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传染性支气管炎病毒疫苗株H52的全基因组克隆与分析 被引量:1
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作者 肖朝庭 时莉 +3 位作者 宋翥远 刘然 阿合买提.买买提 周继勇 《中国动物传染病学报》 CAS 2009年第2期17-23,共7页
采用RT-PCR方法克隆测定传染性支气管炎病毒(Infections Bronchitis Virus,IBV)疫苗株H52全基因组序列,并与其它已知全基因组序列的我国分离株进行比较分析,以分析我国IBV地方分离株与疫苗株的分子遗传关系。结果表明,H52基因组... 采用RT-PCR方法克隆测定传染性支气管炎病毒(Infections Bronchitis Virus,IBV)疫苗株H52全基因组序列,并与其它已知全基因组序列的我国分离株进行比较分析,以分析我国IBV地方分离株与疫苗株的分子遗传关系。结果表明,H52基因组全长为27630bp(不包括polyA),A+T含量为61.8%,它与我国IBV分离株全基因组同源性在83.9%~95.2%之间,其中与KQ6的同源性最高(95.2%),与其余株均在88%以下。在基因组内基因的同源性中,以S1、S2与E变异最大,除KQ6外,其余各株(含台湾株)与H52在S1蛋白上的同源性只有72.4%~80.7%,在S2蛋白上的同源性为85.5%~88.1%,E蛋白为82.9%~93.3%。系统进化分析表明,国内分离株,除KQ6外,在进化分支中已独立于H52和其它Massachusetts型衍生毒株。H52与我国地方分离株存在较大的分子遗传差异,这些差异可能导致单纯Massachusetts型疫苗(如H120,H52)不能有效地免疫保护我国的鸡群。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 疫苗株H52 克隆
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临床重要耐药菌感染传播防控策略专家共识 被引量:208
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作者 杨启文 吴安华 +19 位作者 胡必杰 李六亿 刘运喜 孙自镛 吕晓菊 施毅 卓超 郑波 宗志勇 盛国平 宁永忠 张嵘 胡付品 陈中举 李福琴 姜亦虹 战榕 孙树梅 俞云松 徐英春 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期1-14,共14页
耐药菌的传播严重威胁人类健康,目前耐药问题日益加剧,给医疗卫生造成极大负担。加强耐药菌感染的预防、控制和诊疗能力建设是医疗机构防控耐药菌感染传播的重要内容。本共识分析当前临床重要耐药菌的流行病学、耐药机制及实验室检测现... 耐药菌的传播严重威胁人类健康,目前耐药问题日益加剧,给医疗卫生造成极大负担。加强耐药菌感染的预防、控制和诊疗能力建设是医疗机构防控耐药菌感染传播的重要内容。本共识分析当前临床重要耐药菌的流行病学、耐药机制及实验室检测现状,并提出耐药菌感染传播防控的专家推荐意见,旨在提高防控意识,规范临床重要耐药菌感染传播防控策略,明确防控流程。 展开更多
关键词 耐药菌 多重耐药菌 流行病学 耐药机制 感染防控 耐药监测 医院感染
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狂犬病病毒磷蛋白在杆状病毒系统的表达及鉴定 被引量:1
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作者 许运斌 徐洁萍 +3 位作者 张金阳 昝洁 阮系真 周继勇 《中国动物传染病学报》 CAS 2012年第2期17-22,共6页
