不同柏壳生物源挥发性有机物成分的比较研究

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作者 董香君 周狄榕 +1 位作者 陈慧妍 杨潮锋 《分析科学学报》 北大核心 2025年第2期192-198,共7页

柏树球果具有怡人的香气,以球果壳或者种子壳为填充物的柏壳枕头具有改善睡眠的功效。为探明柏壳中的功效成分,本研究利用顶空提取及气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对柏木球果壳、侧柏球果壳及侧柏种子壳的生物源挥发性有机物(Biogenic v... 柏树球果具有怡人的香气,以球果壳或者种子壳为填充物的柏壳枕头具有改善睡眠的功效。为探明柏壳中的功效成分,本研究利用顶空提取及气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对柏木球果壳、侧柏球果壳及侧柏种子壳的生物源挥发性有机物(Biogenic volatile organic compounds,BVOCs)进行了提取和分析。在3种柏壳中共鉴定出33种BVOCs,萜烯类化合物含量最高,占总BVOCs的99%以上;柏木球果壳及侧柏球果壳中分别鉴定到21种及28种BVOCs,而侧柏种子壳仅鉴定到6种BVOCs。在柏木及侧柏球果壳中检测出17种共有组分:高丰度组分包括α-蒎烯、桧烯、(+)-3-蒈烯;中丰度组分包括α-侧柏烯、月桂烯、γ-松油烯、d-柠檬烯等;低丰度组份包括间伞花烃、β-石竹烯、乙酸龙脑酯、3-蒈烯。研究结果表明,侧柏球果壳和柏木球果壳中含有丰富的功效组分,为柏壳能够改善焦虑失眠提供了一定的参考价值。 展开更多

关键词 柏木球果壳 侧柏球果壳 侧柏种子壳 气相色谱-质谱联用技术 挥发性有机物

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磷化工区农田土壤中丰富和稀有细菌群落构建过程及功能差异

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作者 符卓良 程建华 唐翔宇 《土壤》 北大核心 2025年第1期141-148,共8页

运用高通量测序技术,研究了磷化工区盛行风向下方不同距离农田表层土壤中细菌丰富和稀有亚群的群落结构、构建过程和功能差异。结果表明:放线菌门(Actinobacteria)、变形菌门(Proteobacteria)和绿弯菌门(Chloroflexi)是研究区表层土壤... 运用高通量测序技术,研究了磷化工区盛行风向下方不同距离农田表层土壤中细菌丰富和稀有亚群的群落结构、构建过程和功能差异。结果表明:放线菌门(Actinobacteria)、变形菌门(Proteobacteria)和绿弯菌门(Chloroflexi)是研究区表层土壤细菌丰富和稀有亚群中的优势菌门。靠近化工区的高镉含量土样中(D1)两种细菌亚群的多样性低于其他距离较远的低镉含量样品,且亚群群落组成不同,但功能组成无明显差异。相关分析表明,土壤pH和镉含量是影响两种细菌亚群的主要因素,其中前者更为关键。稀有细菌亚群的群落和功能多样性均高于丰富细菌亚群。中性模型分析表明,丰富细菌亚群和稀有细菌亚群的群落构建过程分别由随机性和确定性过程主导。 展开更多

关键词 磷化工区 农田土壤 细菌亚群 群落构建 功能差异

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植物钙信号指示剂的研究进展

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作者 陆雯艳 刘金枝 +3 位作者 沈钰琪 亓果宁 柳参奎 任慧敏 《浙江农林大学学报》 北大核心 2025年第1期202-209,共8页

钙离子(Ca^(2+))是植物信号传递中重要的第二信使,对植物的生长发育和胁迫响应起着至关重要的作用。近年来,随着生物化学和分子生物学技术的不断进步,钙信号指示剂在植物研究中的应用取得了显著进展。本文综述了关于钙信号指示剂在植物... 钙离子(Ca^(2+))是植物信号传递中重要的第二信使,对植物的生长发育和胁迫响应起着至关重要的作用。近年来,随着生物化学和分子生物学技术的不断进步,钙信号指示剂在植物研究中的应用取得了显著进展。本文综述了关于钙信号指示剂在植物应用中的发展情况,包括钙指示剂的分类、钙信号检测原理及其在植物应用中的发展。钙信号指示剂的应用提供了可视化观察植物细胞内钙离子动态变化的有效手段,将植物细胞内的钙离子浓度转化为荧光信号。随着指示剂的发展,从最早的化学荧光指示剂逐步向基因编码钙指示剂过渡,能更加精确、实时、生物友好地观察到植物钙信号,对植物应对外界刺激时分子水平的应激手段有了更加深入的认识,成为研究植物应激分子水平上的重要生理指标。同时,本文还对钙信号指示剂在植物研究中存在的挑战和未来发展方向进行了讨论,指出了植物钙信号研究的特殊性与植物细胞中孵育钙指示剂的挑战性,以期为进一步推动该领域的研究提供参考和启示。 展开更多

