瘤细胞耐药性的影响。方法:H460细胞转染mKeap1-pEGFP后经过长期筛选得到稳定表达Keap1蛋白质的细胞株,通过Western blotting和荧光定量PCR的方法进行检测;... 目的:建立野生型Keap1过表达的H460细胞株降表达Nrf2,检测Nrf2-ARE信号通路对肿瘤细胞耐药性的影响。方法:H460细胞转染mKeap1-pEGFP后经过长期筛选得到稳定表达Keap1蛋白质的细胞株,通过Western blotting和荧光定量PCR的方法进行检测;并通过多次继代培养,细胞株H460-N5稳定表达mKeap1,Nrf2及其调控基因均显著降表达;用MTS法检测抗癌药物奥沙利铂、阿霉素和依托泊苷对细胞增殖抑制率。结果:H460细胞转染mKeap1-pEGFP后筛选建立Nrf2降表达的稳定细胞株H460-N5。MTS数据显示,与对照组相比,抗癌药物奥沙利铂、阿霉素和依托泊苷对H460-N5细胞的抗增殖作用更显著。当奥沙利铂和依托泊苷分别在93μmol/L和100μmol/L浓度作用于对照组细胞株H460-N0时,药物作用接近半数抑制率(IC50);而在H460-N5细胞株中,两种抗癌药物的IC50分别为42μmol/L和30μmol/L。阿霉素对H460-N0细胞的IC50>3 mg/L,而对H460-N5细胞的IC50约为2 mg/L。结论:Keap1过表达的H460-N5细胞Nrf2及调控基因显著降低并增敏抗癌药物奥沙利铂、阿霉素和依托泊苷对肿瘤细胞的增殖抑制作用。 展开更多

关键词 核胞浆转运蛋白类 氧化性应激 基因表达 反应元件 博来霉素/投药和剂量 抗药性 肿瘤 肺肿瘤 衔接蛋白质类 膜泡运输 有机铂化合物

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新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体制备及其鉴定 被引量：5

11

作者 戚玲玲 卢韵碧 +8 位作者 史文珍 赵春贞 张咏梅 陈丽萍 张丽慧 方三华 鲍建芳 沈建根 魏尔清 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期357-361,共5页

目的:制备新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体(pAb),并鉴定其免疫学特性。方法:以KLH偶联的GPR17多肽免疫家兔制备其pAb,用间接ELISA法测定抗体效价,阻断ELISA测定抗体敏感性及特异性,同时以新制备的抗体做Western blot,检测GPR1... 目的:制备新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体(pAb),并鉴定其免疫学特性。方法:以KLH偶联的GPR17多肽免疫家兔制备其pAb,用间接ELISA法测定抗体效价,阻断ELISA测定抗体敏感性及特异性,同时以新制备的抗体做Western blot,检测GPR17的组织表达。结果:通过免疫家兔获得的抗GPR17 pAb,ELISA测定显示其抗体效价最高可达到1/16 364,并对CysLT1受体和CysLT2受体基本无交叉反应,具有较好的特异性。Western blot结果显示,GPR17在大鼠脑和心脏组织中有较高的表达,其分子量在43 kD左右。结论:制备的GPR17 pAb具有较高的效价和较好的特异性,能满足Western blot检测GPR17的要求。 展开更多

关键词 受体 白三烯 半胱氨酸 GPR17 半胱氨酰白三烯受体 多克隆抗体

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Nrf2-ARE通路抑制作用研究展望 被引量：10

12

作者 王秀君 吴加国 唐修文 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期1-5,共5页

转录因子红细胞系-2p45(NF-E2)相关因子-2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)通过上调解毒酶和抗氧化酶基因的表达,为人体提供防御系统。然而,Nrf2表达过高,不但对肿瘤形成和生长起促进作用,而且可增强肿瘤细胞的耐药性。

关键词 核胞浆转运蛋白类 氧化性应激 基因表达 反应元件

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物体材质与检测间隔时间对小鼠新物体识别实验结果的影响 被引量：4

13

作者 李盛建 黄竹燕 +4 位作者 叶夷露 俞月萍 张纬萍 魏尔清 张琦 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期346-352,共7页

