目的：探讨热激胃癌细胞来源外泌体致敏树突状细胞（dendritic cells,DCs）诱导的肿瘤特异性细胞毒T细胞（cytotoxic T lymphocyte,CTL）反应。方法：制备小鼠前胃癌细胞（murine foregastric cancer cells,MFC）来源外泌体（Exo）、热...目的：探讨热激胃癌细胞来源外泌体致敏树突状细胞（dendritic cells,DCs）诱导的肿瘤特异性细胞毒T细胞（cytotoxic T lymphocyte,CTL）反应。方法：制备小鼠前胃癌细胞（murine foregastric cancer cells,MFC）来源外泌体（Exo）、热激MFC细胞来源外泌体（Exo/HS）及MFC细胞冻融抗原（lysates,Lys）,通过电镜观察外泌体的形态,Western blotting检测外泌体的成分。培养小鼠骨髓来源的DCs,将Exo/HS、Exo和Lys冲击致敏DCs,制备的DCs瘤苗分别命名为DC-Exo/HS、DC-Exo和DC-Lys。HSP70小干扰RNA（small interference RNA,siRNA）转染MFC细胞,热激后分离上清,用制备外泌体致敏DCs,流式术检测DCs的表型。以DC-Exo/HS、DC-Exo、DC-Lys、DC和PBS免疫小鼠,3H-TdR法检测脾脏T细胞的增殖,LDH法检测脾细胞CTL活性。建立MFC细胞荷瘤小鼠模型,观察各组DCs瘤苗的免疫治疗效应。结果：电镜确认外泌体为膜性小囊泡。Western blotting检测表明,Exo/HS含有高水平的HSP70,流式术发现热激MFC细胞来源外泌体能显著上调DCs表面MHC-Ⅱ、CD80、CD86和CD40分子的表达,HSP70 siRNA干扰能下调热激MFC细胞来源外泌体刺激的DCs表面MHC-Ⅱ、CD80、CD86和CD40分子的表达。3H-TdR检测结果显示DC-Exo/HS刺激T细胞增殖的能力显著强于DC-Exo、DC-Lys、DC和PBS组（均P〈0.01）,LDH检测结果表明DC-Exo/HS诱导的CTL活性显著高于DC-Exo、DC-Lys、DC和PBS组（均P〈0.01）,HSP70 siRNA组诱导的CTL活性显著低于对照siRNA组（P〈0.01）。免疫治疗结果显示,DC-Exo/HS对荷瘤小鼠的肿瘤抑制效应显著优于其他各组（P〈0.01）。结论：热激胃癌细胞来源外泌体致敏的DCs能诱导显著的抗肿瘤免疫反应。展开更多