关键词 钙离子 钙信号指示剂 植物 生长发育 胁迫响应

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浙江樟3种组织及不同区段木材挥发性组分差异分析 被引量：3

4

作者 李子安 赵珍妮 +2 位作者 张俊红 楼雄珍 童再康 《林业与环境科学》 2022年第2期23-32,共10页

为探究浙江樟Cinnamomum chekiangense组织部位间、单株间和木材不同区段间挥发性成分的差异,提取和鉴定浙江樟叶片、干皮与木质部3种组织部位中的挥发性成分,以代表性原则采集样品,利用固相微萃取法-气相色谱-质谱联用法(SPME-GC-MS)... 为探究浙江樟Cinnamomum chekiangense组织部位间、单株间和木材不同区段间挥发性成分的差异,提取和鉴定浙江樟叶片、干皮与木质部3种组织部位中的挥发性成分,以代表性原则采集样品,利用固相微萃取法-气相色谱-质谱联用法(SPME-GC-MS)结合计算机自动检索辅助人工解析挥发性成分,通过峰面积归一法测定其相对含量。从7年生浙江樟3种组织部位中共检测出主要挥发性成分134种。其中,干皮83种,独有成分40种;叶片77种,独有38种;木质部45种,9种是独有的。成分种类分析知,浙江樟不同组织部位挥发性成分包括烯烃类、烷烃类、醇类和酯类等9种类别;相对含量分析知,浙江樟各组织部位挥发性成分均以烯烃类化合物为主,组分数量和相对含量均远高于其它8类成分。通过进一步分析知,7年生浙江樟单株间挥发性成分有明显差异,24年生浙江樟木材的实际生长时间对木质部挥发性有机物的种类和相对含量也有明显影响。综合表明浙江樟不同组织部位间、单株间、不同区段木材间挥发性成分种类与组成特征异同明显,主要功能性组分与相对含量均存在一定差异。 展开更多

关键词 挥发性有机物 固相微萃取 气相色谱-质谱 浙江樟

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浙江平阳县典型绿竹林土壤质量分析

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作者 邱金莲 王刚 +2 位作者 郭明阳 史文辉 应叶青 《竹子学报》 2022年第1期60-65,共6页

为科学评价浙江平阳县地区绿竹林土壤环境质量,选取平阳县典型绿竹林样地,取样分析了土壤物理和化学性质及土壤酶活性,并采用主成分法对土壤因子进行分析。结果显示:研究区绿竹林土壤容重在1.37~1.51 g·cm^(-3),含水率在24.33%~27.... 为科学评价浙江平阳县地区绿竹林土壤环境质量,选取平阳县典型绿竹林样地,取样分析了土壤物理和化学性质及土壤酶活性,并采用主成分法对土壤因子进行分析。结果显示:研究区绿竹林土壤容重在1.37~1.51 g·cm^(-3),含水率在24.33%~27.67%,孔隙度在43.15%~48.08%之间。土壤全氮、全磷、全钾含量分别在1.09~2.29 g·kg^(-1)、0.38~0.61 g·kg^(-1)、21.74~34.41 g·kg^(-1)。土壤碱解氮、有效磷和速效钾含量分别在100.98~119.60 mg·kg^(-1)、2.25~4.94 mg·kg^(-1)和150.56~213.56 mg·kg^(-1)之间。土壤脲酶、酸性磷酸酶、硝酸还原酶、亚硝酸还原酶活性分别在1175.09~1332.93μg·d^(-1)·g^(-1)、6.93~9.22 mg·d^(-1)·g^(-1)、19.42~25.52μg·d^(-1)·g^(-1)、21.66~28.85μg·d^(-1)·g^(-1)之间。主成分分析结果显示:绿竹林土壤前5个主分量累计方差贡献率达85.18%。绿竹林土壤中第1和第2主分量反应原始数据信息的61.15%,其中以全氮、全磷、碱解氮、有效磷、速效钾、全钾、有机质、脲酶的特征向量绝对值较大。土壤有效养分含量是该区绿竹土壤肥力最主要的限制性因素,土壤有机质含量也是影响竹林土壤肥力的重要指标。因此,绿竹林经营需根据需肥规律科学施肥,提高肥料利用率,避免面源污染和土壤环境质量恶化。 展开更多

关键词 绿竹林 土壤因子 主成成分分析

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施肥旱作农田土壤中人类病原菌群落组成及动态变化特征 被引量：2