为了建立狂犬病毒磷蛋白(phosphoprotein,P)的体外表达系统,本研究将RT-PCR扩增的狂犬病病毒ERA株P蛋白基因克隆于杆状病毒转移载体pFastBacHTA,构建重组质粒pFastBacHTA-P,并转染昆虫细胞Sf9包装形成重组杆状病毒。SDS-PAGE分析显示重... 为了建立狂犬病毒磷蛋白(phosphoprotein,P)的体外表达系统,本研究将RT-PCR扩增的狂犬病病毒ERA株P蛋白基因克隆于杆状病毒转移载体pFastBacHTA,构建重组质粒pFastBacHTA-P,并转染昆虫细胞Sf9包装形成重组杆状病毒。SDS-PAGE分析显示重组质粒pFastBacHTA-P转染的Sf9细胞中出现了分子量约为42 kDa的蛋白条带,Western blot证实分子量约为42 kDa的蛋白能与抗His的单克隆抗体发生特异性反应,间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay,IFA)分析进一步显示Sf9细胞表达的P蛋白与抗P蛋白单克隆抗体能特异性结合。这些实验证明,狂犬病病毒P蛋白不仅在Sf9细胞中获得表达,而且具有良好的免疫反应性。狂犬病病毒P蛋白杆状病毒表达体系的建立,为蛋白结构的解析和诊断试剂的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 P蛋白 杆状病毒表达系统
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免疫鸡群H5N1和H9N2亚型禽流感病毒混合感染及H9N2亚型病毒进化分析
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作者 曾嘉梅 房栋 +3 位作者 卞学兵 王俊桦 颜焰 周继勇 《中国动物传染病学报》 CAS 2012年第2期65-70,共6页
本研究分析了免疫鸡群H5N1和H9N2亚型禽流感病毒混合感染中H9N2亚型分离毒株A/chicken/Yuyao/01/2010(H9N2)的基因组特征。氨基酸序列分析显示,HA蛋白裂解位点为PSRSSR/GL,具有低致病性禽流感病毒特征,HA受体结合位点出现了人流感病毒... 本研究分析了免疫鸡群H5N1和H9N2亚型禽流感病毒混合感染中H9N2亚型分离毒株A/chicken/Yuyao/01/2010(H9N2)的基因组特征。氨基酸序列分析显示,HA蛋白裂解位点为PSRSSR/GL,具有低致病性禽流感病毒特征,HA受体结合位点出现了人流感病毒结合位点226L,D基因出现了S31N的突变。遗传分析表明,A/chicken/Yuyao/01/2010病毒的HA基因、NA基因和NS基因在进化上属于CK/BJ/94-Like谱系,D基因和PB2基因属于G1-Like谱系,NP基因、PA基因和PB1基因属于Ck/SH/F/98-Like谱系。结果表明,从H5N1和H9N2亚型混合感染鸡体内分离的H9N2亚型禽流感病毒是一株来源于CK/BJ/94-Like谱系、G1-Like谱系和Ck/SH/F/98-Like谱系的重组病毒。 展开更多
关键词 禽流感 混合感染 H9N2 分子进化分析
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猪圆环病毒2型Rep蛋白在真核细胞中的表达与定位 被引量:1
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作者 张鑫 尹伟 +3 位作者 金玉兰 何嘉玲 颜焰 周继勇 《中国动物传染病学报》 CAS 2009年第1期1-6,共6页
为了构建Rep蛋白真核表达质粒,研究PCV2复制过程中的亚细胞分布。本研究借助PCR方法扩增PCV2的Rep基因,并将其亚克隆到真核表达载体pEGFP-C3中,并转染PK15细胞和Vero细胞。结果显示,重组的pEGFP-PCV2-Rep融合蛋白能够在PK15细胞和Vero... 为了构建Rep蛋白真核表达质粒,研究PCV2复制过程中的亚细胞分布。本研究借助PCR方法扩增PCV2的Rep基因,并将其亚克隆到真核表达载体pEGFP-C3中,并转染PK15细胞和Vero细胞。结果显示,重组的pEGFP-PCV2-Rep融合蛋白能够在PK15细胞和Vero细胞中表达。结论认为pEGFP-PCV2-Rep质粒转染PK15细胞和Vero细胞后48h,PCV2的Rep蛋白主要定位在PK15细胞和Vero细胞的细胞核。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2 REP蛋白 细胞定位
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