期刊文献+
共找到19篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
绿源素与甜菜碱预防肉鸡球虫病的效果试验
1
作者 张伟武 杜爱芳 《浙江畜牧兽医》 2014年第4期1-4,共4页
为探讨绿源素与甜菜碱预防肉鸡球虫病的效果,试验选用4种常用的抗球虫药物及绿源素与甜菜碱组合进行对比试验。以抗球虫指数(ACI)、病变值、卵囊数及粪便记分为试验指标,进行综合评价。试验结果表明,绿源素单独使用平均抗球虫指数为149.... 为探讨绿源素与甜菜碱预防肉鸡球虫病的效果,试验选用4种常用的抗球虫药物及绿源素与甜菜碱组合进行对比试验。以抗球虫指数(ACI)、病变值、卵囊数及粪便记分为试验指标,进行综合评价。试验结果表明,绿源素单独使用平均抗球虫指数为149.06,盲肠病变值降低56.48%,盲肠卵囊数减少72.52%,平均粪便记分降低44.52%;绿源素与甜菜碱配合使用平均抗球虫指数为171.95,盲肠病变值降低76.85%,盲肠卵囊数减少75.26%,平均粪便记分降低74.93%。绿源素单独使用的抗球虫效果低于绿源素与甜菜碱配合使用的抗球虫效果,绿源素与甜菜碱配合使用的抗球虫效果达中等以上有效水平。 展开更多
关键词 绿源素 甜菜碱 抗球虫效果 肉鸡
在线阅读 下载PDF
鸡IL-18对IBDV多聚蛋白DNA疫苗的免疫增强作用研究 被引量:10
2
作者 余夏萌 寿春波 +2 位作者 章晓栋 徐根亮 于涟 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期13-18,共6页
为进一步评价鸡IL-18的免疫增强作用,用鸡白细胞介素18(IL-18)的真核表达质粒(pCI-IL-18)与传染性法氏囊病病毒(IBDV)多聚蛋白DNA疫苗分别免疫SPF鸡,14日龄时首免,2周后二免,二免后5周用IBDV标准强毒株BC6/85攻击.研究发现,鸡IL-18能显... 为进一步评价鸡IL-18的免疫增强作用,用鸡白细胞介素18(IL-18)的真核表达质粒(pCI-IL-18)与传染性法氏囊病病毒(IBDV)多聚蛋白DNA疫苗分别免疫SPF鸡,14日龄时首免,2周后二免,二免后5周用IBDV标准强毒株BC6/85攻击.研究发现,鸡IL-18能显著促进T、B淋巴细胞的增殖反应,增强IBDV多聚蛋白DNA疫苗诱导的中和抗体水平及其对强毒攻击的保护力.结果提示,鸡IL-18(200μg)对IBDV多聚蛋白DNA疫苗具有显著的免疫增强作用(P<0.05). 展开更多
关键词 鸡IL-18 传染性法氏囊病病毒 DNA疫苗 免疫增强
在线阅读 下载PDF
鸡白细胞介素2真核表达质粒的构建、表达及对AIV疫苗免疫增强作用研究 被引量:9
3
作者 由振强 于涟 +2 位作者 翁继锋 许健 徐根亮 《浙江农业学报》 CSCD 2005年第6期350-353,共4页
将鸡白细胞介素2(ChIL-2)基因亚克隆入pCI载体中,pEGFP-N1载体中的EGFP基因酶切后连入质粒pCI-ChIL-2中,构建真核表达质粒pCI-ChIL-2-EGFP,该载体表达ChIL-2-EGFP融合蛋白。重组质粒在脂质体作用下转染Vero细胞、鸡胚成纤维细胞(CEF)和... 将鸡白细胞介素2(ChIL-2)基因亚克隆入pCI载体中,pEGFP-N1载体中的EGFP基因酶切后连入质粒pCI-ChIL-2中,构建真核表达质粒pCI-ChIL-2-EGFP,该载体表达ChIL-2-EGFP融合蛋白。重组质粒在脂质体作用下转染Vero细胞、鸡胚成纤维细胞(CEF)和外周血淋巴细胞(PBLC),荧光显微镜观察到融合蛋白在体外能稳定表达。HI试验显示,pCI-ChIL-2-EGFP与AIV疫苗共注射可明显提高AIV疫苗的免疫原性。 展开更多
关键词 鸡白细胞介素2 EGFP 真核表达 AIV
在线阅读 下载PDF
瑞士乳酸杆菌HZ521株的分子鉴定及其部分生物学特性研究 被引量:2
4
作者 朱炳林 张茜茜 方维焕 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第2期49-52,共4页