6

作者 齐明慧 程建华 唐翔宇 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期98-108,共11页

采集浙江省杭州、嘉兴、衢州、金华、龙游5个地区长期施用鸡粪、猪粪或化肥的农田土壤进行室内培养实验,然后采用高通量测序及序列比对方法分析供试土壤细菌和人类病原菌(human pathogenic bacteria,HPB)群落组成,旨在进一步探究施用粪... 采集浙江省杭州、嘉兴、衢州、金华、龙游5个地区长期施用鸡粪、猪粪或化肥的农田土壤进行室内培养实验,然后采用高通量测序及序列比对方法分析供试土壤细菌和人类病原菌(human pathogenic bacteria,HPB)群落组成,旨在进一步探究施用粪肥后土壤中HPB群落组成差异及动态变化特征。结果表明:在160个供试土壤样品和2种粪肥样品中共比对到75种HPB,其中优势HPB为巨大芽孢杆菌(Bacillus_megaterium_QM_B1551,24.2%)和拜氏梭菌(Clostridium_beijerinckii_NCIMB_8052,23.1%);施用猪粪处理的土壤中细菌和HPB的香农(Shannon)指数均有所降低,而施用鸡粪或化肥处理的土壤中细菌和HPB多样性无明显变化。主坐标分析结果表明,施用粪肥处理的土壤细菌群落组成与未施肥对照之间具有显著差异,尤其是施用猪粪处理差异最显著(P<0.001);土壤样品间共有HPB占所有HPB的22.7%;施用粪肥处理的土壤中大部分HPB的相对丰度高于未施肥对照,并随培养时间的延长而不断下降。方差分解分析结果表明,土壤理化性质、细菌群落及两者交互作用是土壤中HPB变异的重要因素。综上所述,施用粪肥处理的土壤中HPB的变化特征主要受肥料类型、土壤类型、土壤理化性质及固有细菌群落的影响。 展开更多

关键词 人类病原菌 粪肥 细菌群落 土壤 动态变化

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闽楠bZIP基因家族鉴定和脱落酸处理下的表达分析 被引量：2

7

作者 杨勇 张俊红 +3 位作者 韩潇 张毓婷 杨琪 童再康 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期275-285,共11页

【目的】对闽楠Phoebe bournei bZIP(PbbZIP)转录因子家族成员鉴定,分析其对脱落酸(ABA)信号的响应水平。【方法】基于生物信息学方法,对PbbZIP基因家族进行了全基因组鉴定,分析其蛋白理化特性、基因结构、进化关系、启动子顺式作用元件... 【目的】对闽楠Phoebe bournei bZIP(PbbZIP)转录因子家族成员鉴定,分析其对脱落酸(ABA)信号的响应水平。【方法】基于生物信息学方法,对PbbZIP基因家族进行了全基因组鉴定,分析其蛋白理化特性、基因结构、进化关系、启动子顺式作用元件和ABA处理下的表达分析。【结果】从闽楠12条染色体共鉴定出63个PbbZIPs基因,分为12亚族,不同亚族基因结构和基序差异显著,但同亚族高度保守。PbbZIP基因多数定位在细胞核,其编码蛋白长度为110~835个氨基酸,等电点为4.48~11.95,疏水性为−1.19~−0.19。分布于12条染色体的27对PbbZIPs基因存在共线性关系,是PbbZIP基因家族扩张的主要模式。PbbZIP基因上游启动子区域存在多种与非生物胁迫相关的作用元件,其中ABA、水杨酸、茉莉酸甲酯的响应元件较多。基因表达分析结果表明:2 mmol·L^(−1)ABA处理闽楠1~72 h,17个PbbZIPs基因在叶和根中被ABA信号不同程度地诱导表达,普遍上调,且根基因表达水平普遍低于叶片。【结论】63个PbbZIPs基因序列高度保守,不同亚族间基因结构、染色体定位和保守基序有进化多样性和差异性;叶和根中PbbZIP基因不同程度地响应ABA信号,参与调控其他非生物过程。 展开更多

关键词 闽楠 bZIP家族 系统进化 脱落酸(ABA) 表达分析

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降水梯度带共有种银白杨适应策略的区域分异规律 被引量：1

8

作者 唐宸宇 张博纳 +3 位作者 汤璐瑶 叶琳峰 谢江波 王忠媛 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1789-1800,共12页

【目的】揭示共有种银白杨对环境适应策略的区域分异规律,可为气候变化背景下预测植物适应潜力提供数据支持。【方法】沿中国东南至西北降水梯度带选取9处国有林场,测量银白杨水碳相关的18个功能性状,采用性状网络与主成分分析等方法,... 【目的】揭示共有种银白杨对环境适应策略的区域分异规律,可为气候变化背景下预测植物适应潜力提供数据支持。【方法】沿中国东南至西北降水梯度带选取9处国有林场,测量银白杨水碳相关的18个功能性状,采用性状网络与主成分分析等方法,量化性状的区域分异规律,阐明驱动性状变异的主要气候因子及其生境适应策略。【结果】(1)各性状的变异系数为12.09%~60.35%,其中光合生理及气孔相关性状的变异水平普遍高于其他性状。(2)生长季光合有效辐射、生长季平均气温、年均降水量及干燥度指数对性状变异的影响分别为35.45%、28.37%、19.36%、16.93%,其中生长季光合有效辐射是驱动性状变异最主要的气候因子。(3)性状网络的中心性状为最大净光合速率。【结论】在降水梯度带银白杨适应策略存在差异,由湿润/半湿润区至干旱区,其碳经济策略由相对保守型向获取型转变。 展开更多