目的：研究不同实验条件下,新物体识别实验（NOR实验）在ICR小鼠学习记忆能力评价中的应用效果.方法：将130只ICR雄性小鼠随机分为10组：4组用于不同间隔时间（10 min、90 min、4h、24 h）的测试,4组用于不同物体材质（木质-木质、塑胶... 目的：研究不同实验条件下,新物体识别实验（NOR实验）在ICR小鼠学习记忆能力评价中的应用效果.方法：将130只ICR雄性小鼠随机分为10组：4组用于不同间隔时间（10 min、90 min、4h、24 h）的测试,4组用于不同物体材质（木质-木质、塑胶-塑胶、塑胶-木质、木质-塑胶）的测试,2组用于重复测试（隔1d或3d测1次,共测3次）.视频跟踪记录小鼠在开场内的活动轨迹,分析其探索新旧物体的时间,计算小鼠对新物体的分辨比（DR）和分辨指数（DI）,评价各组小鼠的学习记忆情况.结果：检测间隔时间为10 min和90 min组的小鼠对新物体的DR和DI较旧物体显著加大（均P＜0.01）;新旧物体不同材质对小鼠探究物体的时间、DR和DI影响较大,选择同一材质物体可使小鼠对新物体保持较为稳定的DR和DI;NOR实验可在同一批小鼠中重复测试,小鼠可持续保持对新物体的探究兴趣.结论：进行NOR实验时,选择较短的检测间隔时间和选用相同材质的物体可较好地评价小鼠学习记忆能力.NOR实验可重复测试. 展开更多

关键词 学习 记忆 行为 小鼠 近交ICR 新物体识别实验

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半胱氨酰白三烯受体CysLT_1R和CysLT_2R以及GPR17在帕金森病模型小鼠脑内的表达分布 被引量：3

14

作者 王浩 石巧娟 +7 位作者 史文珍 张霞燕 王晓蓉 张丽慧 方三华 卢韵碧 张纬萍 魏尔清 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期52-60,共9页

目的:探讨MPTP小鼠帕金森病(PD)模型脑内半胱氨酰白三烯受体CysLT1R、CysLT2R和GPR17表达分布特征。方法:C57BL/6小鼠连续5 d皮下注射MPTP 25 mg/kg诱导PD模型,第10 d处死动物。应用免疫组化方法,观察CysLT1R、CysLT2R和GPR17在黑质表... 目的:探讨MPTP小鼠帕金森病(PD)模型脑内半胱氨酰白三烯受体CysLT1R、CysLT2R和GPR17表达分布特征。方法:C57BL/6小鼠连续5 d皮下注射MPTP 25 mg/kg诱导PD模型,第10 d处死动物。应用免疫组化方法,观察CysLT1R、CysLT2R和GPR17在黑质表达的变化,并用免疫双标方法进行细胞定位。结果:正常小鼠黑质中有CysLT1R、CysLT2R和GPR17表达,主要表达在TH阳性多巴胺能神经元以及小胶质细胞,CysLT2R还表达于星形胶质细胞;其中,在多巴胺能神经元中91%表达GPR17,77%表达CysLT1R,52%表达CysLT2R。与对照组比较,PD模型组小鼠黑质中TH阳性细胞数显著减少;同时CysLT1R、CysLT2R和GPR17阳性细胞数以及表达CysLT1R、CysLT2R和GPR17的多巴胺细胞数均显著减少。在正常小鼠纹状体中有CysLT1R、GPR17表达,主要表达于神经元;而CysLT2R表达很少,主要表达于星形胶质细胞。PD模型组小鼠纹状体中CysLT1R、GPR17阳性细胞数减少;但CysLT2R表达升高,主要表达于增生的星形胶质细胞。结论:CysLT1R、CysLT2R和GPR17可能参与MPTP所致的小鼠PD损伤过程。 展开更多

关键词 半胱氨酸 受体 白三烯 受体 G-蛋白偶联 帕金森病 疾病模型 动物 免疫组织化学

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白三烯D_4体外诱导小胶质细胞激活的作用 被引量：3

15

作者 张壮 骆江云 +5 位作者 黄静 刘志娴 方三华 张纬萍 魏尔清 卢韵碧 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期253-260,共8页