根据GenBank中乳酸杆菌16 S^23 S rRNA基因间沉默区序列设计引物,进一步鉴定猪源乳酸杆菌分离株HZ521;并通过体外试验,以嗜酸乳酸杆菌ATCC 4356为参考菌株,探讨HZ521株的益生素作用。部分16 S^23 S rRNA基因序列同源性分析结果表明,该... 根据GenBank中乳酸杆菌16 S^23 S rRNA基因间沉默区序列设计引物,进一步鉴定猪源乳酸杆菌分离株HZ521;并通过体外试验,以嗜酸乳酸杆菌ATCC 4356为参考菌株,探讨HZ521株的益生素作用。部分16 S^23 S rRNA基因序列同源性分析结果表明,该分离株属于瑞士乳酸杆菌。HZ521株具有较强的产酸能力,能耐受强酸,对Hela细胞的黏附率为87.2%,显著高于ATCC4356株(P<0.01)。表明瑞士乳酸杆菌HZ521株具有益生素特性,可作为肠道益生素的候选菌株。 展开更多
关键词 瑞士乳酸杆菌 16S-23SrRNA 基因间沉默区 黏附 益生素
在线阅读 下载PDF
减毒沙门氏菌作为原核表达宿主菌和真核表达载体的研究(英文) 被引量:4
5
作者 迪卡 陈雪燕 +2 位作者 帅江冰 陈宁 方维焕 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期237-244,共8页
本研究以增强型绿色荧光蛋白(eGFP)为报告基因,探讨了减毒沙门氏菌作为原核表达宿主菌和真核表达载体的可行性.通过多功能分光光度仪测定细菌的OD600和eGFP在大肠杆菌和减毒沙门氏菌中的表达量,结果表明:eGFP在沙门氏菌中的表达量依赖于... 本研究以增强型绿色荧光蛋白(eGFP)为报告基因,探讨了减毒沙门氏菌作为原核表达宿主菌和真核表达载体的可行性.通过多功能分光光度仪测定细菌的OD600和eGFP在大肠杆菌和减毒沙门氏菌中的表达量,结果表明:eGFP在沙门氏菌中的表达量依赖于IPTG的浓度,最佳浓度为0.5 mmol?L-1,增加浓度至0.75 mmol?L-1不能增加eGFP的表达量;而该现象在大肠杆菌中不明显.当IPTG浓度等于或大于0.5 mmol?L-1时,沙门氏菌中eGFP的表达量显著高于大肠杆菌.若以相对荧光度(1个OD600单位的荧光值,即eGFP相对表达量)表示,两种宿主菌的最佳诱导时间均为3 h.Hela细胞侵袭力试验表明该减毒沙门氏菌仍具有侵袭力,同时以脂质体转染为对照,将携带重组质粒pcDNA3-eGFP的减毒沙门氏菌转染Hela细胞,48 h后可观察到绿色荧光,表明了该菌可作为载体将重组质粒携带到细胞内,并使外源基因得到表达.此外,利用基于微孔板的多功能分光光度仪可直接检测荧光强度和OD值,能快速、准确地进行多样本检测,可用于GFP在不同宿主菌或相同宿主菌在不同试验条件下,甚至不同表达载体在相同宿主菌中表达等方面的研究. 展开更多
关键词 减毒鼠伤寒沙门氏菌 大肠杆菌 重组质粒 增强型绿色荧光蛋白
在线阅读 下载PDF
新城疫病毒F蛋白结构域基因原核表达与抗原表位分析 被引量:5
6
作者 张桂芝 陈亚波 +2 位作者 徐程 张朝政 方维焕 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期82-87,共6页
以含新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因的重组质粒为模板,设计特异引物进行重叠-延伸PCR扩增获得F基因的抗原结构域基因片段Fa、Fb和Fa-l-Fb,经SalⅠ和NotⅠ酶切后,定向插入原核表达载体pGEX-6P-1,获得重组质粒pGEX-Fa、pGEX-Fb和pGEX-Fa-... 以含新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因的重组质粒为模板,设计特异引物进行重叠-延伸PCR扩增获得F基因的抗原结构域基因片段Fa、Fb和Fa-l-Fb,经SalⅠ和NotⅠ酶切后,定向插入原核表达载体pGEX-6P-1,获得重组质粒pGEX-Fa、pGEX-Fb和pGEX-Fa-l-Fb;用定点突变方法获得重组质粒pGEX-Fa-mut.将重组质粒转化大肠杆菌BL21,转化菌经IPTG诱导、提取表达产物进行蛋白电泳和免疫印迹分析.结果表明:Fa-mut、Fb和Fa-l-Fb结构域基因均获得了融合表达,表达产物与NDV阳性血清具有免疫反应性;与pGEX-Fa-mut不同,pGEX-Fa重组质粒在大肠杆菌中未能表达,且转化菌在IPTG诱导过程中未见生长,提示未经突变的Fa片段可能为毒性蛋白.三维结构预测结果显示,目的蛋白片段中均保留F蛋白中原有相应的抗原表位. 展开更多