关键词 降水梯度带 银白杨 植物功能性状 适应策略 性状耦合

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石蒜体胚发生过程的细胞学和生理特性 被引量：1

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作者 陈依宁 雷雪 +1 位作者 李欣 高燕会 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期243-251,共9页

【目的】探究石蒜‘梦幻少女’Lycoris chinensis×radiata‘Astro Girl’体胚发生过程中的细胞学和生理生化指标的变化规律,明确‘梦幻少女’体胚发生的特征,提高石蒜属Lycoris植物种球繁殖效率,为石蒜属新品种工厂化生产提供技术... 【目的】探究石蒜‘梦幻少女’Lycoris chinensis×radiata‘Astro Girl’体胚发生过程中的细胞学和生理生化指标的变化规律,明确‘梦幻少女’体胚发生的特征,提高石蒜属Lycoris植物种球繁殖效率,为石蒜属新品种工厂化生产提供技术支撑。【方法】采用石蜡切片、酶联免疫吸附测定技术和超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)技术,测定了0~40 d‘梦幻少女’体胚发生过程中的形态和组织学特征、体胚可溶性淀粉及总蛋白质、抗氧化酶活性和多胺等生理生化指标的变化。【结果】①体胚发生过程中,从球形胚到短暂膨大约20 d,进一步分化为心形胚、棒状胚和子叶胚,膨大的球形胚后期或心形胚时期基部会形成维管束。②体胚发生过程中,总蛋白质和淀粉、抗氧化酶活性发生显著变化,淀粉变化与球形胚的形成呈正相关,与体胚形态建成和体胚成熟呈负相关。总蛋白质、过氧化物酶(POD)活性及过氧化氢酶(CAT)活性变化与子叶胚形成呈正相关,与子叶胚的成熟发育呈负相关。超氧化物歧化酶(SOD)活性变化与球形胚、子叶胚时期呈负相关,与心形胚、棒状胚时期呈正相关,表明储能作用的淀粉、蛋白质及与植物生理密切相关的抗氧化酶对体胚发生起着重要的作用。③体胚发生过程中多胺氧化酶(PAO)活性和多胺(PAs)变化显著,腐胺(Put)、精胺(Spm)和亚精胺(Spd)的变化共同决定多胺的变化趋势,多胺和多胺氧化酶活性主要在体胚分化早期发生明显积累,与球形胚分化呈正相关;在子叶胚的形成期,精胺与亚精胺呈正相关;在子叶胚成熟期,腐胺、精胺和亚精胺3个指标呈现腐胺先下降后上升,精胺、亚精胺先上升后下降的趋势。【结论】在‘梦幻少女’体胚发生的0~40 d,体胚形态经历了原胚—球形胚—心形胚—棒状胚—子叶胚的过程。其中,生理特性变化显著,淀粉的积累或消耗可能是球形胚形成、体胚后续形态发育与成熟的重要影响因素。在子叶胚形成及成熟时期,总蛋白质、过氧化酶活性和多胺的变化可能发挥着相应密切的联合作用。多氨氧化酶活性与多胺的活跃积累可能有利于体胚早期发育。 展开更多

关键词 石蒜属 愈伤组织 体细胞胚 生理生化

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普通油茶种仁发育过程的代谢组学分析 被引量：1

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作者 龙雪燕 闫道良 +2 位作者 李万春 郑炳松 胡玉玲 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期116-126,共11页

【目的】了解普通油茶(Camellia oleifera)果实发育过程中种仁代谢物的变化。【方法】以普通油茶不同发育阶段(F1~F5)的种仁为材料,结合液相色谱与质谱联用(LC-MS/MS)代谢组学技术,分析普通油茶种仁发育过程中代谢物的变化规律。【结果... 【目的】了解普通油茶(Camellia oleifera)果实发育过程中种仁代谢物的变化。【方法】以普通油茶不同发育阶段(F1~F5)的种仁为材料,结合液相色谱与质谱联用(LC-MS/MS)代谢组学技术,分析普通油茶种仁发育过程中代谢物的变化规律。【结果】共鉴定到15类1006种代谢物,主要包括脂类和类脂分子,苯丙素类和聚酮类,有机酸及其衍生物,芳烃类,有机氧化合物,杂环化合物,核苷、核苷酸和类似物;被注释的主要代谢通路包括代谢途径、次生代谢产物的生物合成、植物次生代谢产物的生物合成、氨基酸的生物合成、2-草酸代谢。不同发育时期普通油茶种仁的代谢物有显著差异,F1和F2的种仁代谢物最少,仅有3-甲基-1-(2,4,6-三羟基苯基)-1-丁酮、L-谷胱甘肽、蔗糖,说明种仁前期缓慢生长;F3的种仁代谢物最多,尤其是苯丙素类和聚酮类、芳烃类、脂类和类脂分子、有机酸及其衍生物、有机杂环化合物的相对含量变化明显,其中黑色素、酪氨酸、苯丙氨酸、L-谷胱甘肽、1-甲基鸟嘌呤、3,4-二氢-2H-1-苯并吡喃-2-酮、(S)-匹诺森布林、山柰酚-3-O-芸香糖苷的相对含量较高,说明其在果实快速膨大期种仁成型发挥重要作用;F4和F5的代谢物逐渐减少,种仁进入油脂积累期。【结论】本研究运用代谢组学方法了解普通油茶果实发育过程中种仁代谢物的变化规律,可为普通油茶果优质丰产栽培和适时采收提供理论依据。 展开更多

