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雷公藤红素诱导人急性髓系白血病HL-60细胞凋亡及其机制的研究
被引量：
22
1
作者
徐银海
严杰
《浙江大学学报（理学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期311-314,共4页
探讨雷公藤红素诱导人急性髓系白血病HL-60细胞凋亡的作用及其机制．采用台盼蓝染色法、透射电镜和流式细胞术，分别检测不同浓度和作用时间下，雷公藤红素诱导HL一60细胞凋亡以及对细胞Fas、FasL和NF-κBP65表达的影响．结果表明：0．5...
探讨雷公藤红素诱导人急性髓系白血病HL-60细胞凋亡的作用及其机制．采用台盼蓝染色法、透射电镜和流式细胞术，分别检测不同浓度和作用时间下，雷公藤红素诱导HL一60细胞凋亡以及对细胞Fas、FasL和NF-κBP65表达的影响．结果表明：0．5～2．5μmol·L^-1浓度雷公藤红素作用24h，HL-60细胞凋亡率均明显高于不加药物的对照组（P〈0．05）．当雷公藤红素浓度为1．5μmol·L^-1时，细胞凋亡率最高并呈时间依赖效应．雷公藤红素作用的HL-60细胞，可呈现典型的细胞凋亡形态学改变．1．5μmol·L^-1雷公藤红素可明显提高Fas和FasL阳性HL-60细胞百分率（P〈0．05），但抑制细胞NF—κBP65的表达（P〈0．05）．从而得出结论：雷公藤红素可有效地诱导HL-60细胞凋亡，其机制与雷公藤红素可上调Fas、FasL基因及下调NF—κB基因表达有关．
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关键词
雷公藤红素
HL-60细胞
凋亡
机制
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职称材料
重组抗原LTB-UreB-HpaA对幽门螺杆菌感染小鼠的免疫保护性及内置佐剂LTB的免疫增强作用(英文)
被引量：
1
2
作者
罗冬娇
邵浙新
+1 位作者
徐水凌
严杰
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2005年第8期645-651,共7页
目的构建大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)和幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B亚单位(UreB)、幽门螺杆菌粘附素A(HpaA)的融合基因ltBureBhpaA及其原核表达系统,鉴定重组表达产物rLTBUreBHpaA的免疫原性、佐剂活性及对Hp感染小鼠的保护作用。方法...
目的构建大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)和幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B亚单位(UreB)、幽门螺杆菌粘附素A(HpaA)的融合基因ltBureBhpaA及其原核表达系统,鉴定重组表达产物rLTBUreBHpaA的免疫原性、佐剂活性及对Hp感染小鼠的保护作用。方法采用连接引物PCR构建ltBureBhpaA融合基因,TA克隆后测序。采用pET42a质粒及其宿主菌E.coliBL21DE3亚克隆构建原核表达系统pET42altBureBhpaAE.coliBL21DE3,并用不同浓度IPTG诱导表达。SDSPAGE用于检测rLTBUreBHpaA的表达及其产量,免疫双扩散试验及Western印迹法检测rLTBUreBHpaA抗原性和免疫反应性。建立牛GM1的ELISA(GM1ELISA)检测重组蛋白中rLTB的佐剂活性。采用HpSS1株BaLb/C小鼠感染模型,检测rLTBUreBHpaA的免疫保护作用。结果ltBureBhpaA核苷酸序列与各原始基因序列完全相同。不同浓度的IPTG均可诱导pET42altBureBhpaAE.coliBL21DE3表达rLTBUreBHpaA,其产量约为细菌总蛋白的15%。rLTBUreBHpaA家兔抗血清的双扩效价为1∶8。商品化兔抗Hp全菌抗体、兔抗UreB或HpaA均能识别rLTBUreBHpaA并与之结合。GM1ELISA结果证实rLTBUreBHpaA仍具有结合牛GM1的活性。rLTBUreBHpaA(200μg/每只小鼠)免疫后,可使小鼠100%免于HpSS1株的感染。10μgrLTB与rUreB或rHpa共同免疫小鼠,可使保护率分别从66.7%提高至81.8%和83.3%。结论本研究成功地构建了ltBureBhpaA融合基因及其原核表达系统。目的表达产物rLTBUreBHpaA有良好的免疫原性、佐剂活性及免疫保护效果,具有作为Hp基因工程疫苗的应用前景。
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关键词
幽门螺杆菌
重组抗原
内置佐剂
疫苗
免疫保护
免疫增强
BaLb/C小鼠
幽门螺杆菌感染
rLTB
免疫增强作用
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职称材料
题名
雷公藤红素诱导人急性髓系白血病HL-60细胞凋亡及其机制的研究
被引量：
22
1
作者
徐银海
严杰
机构
浙江大学医学院基础医学部
出处