关键词 新城疫病毒 融合蛋白 结构域 抗原表位 原核表达
在线阅读 下载PDF
单核细胞增生李斯特菌弱毒株主要毒力基因表达水平分析 被引量:9
7
作者 白帆 陈健舜 +2 位作者 程昌勇 陈巧妙 方维焕 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第S1期108-111,共4页
单核细胞增生李斯特菌是重要的食源性病原菌,可引起人与动物的胃肠炎、脑膜炎、败血症、流产等。其感染过程的每一步均由特定的毒力因子介导。本试验应用荧光定量PCR,比较分析单核细胞增生李斯特菌弱毒株H4(4a型)与强毒株10403S(1/2a型)... 单核细胞增生李斯特菌是重要的食源性病原菌,可引起人与动物的胃肠炎、脑膜炎、败血症、流产等。其感染过程的每一步均由特定的毒力因子介导。本试验应用荧光定量PCR,比较分析单核细胞增生李斯特菌弱毒株H4(4a型)与强毒株10403S(1/2a型)、681(4b型)主要毒力基因(prfA、plcA、hly、mpl、ac-tA、plcB、inl A、inlB和sigB)的表达水平差异。除应激调控因子σB(sigB)外,H4株主要毒力基因的表达水平均显著高于10403S与681。膜裂解因子的高表达导致H4更易暴露于宿主免疫系统而被清除,从而引起毒力下降。本研究为探明这类菌株的弱毒机制奠定了基础。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特菌 弱毒株 毒力基因 表达水平
在线阅读 下载PDF
猪链球菌2型分离株对野生斑马鱼的致病性 被引量:4
8
作者 陈阳 吴迪 +4 位作者 陈雪燕 赵焕灿 扈鸿霞 Cheick A Diakite 方维焕 《动物医学进展》 CSCD 2008年第6期1-5,共5页
以野生斑马鱼为模式动物,对6株mrp+epf+sly+猪链球菌2型(SS2)分离株进行致病性比较。斑马鱼经腹腔接种不同稀释度的SS2分离株,连续观察5d,Kaplan-Meier生存曲线分析并统计半数致死量(LD50)。结果显示,6个分离株对斑马鱼的LD50在105cfu^1... 以野生斑马鱼为模式动物,对6株mrp+epf+sly+猪链球菌2型(SS2)分离株进行致病性比较。斑马鱼经腹腔接种不同稀释度的SS2分离株,连续观察5d,Kaplan-Meier生存曲线分析并统计半数致死量(LD50)。结果显示,6个分离株对斑马鱼的LD50在105cfu^106cfu之间,临床株与非临床株的毒力差异不显著(P>0.05)。从攻毒后死亡的鱼腹腔和脑可分离到SS2,并伴有腹腔出血及肝、肠、脑部炎性病变。表明SS2可感染斑马鱼,为进一步研究SS2的体内感染机制及毒力因子功能等奠定了基础。 展开更多
关键词 2型猪链球菌 斑马鱼 致病性 半数致死量
在线阅读 下载PDF
猪繁殖与呼吸综合征病毒感染细胞中非结构蛋白Nsp2表达分析 被引量:4
9
作者 温贵兰 张涵淞 +5 位作者 扈鸿霞 章先 张毅 王晓杜 李肖梁 方维焕 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1109-1116,共8页
猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)非结构蛋白Nsp2对病毒复制和致病具有重要作用,本研究旨在分析Nsp2在Marc-145细胞内的分布与表达。构建nsp2含PL2区域基因片段的原核表达载体,重组... 猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)非结构蛋白Nsp2对病毒复制和致病具有重要作用,本研究旨在分析Nsp2在Marc-145细胞内的分布与表达。构建nsp2含PL2区域基因片段的原核表达载体,重组蛋白纯化后作为免疫抗原,制备Nsp2特异性单克隆抗体。将携带nsp2基因的真核表达载体转染至Marc-145及HEK293细胞,或将PRRSV感染Marc-145细胞后不同时间点收集细胞样品。免疫荧光观察Nsp2在转染细胞中的亚细胞定位,免疫印迹分析Nsp2在真核细胞中的表达。筛选获得了1株稳定分泌特异性抗Nsp2的单克隆杂交瘤细胞株,能用于免疫荧光和印迹分析。重组真核表达质粒转染Marc-145与HEK293细胞后,Nsp2主要定位于细胞质中,免疫印迹检测到约为120与50ku的蛋白条带。PRRSV感染Marc-145细胞4h即可检测到Nsp2的表达,主要定位于细胞核周围,随着感染时间延长Nsp2分布范围逐渐扩大至整个细胞质。病毒感染8h,可检测到120ku左右的Nsp2蛋白条带,感染后12h可检测到70和50ku左右的Nsp2蛋白,且蛋白表达量随感染时间延长显著增多。PRRSV感染细胞中Nsp2的表达与剪切分析,为深入研究该蛋白在病毒复制和致病中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 非结构蛋白Nsp2 表达与剪切方式
在线阅读 下载PDF
O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的原核表达与抗原性分析 被引量:3
10
作者 徐程 陈亚波 方维焕 《动物医学进展》 CSCD 2007年第6期14-18,共5页
研究分析了O型口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白VP1与当前猪FMDV疫苗血清的免疫反应性。将VP1基因克隆至原核表达载体pET32c,并在大肠埃希菌BL21中得到了表达,Western blot分析表明该重组蛋白与豚鼠O型FMDV标准阳性血清具有良好免疫反应性。目... 研究分析了O型口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白VP1与当前猪FMDV疫苗血清的免疫反应性。将VP1基因克隆至原核表达载体pET32c,并在大肠埃希菌BL21中得到了表达,Western blot分析表明该重组蛋白与豚鼠O型FMDV标准阳性血清具有良好免疫反应性。目的蛋白经纯化后用ELISA分析其与猪疫苗血清的免疫反应性,结果显示该重组VP1蛋白(rVP1)只能与部分O型FMDV疫苗血清反应。推测当前使用的不同O型FMDV疫苗毒株在VP1重要中和抗原位点G-H环(134 aa^158 aa)与C末端(200 aa^213 aa)存在较大差异。 展开更多
关键词 O型口蹄疫病毒 结构蛋白VP1 免疫反应性 疫苗毒株 中和抗原位点
在线阅读 下载PDF
萧山鸡γ-干扰素(IFN-γ)成熟蛋白基因的克隆、原核表达及真核表达载体的构建 被引量:2
11
作者 徐根亮 由振强 +2 位作者 余夏萌 吕冬梅 于涟 《浙江农业学报》 CSCD 2008年第2期88-91,共4页
以有丝分裂原ConA诱导鸡脾脏淋巴细胞,用Trizol试剂提取细胞总RNA,利用RT-PCR技术获得了萧山鸡γ-干扰素成熟蛋白基因495 bp的序列,GenBank登录号为DQ470471。序列分析表明,与已经发表的鸡γ-干扰素成熟蛋白基因序列的核苷酸同源性为95%... 以有丝分裂原ConA诱导鸡脾脏淋巴细胞,用Trizol试剂提取细胞总RNA,利用RT-PCR技术获得了萧山鸡γ-干扰素成熟蛋白基因495 bp的序列,GenBank登录号为DQ470471。序列分析表明,与已经发表的鸡γ-干扰素成熟蛋白基因序列的核苷酸同源性为95%-99.9%。将该cDNA序列构建得到鸡γ-干扰素的原核表达载体pET30a-ChIFN-γ,成功在大肠杆菌中表达了分子量20.88 kD的目的蛋白,与预期分子量一致;并构建得到了鸡γ-干扰素的pCI真核表达载体(pCI-ChIFN-γ)。 展开更多
