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抗丁香酚单克隆抗体的研制及胶体金试纸条检测方法的建立 被引量:2
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作者 董晓涵 翟璐 +4 位作者 黄雅丽 杨加成 陈青舟 廖杰 金仁耀 《核农学报》 CAS 北大核心 2025年第2期339-350,共12页
为制备高特异性和高灵敏度的抗丁香酚(Eugenol)单克隆抗体,建立检测丁香酚的胶体金免疫层析法,本研究采用亲核取代法合成丁香酚半抗原(Eugenol-COOH)并进行质谱(HRMS)鉴定;采用碳二亚胺法制备丁香酚免疫抗原(Eugenol-BSA)和包被抗原(Eug... 为制备高特异性和高灵敏度的抗丁香酚(Eugenol)单克隆抗体,建立检测丁香酚的胶体金免疫层析法,本研究采用亲核取代法合成丁香酚半抗原(Eugenol-COOH)并进行质谱(HRMS)鉴定;采用碳二亚胺法制备丁香酚免疫抗原(Eugenol-BSA)和包被抗原(Eugenol-OVA),进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和紫外扫描鉴定;利用免疫抗原Eugenol-BSA免疫小鼠,经细胞融合、筛选和克隆,最终得到1株能稳定分泌抗丁香酚单克隆抗体的杂交瘤细胞株(3D9),并准备腹水,利用间接竞争ELISA(icELISA)方法测定腹水效价;对获得的单克隆抗体进行鉴定,经条件优化建立胶体金免疫层析试纸条检测方法,对试纸条的灵敏度和稳定性进行评价。结果表明,Eugenol-BSA偶联比约为16∶1,Eugenol-OVA偶联比约为10∶1,完全抗原偶联成功;3D9细胞株的抗体类型及亚类均为免疫球蛋白G(IgG1),轻链为κ链;单克隆抗体效价达1×10^(-6);丁香酚浓度与抑制率之间的线性回归方程为y=9.671lnx+10.539(R^(2)=0.998),半数抑制浓度(IC_(50))为59.2 ng·mL^(-1),表明制备的抗丁香酚单克隆抗体具有较高的检测灵敏度。所制备的胶体金免疫试纸条优化参数为:胶体金标记最适pH值9、0.2 mol·L^(-1)K2CO3添加量12μL、抗体最佳标记量7μg·mL^(-1)、胶体金试纸条的T线消失浓度1.8μg·mL^(-1),该参数下的裸眼检出限0.3μg·mL^(-1)。本研究可为丁香酚的现场检测提供有效方法。 展开更多
关键词 丁香酚 单克隆抗体 人工抗原 胶体金试纸条
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QuEChERS法检测植物提取类化妆品中有机氯农药残留 被引量:2
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作者 宋严豪 肖新荣 +3 位作者 周牧艳 罗芝伊 李思进 丁瑶 《应用化工》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期3094-3097,共4页
建立检测植物提取类化妆品中有机氯农药残留的方法。采用QuEChERS法优化前处理,经气相色谱质谱联用仪检测分析结果。优化后采用乙腈溶剂,加入2 g氯化钠、3 g无水硫酸镁、1 g柠檬酸钠、0.5 g柠檬酸氢二钠进行提取,净化剂:150 mg MgSO_(4)... 建立检测植物提取类化妆品中有机氯农药残留的方法。采用QuEChERS法优化前处理,经气相色谱质谱联用仪检测分析结果。优化后采用乙腈溶剂,加入2 g氯化钠、3 g无水硫酸镁、1 g柠檬酸钠、0.5 g柠檬酸氢二钠进行提取,净化剂:150 mg MgSO_(4)、50 mg PSA、80 mg C_(18)。结果18种有机氯农药的线性范围为0.05~0.5 mg/kg,线性相关系数均≥0.995,检出限为0.006~0.059 mg/kg,定量限为0.018~0.190 mg/kg。在0.1,0.2,0.5 mg/L三个浓度下加标回收率在75.23%~107.49%之间,相对标准偏差RSD在2.37%~6.31%之间。该方法操作简单、快速、稳定,适用于高通量农药残留检测。 展开更多
关键词 QuEChERS法 有机氯农药 植物提取类化妆品
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一株多重耐药中华鳖源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定 被引量:13
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作者 毛烁君 斯广杰 +4 位作者 任晓金 石婷婷 章烨 王卓瑞 章晓栋 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2015年第2期102-106,共5页
从患典型鳃腺炎病中华鳖(Pelodiscus sinensis)肝脏和腹水处进行细菌接种,分离获得一株细菌。综合菌落形态,16 S rRNA序列进化分析和API细菌生化鉴定系统判定,所得菌株为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)(SX43)。动物回归实验显示... 从患典型鳃腺炎病中华鳖(Pelodiscus sinensis)肝脏和腹水处进行细菌接种,分离获得一株细菌。综合菌落形态,16 S rRNA序列进化分析和API细菌生化鉴定系统判定,所得菌株为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)(SX43)。动物回归实验显示,分离株对小鼠的半数致死量(LD50)为106.5CFU,显示该菌株具有较强的致病性,可从实验幼鳖体内再次分离到相同的病原菌。常用药物的抗菌敏感性测定显示,菌株SX43对头孢哌酮、头孢曲松、头孢呋辛、复方新诺明、氯霉素高度敏感。 展开更多
关键词 中华鳖(Pelodiscus sinensis) 弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii) 16 S RRNA
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花青素纳米载体的研究进展 被引量:7
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作者 冯思敏 王丽玲 +1 位作者 廖杰 孙培龙 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第4期330-336,共7页
花青素是一种黄酮类的水溶性天然色素,具有抗氧化、抗癌、抗炎、抗菌、降血糖等生理活性。然而,在加工和贮存过程中,不同环境条件下花青素的稳定性较低,容易发生降解。以脂类、多糖和蛋白质为材料制备的纳米载体具有良好的生物相容性、... 花青素是一种黄酮类的水溶性天然色素,具有抗氧化、抗癌、抗炎、抗菌、降血糖等生理活性。然而,在加工和贮存过程中,不同环境条件下花青素的稳定性较低,容易发生降解。以脂类、多糖和蛋白质为材料制备的纳米载体具有良好的生物相容性、生物降解性和无毒性,能显著提高花青素的稳定性、生物活性和生物利用度。本文综述了近年来载花青素的纳米脂质体、生物大分子纳米载体和纳米乳液的制备技术及其在提高花青素理化稳定性方面的应用,并对花青素纳米载体的未来发展趋势进行了展望。 展开更多
关键词 花青素 纳米载体 理化稳定性 生物利用度
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