目的:观察白三烯D4(LTD4)激活小胶质细胞株BV2细胞的作用,探讨介导BV2细胞激活的半胱氨酰白三烯受体(CysLT受体)亚型。方法:以Western blotting和免疫组化鉴定BV2细胞上CysLT受体的表达;以LTD4及CysLT受体拮抗剂处理BV2细胞后,采用MTT... 目的:观察白三烯D4(LTD4)激活小胶质细胞株BV2细胞的作用,探讨介导BV2细胞激活的半胱氨酰白三烯受体(CysLT受体)亚型。方法:以Western blotting和免疫组化鉴定BV2细胞上CysLT受体的表达;以LTD4及CysLT受体拮抗剂处理BV2细胞后,采用MTT还原法检测细胞活性,微珠示踪法(以流式细胞仪检测)观察细胞吞噬的变化,RT-PCR检测炎症因子IL-6 mRNA的表达变化。结果:LTD4不影响BV2细胞增殖,但随着LTD4浓度增高可增强细胞吞噬、增加IL-6mRNA的表达,100 nmol/L LTD4使细胞吞噬增高为对照的1.4倍(P<0.001),IL-6 mRNA的表达增高为对照的2倍(P<0.01);LTD4诱导BV2细胞上调表达IL-6 mRNA可被CysLT1受体选择性拮抗剂孟鲁司特和CysLT1/CysLT2非选择性拮抗剂BAY u9773抑制,而CysLT2受体选择性拮抗剂HAMI 3379对此无明显影响;HAMI 3379和BAY u9773(100 nmol/L)能进一步增强LTD4诱导的BV2细胞吞噬。结论:体外LTD4可激活BV2细胞,LTD4诱导细胞IL-6 mRNA上调表达由CysLT1受体介导,LTD4诱导的细胞吞噬增强受CysLT2受体负性调节。 展开更多

关键词 白三烯D4 小胶质细胞 半胱氨酸 受体 白三烯 吞噬作用 细胞因子

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5-脂氧酶/半胱氨酰白三烯途径不参与大鼠C6胶质瘤细胞缺氧缺糖损伤 被引量：3

16

作者 黄雪琴 黄晓佳 +4 位作者 张丽慧 戚玲玲 卢韵碧 张纬萍 魏尔清 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2008年第5期456-462,共7页

目的：观察缺氧缺糖（OGD）是否损伤大鼠C6胶质瘤细胞,以及5-脂氧酶（5-LOX）/半胱氨酰白三烯（CysLT）途经是否参与OGD损伤。方法：在OGD处理并恢复不同时间后,观察C6细胞活性变化,以及5-LOX抑制剂和CysLT受体拮抗剂的影响;以免疫细胞... 目的：观察缺氧缺糖（OGD）是否损伤大鼠C6胶质瘤细胞,以及5-脂氧酶（5-LOX）/半胱氨酰白三烯（CysLT）途经是否参与OGD损伤。方法：在OGD处理并恢复不同时间后,观察C6细胞活性变化,以及5-LOX抑制剂和CysLT受体拮抗剂的影响;以免疫细胞化学法观察5-LOX蛋白的细胞内分布;以RT-PCR法检测CysLT1和CysLT2受体mRNA表达;并观察白三烯D4（LTD4）对C6细胞的作用。结果：OGD4-8h并恢复24-72h后,可诱导C6细胞损伤;5-LOX抑制剂和CysLT受体拮抗剂对OGD损伤无明显作用。OGD未诱导5-LOX的核膜移位。C6细胞高表达CysLT2受体,但CysLT1受体表达很微弱,OGD不影响它们的表达。此外,LTD4对C6细胞没有明显作用。结论：OGD可诱导C6细胞损伤,但5-LOX/CysLT途径不参与OGD诱导的损伤。 展开更多

关键词 神经胶质瘤 缺氧缺血 脑 白三烯类/分析 白三烯B4/分析 半胱氨酸/分析 白三烯拮抗剂 花生四烯酸盐5-脂氧合酶 细胞 培养的

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水通道蛋白4基因敲除对博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的影响 被引量：2

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作者 厉旭云 徐小方 +6 位作者 黄静 刘志娴 余舒莹 方三华 张纬萍 魏尔清 卢韵碧 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期281-286,共6页