关键词 萧山鸡γ-干扰素 RT-PCR 原核表达 真核表达载体
在线阅读 下载PDF
单核细胞增生李斯特菌精氨酸脱亚胺酶基因的克隆及原核表达 被引量:1
12
作者 程昌勇 陈健舜 +2 位作者 赵寒昕 白帆 方维焕 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第S1期70-73,共4页
精氨酸脱亚胺酶(ADI)可能介导单核细胞增生李斯特菌抗酸应激,由arcA基因编码。利用分子克隆技术从单核细胞增生李斯特菌10403S扩增得到ADI基因,测序正确后将其插入pET30a表达载体中,构建该基因的原核表达质粒pET30a-ADI,并转化入大肠埃... 精氨酸脱亚胺酶(ADI)可能介导单核细胞增生李斯特菌抗酸应激,由arcA基因编码。利用分子克隆技术从单核细胞增生李斯特菌10403S扩增得到ADI基因,测序正确后将其插入pET30a表达载体中,构建该基因的原核表达质粒pET30a-ADI,并转化入大肠埃希菌Rosetta中进行诱导表达。核苷酸序列分析显示,ADI基因的完整开放阅读框为1 233 bp,编码410个氨基酸。SDS-PAGE表明:该基因在大肠埃希菌中成功表达,重组蛋白的分子质量约为52.5 ku。为进一步研究精氨酸脱亚胺酶的活性提供了条件,同时也为探索单核细胞增生李斯特菌抗酸应激的机理奠定了重要的基础。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特菌 arcA基因 精氨酸脱亚胺酶 原核表达
在线阅读 下载PDF
PRRSV GP5基因的原核表达及其免疫性分析 被引量:3
13
作者 扈鸿霞 方维焕 +1 位作者 刘建华 冉多良 《动物医学进展》 CSCD 2008年第5期32-35,共4页
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的糖蛋白GP5含有中和表位,是检测用抗原和亚单位疫苗的首选蛋白。本研究将糖蛋白GP5基因截短后,克隆至表达载体pET-30a,转化大肠埃希菌,经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳显示重组蛋白以包涵体形式得到了表达,每... 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的糖蛋白GP5含有中和表位,是检测用抗原和亚单位疫苗的首选蛋白。本研究将糖蛋白GP5基因截短后,克隆至表达载体pET-30a,转化大肠埃希菌,经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳显示重组蛋白以包涵体形式得到了表达,每升重组菌可纯化得到目的蛋白87.5mg。Western blot和间接酶联免疫吸附试验分析表明,该蛋白与PRRSV阳性血清具有良好免疫反应性。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 结构蛋白GP5 免疫反应性
在线阅读 下载PDF
表达绿色荧光蛋白重组单核细胞增多性李斯特菌的构建(英文)
14
作者 柯春林 宋厚辉 +2 位作者 江玲丽 张桂芝 方维焕 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期638-644,共7页
将编码绿色荧光蛋白(GFP)的基因融合到单核细胞增多性李斯特菌actA基因启动子和信号肽下游,应用同源重组技术构建了含gfp的重组李斯特菌突变株.PCR扩增及其产物的酶切鉴定均证实目的基因gfp融合到李斯特菌基因组中.荧光显微镜下可见重... 将编码绿色荧光蛋白(GFP)的基因融合到单核细胞增多性李斯特菌actA基因启动子和信号肽下游,应用同源重组技术构建了含gfp的重组李斯特菌突变株.PCR扩增及其产物的酶切鉴定均证实目的基因gfp融合到李斯特菌基因组中.荧光显微镜下可见重组菌体发绿色荧光.SDS-PAGE电泳和免疫印迹结果显示重组李斯特菌表达的GFP分子量约为28 kD,与预计的分子量大小一致.重组菌对鸡胚和小鼠的毒力以及对体外培养细胞的侵袭力均低于野生型李斯特菌.该重组菌可用于研究李斯特菌的致病机理和食品加工过程中微生物污染控制的指示性细菌. 展开更多