关键词 普通油茶 果实发育进程 种仁 代谢组

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NAA对多花黄精根发育影响的解剖学研究

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作者 郭英纯 陈凯 +5 位作者 邹辉 石艳 韩之刚 李聪 斯金平 陈东红 《浙江林业科技》 2024年第4期43-50,共8页

本研究以多花黄精Polygonatum cyrtonema的根为研究对象,在形态学和细胞学水平探讨多花黄精根的发育及施加外源生长素对根生长的影响。结果表明:不同NAA浓度对多花黄精种子萌发无影响,种子萌发率均为20%~30%;不同NAA浓度对多花黄精根的... 本研究以多花黄精Polygonatum cyrtonema的根为研究对象,在形态学和细胞学水平探讨多花黄精根的发育及施加外源生长素对根生长的影响。结果表明:不同NAA浓度对多花黄精种子萌发无影响,种子萌发率均为20%~30%;不同NAA浓度对多花黄精根的生长影响显著,随着NAA浓度的升高(0.50、1.00、2.00 mg·L^(-1)),与对照(不添加NAA)相比,多花黄精种子来源的根数量分别增多约11、13、16条,根长缩短约10、15、19 cm,多花黄精根茎来源的根数量增多更为明显,约15、31、36条,根长缩短约4、6、7 cm,而且通过促进细胞体积增大和数目增多使根直径增粗约300、500、800μm。另外,多花黄精根的外皮层和内皮层细胞壁增厚不明显,不同于典型的单子叶植物根结构。本研究为了解生长素对多花黄精根的生长发育和形态结构方面的调控作用提供了细胞学基础。 展开更多

关键词 多花黄精 根 生长素 种子 根状茎

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毛白杨次生维管系统再生过程的基因表达 被引量：1

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作者 唐芳 赵树堂 +2 位作者 王丽娟 宋学勤 卢孟柱 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第9期52-65,共14页

【目的】次生维管系统再生能够在树干维管系统丧失后通过去分化、再分化或转分化等组织修复手段实现维管组织的再生。为了鉴定和研究次生维管系统发育相关的重要基因和调控元件,本文利用毛白杨次生维管再生系统,分析了不同再生时期的基... 【目的】次生维管系统再生能够在树干维管系统丧失后通过去分化、再分化或转分化等组织修复手段实现维管组织的再生。为了鉴定和研究次生维管系统发育相关的重要基因和调控元件,本文利用毛白杨次生维管再生系统,分析了不同再生时期的基因表达模式,为进一步揭示木材形成的基因调控机制奠定基础。【方法】将4年生毛白杨无性系在形成层活动旺盛期进行环剥取样。对剥皮后的树皮内侧和树干表面的样本,以及再生第7、10、14、18和21天5个不同时期获取的再生材料进行高通量转录组分析,并利用基因共表达分析(WGCNA)方法,得到与不同再生时期密切相关的模块,并对这些特异表达的基因进行表达网络和生物学功能分析。【结果】将第0天(剥皮当天)树皮内侧样本与树干表面样本、再生第7天样本与树干表面样本,以及相邻再生时期的样本进行表达差异分析。对得到的14202个差异基因进行WGCNA分析,构建基因共表达网络,获得与维管再生过程相关的10个共表达模块。其中,Grey60模块的基因在再生第7天样本和树皮内侧样本中特异表达,主要涉及DNA复制、有丝分裂、细胞分裂和微管运动等功能;该模块还含有大量与表观遗传调控、细胞周期相关的基因,它们在再生第7天的高表达可能激活了脱分化木质部细胞的增殖和组织类型的改变,使其获得再分化能力。此外,Pink模块的基因在第0天成熟维管组织样本中的表达量极低,但在再生过程中表达呈上升趋势,到第21天达到最高值;这些基因主要参与细胞分裂、细胞壁修饰、韧皮部发育、碳水化合物代谢、DNA的转录调控等相关的生物学途径。Pink模块中与韧皮部分化相关的标记基因,比如APL、NAC45/86、DOF、BSPA、PP2和SUS的表达被重新激活,与调节形成层细胞增殖和分化的CLE41/44和CLV1一样,表达量都是从再生第10天开始逐渐增加。到次生维管系统再生后期的第18天和第21天,形成层已经完成了结构重构并能进行细胞的分裂、分化,此时木质部标记基因和次生壁调控因子有较高的表达。【结论】毛白杨次生维管系统再生早期,脱分化的木质部细胞通过表观遗传和细胞周期调控重新获得细胞分生能力;之后,韧皮部的细胞分化程序被启动,再生形成层开始细胞增殖和分化;到再生后期,通过相关基因调控,形成层再分化木质部和韧皮部。通过对次生维管组织再生过程中基因的表达分析和调控模块的鉴定,进一步验证了次生维管再生的遗传调控基础,也可为揭示植物维管组织再生的调控机制奠定基础。 展开更多