目的：评价水通道蛋白4（AQP4）在博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化中的作用.方法：采用博莱霉素3 mg/kg气管内注射诱导AQP4基因敲除（AQP4-/-）小鼠发生肺纤维化,以野生型小鼠为对照,造模后第3、7、14、28天处死动物,检测肺系数、血清转化... 目的：评价水通道蛋白4（AQP4）在博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化中的作用.方法：采用博莱霉素3 mg/kg气管内注射诱导AQP4基因敲除（AQP4-/-）小鼠发生肺纤维化,以野生型小鼠为对照,造模后第3、7、14、28天处死动物,检测肺系数、血清转化生长因子-β1 （TGF-β1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平和肺组织羟脯氨酸含量,作肺组织病理切片行HE染色和Masson染色观察肺部炎症及纤维化程度.结果：造模第14天,野生型小鼠肺系数增高为野生型对照小鼠的1.9倍（12.69±6.05与6.80±0.82,q=4.204,P＜0.05）;AQP4-/-小鼠肺系数增高为AQP4-/-对照小鼠的2.3倍（14.05±5.82与6.05±0.58,q=5.172,P＜0.01）,但与野生型小鼠比较,AQP4基因敲除对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化过程中肺系数增高无明显影响（P＞0.05）.小鼠肺组织羟脯氨酸含量随造模时间逐步增加,造模第28天,野生型小鼠肺组织羟脯氨酸含量增加为对照的1.55倍[（0.85±0.22） μg/mg与（0.55±0.14） μg/mg,q=4.313,P＜0.05];AQP4-/-小鼠肺组织羟脯氨酸含量增加为对照的1.4倍[（0.84±0.13） μg/mg与（0.60±0.14）μg/mg,q=4.595,P＜0.05],但与野生型小鼠比较,AQP4基因敲除对小鼠肺纤维化过程中肺组织羟脯氨酸含量增加无明显影响（P＞0.05）.造模后,小鼠血清TGF-β1、TNF-α水平有增加趋势,但这两个指标在野生型和AQP4-/-小鼠间差别无统计学意义（均P＞0.05）.肺组织病理学检查结果表明AQP4基因敲除对博莱霉素诱导的小鼠肺部炎症和纤维化无明显影响.结论：AQP4基因敲除对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化未产生明显影响. 展开更多

关键词 水孔蛋白质类 小鼠 基因敲除 博莱霉素 药理学 肺纤维化 病理学

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齐留通减轻小鼠小胶质细胞介导的鱼藤酮对PC12细胞的毒性作用 被引量：2

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作者 张晓燕 陈璐 +5 位作者 徐栋敏 王晓蓉 王艳芳 李成檀 魏尔清 张丽慧 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期273-280,共8页

目的：观察5-脂氧酶选择性抑制剂齐留通对小胶质细胞介导的鱼藤酮神经毒性的影响.方法：以鱼藤酮预处理的小鼠小胶质BV2细胞条件培养液培养PC12细胞,通过MTT法和乳酸脱氢酶（LDH）释放分析PC12细胞损伤和活性变化,Hoechst/碘化丙啶荧光... 目的：观察5-脂氧酶选择性抑制剂齐留通对小胶质细胞介导的鱼藤酮神经毒性的影响.方法：以鱼藤酮预处理的小鼠小胶质BV2细胞条件培养液培养PC12细胞,通过MTT法和乳酸脱氢酶（LDH）释放分析PC12细胞损伤和活性变化,Hoechst/碘化丙啶荧光双染检测PC12细胞死亡,并评估齐留通对小胶质细胞介导细胞毒性的作用.结果：1、3、10 nmol/L鱼藤酮对PC12细胞无直接毒性,但是其预处理的BV2细胞条件培养液间接诱导PC12细胞形态改变、活性下降,LDH释放和细胞死亡明显增加;0.01、1μmol/L齐留通能有效减轻小胶质细胞介导的鱼藤酮细胞毒性作用.结论：5-脂氧酶抑制剂齐留通能减轻小胶质细胞介导的鱼藤酮神经毒性,提示5-脂氧酶通路在小胶质细胞炎症诱导的神经细胞死亡中有重要作用. 展开更多

