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三叶青ThMYBPAR基因的克隆及组织差异表达分析 被引量:1
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作者 王子玥 杨锋 +2 位作者 王红燕 邢巧月 白岩 《浙江农林大学学报》 北大核心 2025年第2期273-280,共8页
【目的】黄酮类成分是三叶青Tetrastigma hemsleyanum药材品质的物质基础,探究ThMYBPAR基因对三叶青块根和叶片中黄酮类成分的合成调控作用,可为三叶青药材品质形成的分子机制提供理论依据。【方法】以近3年生的三叶青块根及叶片为材料... 【目的】黄酮类成分是三叶青Tetrastigma hemsleyanum药材品质的物质基础,探究ThMYBPAR基因对三叶青块根和叶片中黄酮类成分的合成调控作用,可为三叶青药材品质形成的分子机制提供理论依据。【方法】以近3年生的三叶青块根及叶片为材料,测定总黄酮和原花青素的质量浓度以及抗氧化能力,设计引物克隆ThMYBPAR基因,利用生物信息学分析ThMYBPAR蛋白的序列特征和系统进化关系,通过激光共聚焦显微镜观察其亚细胞定位,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析ThMYBPAR基因在三叶青块根和叶片中的表达模式,并分析ThMYBPAR基因表达水平与黄酮类成分的相关性。【结果】三叶青块根中总黄酮及原花青素质量浓度分别是0.55和1.77 g·L^(-1),显著高于叶片(P<0.05),而且块根提取物的ABTS自由基清除率高达90%,说明三叶青块根和叶片间的药材品质存在差异。根据前期转录组数据克隆得到1个长度为888 bp的ThMYBPAR基因,可编码产生310个氨基酸组成的蛋白,与葡萄Vitis vinifera基因中的VvMYBPAR基因高度相似,具有典型的R2和R3 DNA结合功能结构域。系统进化分析结果表明:三叶青中的ThMYBPAR属于R2R3-MYB第5亚家族转录因子,且主要定位在细胞核中。RT-qPCR分析结果显示:ThMYBPAR基因主要在三叶青块根中表达,且表达量与总黄酮和原花青素质量浓度呈极显著正相关(P<0.01)。【结论】ThMYBPAR基因参与调控三叶青中原花青素的合成机制,推测不同表达水平可能是影响三叶青块根和叶片品质的主要原因。 展开更多
关键词 三叶青 基因克隆 ThMYBPAR基因 原花青素
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中波紫外线对三叶青酚类物质质量分数、抗氧化能力及基因表达的影响 被引量:2
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作者 夏敬青 刘海荣 +5 位作者 顾依雯 王子玥 邢巧月 张宇翔 李姗 白岩 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期223-233,共11页
【目的】探究短时间中波紫外线(UV-B)辐射对三叶青Tetrastigma hemsleyanum酚类成分、抗氧化能力及相关基因表达的影响。【方法】将3年生三叶青苗经UV-B持续辐射12.0 h,在0、0.5、1.0、3.0、6.0和12.0 h观察表型;另取三叶青辐射1.0和3.0... 【目的】探究短时间中波紫外线(UV-B)辐射对三叶青Tetrastigma hemsleyanum酚类成分、抗氧化能力及相关基因表达的影响。【方法】将3年生三叶青苗经UV-B持续辐射12.0 h,在0、0.5、1.0、3.0、6.0和12.0 h观察表型;另取三叶青辐射1.0和3.0 h(记为T1和T3)并补充暗处理至24.0 h(记为T1+23和T3+21),以未经处理为对照(ck),进行酚类物质(总酚和总黄酮)质量分数、抗氧化能力和叶片中抗逆酶活性、丙二醛(MDA)质量摩尔浓度测定以及转录组分析。【结果】持续UV-B辐射对三叶青表型有影响,3.0 h组叶片局部发黄,6.0和12.0 h组叶片明显发黄和略微卷曲。叶片和块根的总酚(2.65和2.63 mg·g^(−1))和总黄酮(7.16和7.30 mg·g^(−1))、块根中的抗氧化能力(86.56%)均在T1+23组达到最大值。同时,UV-B辐射后施以黑暗处理可促进过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)活性的大幅提升,且在T1+23组达到最大,MDA质量摩尔浓度在T3+21组达到最高(7.21 mmol·g^(−1))。UV-B辐射和黑暗处理下调了黄酮合成通路基因(ThF3H、ThANS、ThCHS、ThANR等)和上调了氧化相关调节因子(CAT和SOD)的表达。【结论】UV-B辐射后增加黑暗处理可提高三叶青酚类物质质量分数、抗氧化能力及抗逆酶活性,且在T1+23组达最大值,同时下调黄酮合成酶基因表达,上调氧化应激相关基因的表达。 展开更多
关键词 三叶青 中波紫外线胁迫 多酚类物质 抗氧化能力 差异表达
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