关键词 杨树 次生维管系统 再生 基因表达 WGCNA

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山核桃赤霉素氧化酶基因CcGA3ox的克隆和功能分析 被引量：5

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作者 魏广利 梁璧 +4 位作者 张佳琦 胡恒康 黄有军 娄和强 张启香 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期13-28,共16页

【目的】赤霉素3-氧化酶(gibberellin 3-oxidases,GA3ox)是赤霉素(GAs)生物合成途径中关键酶之一,对山核桃(Carya cathayensis)中CcGA3ox基因进行克隆,并进行序列分析和功能验证。【方法】以山核桃体细胞胚为材料,提取RNA,采用PCR扩增技... 【目的】赤霉素3-氧化酶(gibberellin 3-oxidases,GA3ox)是赤霉素(GAs)生物合成途径中关键酶之一,对山核桃(Carya cathayensis)中CcGA3ox基因进行克隆,并进行序列分析和功能验证。【方法】以山核桃体细胞胚为材料,提取RNA,采用PCR扩增技术,克隆山核桃CcGA3ox基因编码区全长;对序列进行生物信息学分析。为验证基因功能,通过同源重组技术构建具有强启动子的35S::CcGA3ox::GFP过表达载体,以核桃体细胞胚为转化材料,利用农杆菌介导法进行遗传转化;利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析山核桃CcGA3ox基因在转基因阳性核桃植株中的相对表达量。采用紫外分光光度计检测植株中叶绿素含量,并分析其差异。【结果】山核桃CcGA3ox基因开放阅读框(ORF)全长为1 116 bp,编码371个氨基酸。对CcGA3ox氨基酸序列分析发现,其含有2OG-FeⅡ-Oxy结构域。系统进化树显示,CcGA3ox与薄壳山核桃CiGA3ox亲缘关系最近,与核桃JrGA3ox亲缘关系较近。对核桃体细胞胚进行遗传转化、荧光检测及PCR验证表明,35S::CcGA3ox::GFP过表达载体被成功转入核桃体胚中。核桃阳性再生植株与对照植株相比,株高明显增高;qRT-PCR结果表明,CcGA3ox基因相对表达量显著增加。同时,过表达CcGA3ox基因可以降低核桃阳性再生植株中叶绿素含量。【结论】山核桃CcGA3ox基因在核桃生长过程中对株高调控起关键作用。 展开更多

关键词 山核桃 赤霉素3-氧化酶基因(GA3ox) 遗传转化 功能分析

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动物粪便对紫色土中人类致病菌传播的影响 被引量：1

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作者 齐明慧 程建华 唐翔宇 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期44-52,共9页

畜禽粪肥进入土壤会促进抗生素耐药性的传播,在传播过程中一旦人类致病菌获得抗生素耐药性,将对人类健康造成巨大威胁。本研究采用高通量测序技术,探究施加猪粪或鸡粪肥后紫色土中致病菌水平及其与抗生素抗性基因的共生关系。结果表明,... 畜禽粪肥进入土壤会促进抗生素耐药性的传播,在传播过程中一旦人类致病菌获得抗生素耐药性,将对人类健康造成巨大威胁。本研究采用高通量测序技术,探究施加猪粪或鸡粪肥后紫色土中致病菌水平及其与抗生素抗性基因的共生关系。结果表明,与未施肥土壤相比,施加粪肥可明显改变土壤细菌群落结构。施加猪粪土壤中的致病菌丰度显著高于施加鸡粪土壤与未施肥土壤。施加粪肥后土壤中致病菌丰度随培养时间增加而减少,可能与土壤生态系统本身的自我净化功能有关。羊布鲁氏杆菌、毕氏梭菌、产气荚膜梭菌与多种抗生素抗性基因显著相关。致病菌相对丰度变化与细菌群落结构有显著相关关系(P<0.01)。细菌群落与土壤理化性质对致病菌相对丰度变化的解释率可达70.6%,可知二者是造成致病菌相对丰度变化的主要因素。综上所述,施加畜禽粪便可增加土壤中致病菌丰度与多样性,同时致病菌与多种抗生素抗性基因存在共生关系。 展开更多