关键词 脂氧合酶抑制剂 治疗应用 羟基脲 类似物和衍生物 羟基脲 药理学 鱼藤酮 药理学 神经毒素类 PC12细胞 药物作用 齐留通

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不同模式口鼻式吸烟诱导急性肺损伤的实验研究 被引量：2

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作者 肖卫强 周国俊 +5 位作者 许成云 徐建 黄芳芳 卢昕博 李霞 吴希美 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期522-529,共8页

目的：研究不同抽吸模式的口鼻式吸烟方式诱导大鼠急性肺损伤的效应。方法：市售焦油含量分别为1、5、11mg的卷烟按照加拿大深度抽吸模式（深度抽吸）及11mg焦油含量的卷烟按国际标准抽吸模式（国标抽吸）抽吸．并以空气为载气将卷烟烟... 目的：研究不同抽吸模式的口鼻式吸烟方式诱导大鼠急性肺损伤的效应。方法：市售焦油含量分别为1、5、11mg的卷烟按照加拿大深度抽吸模式（深度抽吸）及11mg焦油含量的卷烟按国际标准抽吸模式（国标抽吸）抽吸．并以空气为载气将卷烟烟雾载入大鼠口鼻暴露塔中；大鼠固定于固定器中，仅口鼻暴露于主流烟气中，吸烟28d后处死大鼠进行左肺肺泡灌洗，肺泡灌洗液用于炎症细胞计数和分类以及ELISA检测炎症因子IL-1β和TNF-α水平；右肺下叶进行组织病理学观察；右肺上叶冻存并用于髓过氧化物酶（MPO）、超氧化物歧化酶（SOD）活性及还原型谷胱甘肽（GSH）、活性氧和丙二醛含量检测。结果：同等抽吸模式下，大鼠吸入卷烟的烟气质量浓度与样品卷烟盒标记的焦油等有害物质含量成正比。大鼠吸烟一周后即出现体质量下降。深度抽吸及国标抽吸11mg焦油含量的卷烟均能显著诱导大鼠肺部巨噬细胞、淋巴细胞和中性粒细胞浸润，IL—1β和TNF-α分泌增加，以及MPO活性提高（均P〈0．05）；反映肺组织氧化应激水平的GSH含量和SOD活性均显著下降（均P〈0．05），活性氧和丙二醛含量则显著上升（均P〈0.05）。深度抽吸5mg焦油含量的卷烟能显著诱导淋巴细胞和中性粒细胞浸润、IL-1β和TNF-α分泌以及肺组织MPO活性上升，同时能显著促使肺组织中GSH含量及SOD活性下降以及活性氧和丙二醛含量增加（均P〈0．05）；但深度抽吸1mg焦油含量的卷烟无明显诱导炎症细胞浸润等作用。结论：口鼻式吸烟方式可以成功诱导大鼠肺损伤模型，大鼠肺部炎症细胞浸润程度、炎症因子分泌及氧化应激水平与主流烟气中有害物质含量成正比。 展开更多

关键词 吸烟/副作用 肺/损伤 烟草 疾病模型 动物

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烟酰胺磷酸核糖转移酶在炎症中的作用研究进展 被引量：4

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作者 黄静 魏尔清 卢韵碧 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期234-239,共6页

烟酰胺磷酸核糖转移酶（ Nampt ）又称内脏脂肪素（ Visfatin ）和前B细胞克隆增强因子。研究发现，Nampt是催化烟酰胺腺嘌呤二核苷（ NAD ）合成的限速酶，也是一种脂肪因子、细胞因子，参与免疫、代谢和应激等相关生理病理过程；值得... 烟酰胺磷酸核糖转移酶（ Nampt ）又称内脏脂肪素（ Visfatin ）和前B细胞克隆增强因子。研究发现，Nampt是催化烟酰胺腺嘌呤二核苷（ NAD ）合成的限速酶，也是一种脂肪因子、细胞因子，参与免疫、代谢和应激等相关生理病理过程；值得关注的是，Nampt参与了一系列与炎症相关的疾病，包括急性肺损伤、动脉粥样硬化、心肌梗死、肥胖、2型糖尿病、关节炎等，因而Nampt 被认为是炎症相关疾病的治疗药物开发新靶点。本文就Nampt在炎症中的作用研究进展作一综述。 展开更多

关键词 细胞因子类 炎症 病理生理学 烟酰胺磷酸核糖基转移酶 综述

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