《浙江大学学报（理学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期311-314,共4页
文摘
探讨雷公藤红素诱导人急性髓系白血病HL-60细胞凋亡的作用及其机制．采用台盼蓝染色法、透射电镜和流式细胞术，分别检测不同浓度和作用时间下，雷公藤红素诱导HL一60细胞凋亡以及对细胞Fas、FasL和NF-κBP65表达的影响．结果表明：0．5～2．5μmol·L^-1浓度雷公藤红素作用24h，HL-60细胞凋亡率均明显高于不加药物的对照组（P〈0．05）．当雷公藤红素浓度为1．5μmol·L^-1时，细胞凋亡率最高并呈时间依赖效应．雷公藤红素作用的HL-60细胞，可呈现典型的细胞凋亡形态学改变．1．5μmol·L^-1雷公藤红素可明显提高Fas和FasL阳性HL-60细胞百分率（P〈0．05），但抑制细胞NF—κBP65的表达（P〈0．05）．从而得出结论：雷公藤红素可有效地诱导HL-60细胞凋亡，其机制与雷公藤红素可上调Fas、FasL基因及下调NF—κB基因表达有关．
关键词
雷公藤红素
HL-60细胞
凋亡
机制
Keywords
tripterine
HL-60 cell
apoptosis
mechanism
分类号
R37 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
重组抗原LTB-UreB-HpaA对幽门螺杆菌感染小鼠的免疫保护性及内置佐剂LTB的免疫增强作用(英文)
被引量：
1
2
作者
罗冬娇
邵浙新
徐水凌
严杰
机构
杭州师范
学院
基础医学
部
浙江大学
医学院
附属第一医院
嘉兴
学院
医学院
浙江大学医学院基础医学部
出处
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2005年第8期645-651,共7页
基金
ThissubjectwassupportedbytheStateMinistryofEducationResearchFoundationforExcellentYoungTeachers
文摘
目的构建大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)和幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B亚单位(UreB)、幽门螺杆菌粘附素A(HpaA)的融合基因ltBureBhpaA及其原核表达系统,鉴定重组表达产物rLTBUreBHpaA的免疫原性、佐剂活性及对Hp感染小鼠的保护作用。方法采用连接引物PCR构建ltBureBhpaA融合基因,TA克隆后测序。采用pET42a质粒及其宿主菌E.coliBL21DE3亚克隆构建原核表达系统pET42altBureBhpaAE.coliBL21DE3,并用不同浓度IPTG诱导表达。SDSPAGE用于检测rLTBUreBHpaA的表达及其产量,免疫双扩散试验及Western印迹法检测rLTBUreBHpaA抗原性和免疫反应性。建立牛GM1的ELISA(GM1ELISA)检测重组蛋白中rLTB的佐剂活性。采用HpSS1株BaLb/C小鼠感染模型,检测rLTBUreBHpaA的免疫保护作用。结果ltBureBhpaA核苷酸序列与各原始基因序列完全相同。不同浓度的IPTG均可诱导pET42altBureBhpaAE.coliBL21DE3表达rLTBUreBHpaA,其产量约为细菌总蛋白的15%。rLTBUreBHpaA家兔抗血清的双扩效价为1∶8。商品化兔抗Hp全菌抗体、兔抗UreB或HpaA均能识别rLTBUreBHpaA并与之结合。GM1ELISA结果证实rLTBUreBHpaA仍具有结合牛GM1的活性。rLTBUreBHpaA(200μg/每只小鼠)免疫后,可使小鼠100%免于HpSS1株的感染。10μgrLTB与rUreB或rHpa共同免疫小鼠,可使保护率分别从66.7%提高至81.8%和83.3%。结论本研究成功地构建了ltBureBhpaA融合基因及其原核表达系统。目的表达产物rLTBUreBHpaA有良好的免疫原性、佐剂活性及免疫保护效果,具有作为Hp基因工程疫苗的应用前景。
关键词
幽门螺杆菌
重组抗原
内置佐剂
疫苗
免疫保护
免疫增强
BaLb/C小鼠
幽门螺杆菌感染
rLTB
免疫增强作用
Keywords
Helicobacter pylori
recombinant antigen
inner adjuvant
vaccine
immunoprotection
immunoenhancement
分类号
R57 [医药卫生—消化系统]
R573 [医药卫生—消化系统]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
雷公藤红素诱导人急性髓系白血病HL-60细胞凋亡及其机制的研究
徐银海
严杰
《浙江大学学报（理学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008
22
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
重组抗原LTB-UreB-HpaA对幽门螺杆菌感染小鼠的免疫保护性及内置佐剂LTB的免疫增强作用(英文)
罗冬娇
邵浙新
徐水凌
严杰
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2005
1
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