关键词 紫色土 粪肥 人类致病菌(HPB) 抗生素抗性基因(ARGs) 高通量测序

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无子瓯柑E3泛素连接酶基因CsRNF217的克隆与功能分析 被引量：1

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作者 孙明艳 叶潇铃 +3 位作者 蔡子涵 张林 张敏 张迟 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期157-168,共12页

【目的】无子瓯柑是其野生型的雄性不育突变体。基于转录组-代谢组关联分析,克隆无子瓯柑E3泛素连接酶基因CsRNF217,分析其序列特征、表达模式、亚细胞定位及基因功能。【方法】采用生物信息学方法分析无子瓯柑CsRNF217基因序列特征;利... 【目的】无子瓯柑是其野生型的雄性不育突变体。基于转录组-代谢组关联分析,克隆无子瓯柑E3泛素连接酶基因CsRNF217,分析其序列特征、表达模式、亚细胞定位及基因功能。【方法】采用生物信息学方法分析无子瓯柑CsRNF217基因序列特征;利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)分析时空表达模式;根据转基因烟草表型特征分析基因功能,采用烟草瞬时表达分析其亚细胞定位。【结果】无子瓯柑CsRNF217基因cDNA全长768 bp,编码255个氨基酸,具有RING型E3家族典型结构域。qRT-PCR结果显示,无子瓯柑CsRNF217基因在雄蕊中表达量最高,在小孢子发育后期上调表达。过表达转基因烟草的种子数量和花粉活力显著下降。烟草叶片瞬时表达的荧光信号特异位于细胞核。【结论】无子瓯柑CsRNF217基因编码RING型E3,定位于细胞核,在雄蕊中表达量最高,在花粉发育晚期上调表达,推测对无子瓯柑和过表达转基因烟草的花粉发育过程可能起到负向调控作用。 展开更多

关键词 无子瓯柑 E3泛素连接酶 雄性不育 亚细胞定位 遗传转化

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不同施肥处理对我国紫色土丘陵区坡耕地土壤中致病菌组成的影响 被引量：1

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作者 竺雨杰 程建华 唐翔宇 《浙江林业科技》 2023年第2期1-7,共7页

施用有机肥增加土壤肥力的同时,导致致病菌在土壤中富集,使土壤成为致病菌传播的主要媒介。以不施肥、单施猪粪、猪粪与氮肥混施和猪粪与氮、磷、钾肥混施这4种处理进行为期13 a的施肥试验,采用高通量测序技术探讨各个施肥处理土壤中致... 施用有机肥增加土壤肥力的同时,导致致病菌在土壤中富集,使土壤成为致病菌传播的主要媒介。以不施肥、单施猪粪、猪粪与氮肥混施和猪粪与氮、磷、钾肥混施这4种处理进行为期13 a的施肥试验,采用高通量测序技术探讨各个施肥处理土壤中致病菌组成和影响因素。结果表明,土壤样品中共检出18个致病菌属,对照组中致病菌属的检出率为27.78%~33.33%,与之相比,在有机肥处理中致病菌属的检出率处在较高水平,为38.89%~55.56%;耻垢分枝杆菌Mycobacterium smegmaits、魏登施泰滕芽孢杆菌Bacillus weihenstephanensis和巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium为紫色土丘陵区坡耕地土壤中最为普遍的致病菌,占总丰度的45.5%~80.0%,其中耻垢分枝杆菌在所有样品中均有检出。主坐标分析和单因素方差分析结果表明,不同施肥处理土壤中致病菌的组成和相对丰度没有显著差异。普氏分析和冗余分析结果表明,土壤理化性质可能是紫色土丘陵区坡耕地土壤中致病菌组成的重要影响因子。综上所述,本研究为长期施用猪粪的紫色土丘陵区坡耕地土壤中致病菌的组成及影响因素提供理论依据。 展开更多

关键词 紫色土 猪粪 致病菌 高通量测序 相关性分析

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极危植物九龙山榧的大小孢子发生和雌雄配子体发育研究 被引量：1

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作者 冉钰岑 何芳 +4 位作者 刘菊莲 郑子洪 郑伟成 胡江琴 金孝锋 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期940-949,共10页