关键词 单核细胞增多性李斯特菌 同源重组 绿色荧光蛋白 外源基因表达
在线阅读 下载PDF
猪 Siglec-10基因的克隆与生物信息学分析
15
作者 张毅 张晏 +2 位作者 王晓杜 方维焕 温贵兰 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第11期14-19,共6页
为了研究猪Siglec-10(pSiglec-10)的分子生物学特征,利用Ensemble网站提供的预测序列(ENSSSCT00000032460)设计一对特异性引物,采用RT-PCR技术,克隆pSiglec-10分子的全长CDS区,经过测序比较鉴定正确后,对该分子的基本特征进行分析;构建... 为了研究猪Siglec-10(pSiglec-10)的分子生物学特征,利用Ensemble网站提供的预测序列(ENSSSCT00000032460)设计一对特异性引物,采用RT-PCR技术,克隆pSiglec-10分子的全长CDS区,经过测序比较鉴定正确后,对该分子的基本特征进行分析;构建截短pSiglec-10的原核表达载体,另将该分子的CDS区全长克隆至真核表达载体pcDNA3.1-3′FLAG,将重组质粒转染至PK-15和Marc-145细胞中分析其表达定位特征。结果克隆的pSiglec-10分子的全长CDS为2 127bp,编码709个氨基酸;pSiglec-10基因序列与猴的同源性最高,同源性达73.6%,与鼠的同源性为66.9%;与人的同源性为62.5%,氨基酸序列的同源性分别为58.9%、69.4%和65.3%;pSiglec-10C端的ITIM区域和磷酸化位点高度保守;pSiglec-10分子具有较好的抗原特性和亲水性;该分子主要表达定位在细胞浆中,在Marc-145细胞中呈不连续的点状分布于细胞浆,细胞核周围荧光强度较强。pSiglec-10分子全长CDS区的克隆和分析将对该分子的功能研究提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 猪Siglec-1 0 分子克隆 真核表达 生物信息学分析
在线阅读 下载PDF
猪链球菌2型溶血素基因缺失株构建及其生物学特性分析 被引量:5
16
作者 吴炜 张晓燕 +2 位作者 唐宇龙 方丽华 方维焕 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第5期22-26,共5页
猪链球菌溶血素(SLY)是较早确定的猪链球菌毒力因子之一,具有细胞毒性,在猪链球菌致病过程中发挥重要作用。利用同源重组技术成功构建了猪链球菌2型(SS2)sly基因缺失的突变株SS2-Δsly,缺失株的体外溶血活性消失,对小鼠脑血管内皮细胞... 猪链球菌溶血素(SLY)是较早确定的猪链球菌毒力因子之一,具有细胞毒性,在猪链球菌致病过程中发挥重要作用。利用同源重组技术成功构建了猪链球菌2型(SS2)sly基因缺失的突变株SS2-Δsly,缺失株的体外溶血活性消失,对小鼠脑血管内皮细胞的细胞毒性显著低于亲本菌株(P<0.01),但不影响猪链球菌2型在巨噬细胞中的存活。该菌株可以用于研究SS2溶血素在感染细胞中的作用机制。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 溶血素基因缺失株 溶血性 细胞毒性
在线阅读 下载PDF
激流式生物反应器培养MDCK细胞条件优化 被引量:2
17
作者 余彬辉 王斌卿 +3 位作者 胡志航 朱炳林 李肖梁 方维焕 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第10期16-20,共5页
应用激流式生物反应器培养MDCK细胞,从培养基种类、接种密度、pH和溶氧量等关键参数进行优化。结果表明,激流式生物反应器培养MDCK细胞,细胞接种密度为1.5×106个/mL、pH7.2、溶氧量50%~60%、循环流量400mL/min和振荡频率60r/min... 应用激流式生物反应器培养MDCK细胞,从培养基种类、接种密度、pH和溶氧量等关键参数进行优化。结果表明,激流式生物反应器培养MDCK细胞,细胞接种密度为1.5×106个/mL、pH7.2、溶氧量50%~60%、循环流量400mL/min和振荡频率60r/min条件下培养5d可达到最大细胞密度(1.02×107个/mL)及最高糖耗量(3.1g/L),为激流生物反应器大规模培养细胞及病毒疫苗生产奠定基础。 展开更多
关键词 激流式生物反应器 MDCK细胞 培养条件
在线阅读 下载PDF
抗PRRSV和PCV-2-Cap蛋白特异性IgY抗体对保育猪生长和免疫的影响 被引量:1
18
作者 鲍伟华 周雪荣 +4 位作者 卢黎明 孙鹏烈 樊莉 方维焕 李肖梁 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第12期74-79,共6页
应用特异性抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV-2)Cap蛋白卵黄免疫球蛋白(IgY)饲喂保育猪,观察其对保育猪生长和免疫性能的影响。经抗体检测表明,53日龄时,PRRSV和PCV-2抗体阴性率0.5%,试验组比对照组分别高15%... 应用特异性抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV-2)Cap蛋白卵黄免疫球蛋白(IgY)饲喂保育猪,观察其对保育猪生长和免疫性能的影响。经抗体检测表明,53日龄时,PRRSV和PCV-2抗体阴性率0.5%,试验组比对照组分别高15%和5%。在53日龄和60日龄时,保育猪PRRSV阳性抗体S/P均值,试验组比对照组分别低15.59%和24.53%。保育猪46日龄-60日龄之间,阳性PCV-2抗体S/P均值试验组比对照组分别低15.42%、19.66%和12.70%。保育猪转栏时,试验组比对照组平均末重高12.74%(P〈0.01),平均日增重提高16.90%(P〈0.01),成活率高1.67%。免疫组化结果显示,相对于空白组,添加组空肠和小肠组织中的PRRSV抗原的阳性表达几乎为0。试验结果为特异性抗体用于PRRSV和PCV-2的防控提供了参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪园环病毒2型Cap蛋白 卵黄免疫球蛋白 保育猪
在线阅读 下载PDF
李斯特菌多重PCR检测方法的建立 被引量:2
19
作者 陈健舜 朱凝瑜 +2 位作者 孔蕾 何中央 方维焕 《中国渔业质量与标准》 2013年第1期87-93,共7页
李斯特菌属包含6个种,致病力存在差异,其中单增李斯特菌是重要的人兽鱼共患食源性病原菌。比较基因组学研究表明,细胞壁水解酶基因iap存在于李斯特菌各个种,具有两端保守区与中间可变区;liv22-228基因区域则特异存在于伊氏李斯特菌。通... 李斯特菌属包含6个种,致病力存在差异,其中单增李斯特菌是重要的人兽鱼共患食源性病原菌。比较基因组学研究表明,细胞壁水解酶基因iap存在于李斯特菌各个种,具有两端保守区与中间可变区;liv22-228基因区域则特异存在于伊氏李斯特菌。通过对iap竞争性PCR与liv22-228特异性PCR的反应条件优化,建立可同时鉴定李斯特菌各个种的多重PCR反应体系,敏感性达102CFU/mL,对其余15种细菌均无扩增。将该反应体系应用于135株疑似李斯特菌的水产品分离株,并结合种别确证试验,表明该多重PCR的准确率达100%。该检测体系操作简便,并具有较高的特异性、灵敏性、准确性与稳定性,能够满足水产品中李斯特菌快速筛选与种别鉴定的需求。 展开更多
关键词 李斯特菌 种别 IAP liv22—228 多重PCR 检测方法
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部