【目的】九龙山榧Torreya jiulongshanensis为浙江特有的古老孑遗植物,数量极少,为国家Ⅱ级重点保护野生植物,也被列为浙江省极小种群保护植物。系统观测九龙山榧大、小孢子的发生和雌、雄配子体的发育过程,有助于发现其配子是否发育异... 【目的】九龙山榧Torreya jiulongshanensis为浙江特有的古老孑遗植物,数量极少,为国家Ⅱ级重点保护野生植物,也被列为浙江省极小种群保护植物。系统观测九龙山榧大、小孢子的发生和雌、雄配子体的发育过程,有助于发现其配子是否发育异常及导致结籽率低下的原因。【方法】以九龙山榧模式产地的雌、雄植株为研究对象,通过定期观测和取样,采用石蜡切片法对其大、小孢子的发生,雌、雄配子体的发育过程进行切片、染色和观察。【结果】(1)小孢子叶球于8月中旬开始分化,8月下旬分化形成次生造孢细胞,11月中旬形成小孢子母细胞,翌年2月下旬进入减数分裂期,3月中旬形成游离小孢子细胞,于3月末逐渐成熟;成熟花粉粒为双核,无气囊。小孢子囊的发育类型为基本型,孢质分裂方式为同时型,四分体有四面体形和左右对称形。(2)雄配子体从3月中下旬开始发生,到7月底形成精子,整个过程历时约4个月。(3)翌年3月下旬,大孢子叶球每个苞叶的叶腋基部直立着生2枚胚珠;大孢子母细胞于4月下旬经过减数分裂Ⅰ和减数分裂Ⅱ形成4个直列大孢子,5月中旬珠孔端的3个大孢子退化,合点端的大孢子最终发育成为雌配子体。(4)九龙山榧有2个单生型椭圆形的颈卵器,从传粉到受精历时约7个月。【结论】九龙山榧雌雄生殖系统发育的周期均较红豆杉科Taxaceae其他种更长,其冗长的生殖周期、复杂的生殖过程和雌性生殖系统发育明显滞后于雄性生殖系统,加之种群个体数量极度稀少(1雌株、2雄株)是造成结籽率低下、自然更新困难的主要原因。 展开更多

关键词 九龙山榧 小孢子发生 雄配子体 大孢子发生 雌配子体

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2种栽培环境对铁皮石斛内生细菌多样性的影响 被引量：6

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作者 余望寅 姚冠 +3 位作者 扎西拉姆 普琼 刘京晶 周湘 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期284-290,共7页

【目的】揭示不同栽培环境对铁皮石斛Dendrobium catenatum内生细菌群落结构的影响,解析与石斛多糖含量存在潜在关联的功能菌种。【方法】针对温室人工基质培养和仿野生立木附生培养2种栽培体系下的铁皮石斛C9品系根、茎、叶等各部组织... 【目的】揭示不同栽培环境对铁皮石斛Dendrobium catenatum内生细菌群落结构的影响,解析与石斛多糖含量存在潜在关联的功能菌种。【方法】针对温室人工基质培养和仿野生立木附生培养2种栽培体系下的铁皮石斛C9品系根、茎、叶等各部组织内生细菌,采用Illumina测序平台的Miseq进行高通量测序分析其菌落结构和多样性,同时利用逐步回归法分析内生细菌分布与组织多糖质量分数的关联性。【结果】铁皮石斛在2种栽培环境不同组织中的菌群结构差异显著(P<0.05),附生立木仿野生环境比温室环境下物种丰富度更高。同时,根部所含分类操作单元(OTUs)数量最多(112~630个),叶部则最少(28~73个)。其中,厚壁菌门Firmicutes(16.7%~34.9%)、拟杆菌门Bacteroidetes(8.7%~35.6%)和变形菌门Proteobacteria(15.9%~42.0%)的OTUs占优势。从菌种生理功能上看,固氮相关的菌种如弗兰克菌科Frankiaceae在树培环境下相对丰度更高,推测可能受树培寡氮环境的影响使固氮菌富集。逐步回归分析结果显示:不动杆菌Acinetobacter在根、茎、叶不同组织中的相对丰度与多糖质量分数变化关联度最大,其次为假单胞菌Pseudomonas。【结论】铁皮石斛内生细菌资源相当丰富,而栽培方式影响菌群分布,且与石斛多糖质量分数具有关联性。 展开更多

关键词 林木育种学 植物内生细菌 多样性 固氮 菌群分析 石斛多糖

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铁皮石斛WOX家族基因在生长发育中的功能分析 被引量：5

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作者 陈凯 王灏 +5 位作者 陈燚婷 符可 韩之刚 李聪 斯金平 陈东红 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期700-714,共15页

WUSCHEL-Related Homeobox(WOX)家族是植物特有的一类转录因子,在干细胞维持和器官形态建成等发育过程中发挥重要的调控作用。兰科珍稀名贵中药植物铁皮石斛(Dendrobium catenatum)具有独特的附生生活方式和生长发育特性,对其WOX家族基... WUSCHEL-Related Homeobox(WOX)家族是植物特有的一类转录因子,在干细胞维持和器官形态建成等发育过程中发挥重要的调控作用。兰科珍稀名贵中药植物铁皮石斛(Dendrobium catenatum)具有独特的附生生活方式和生长发育特性,对其WOX家族基因功能探究有助于进一步了解铁皮石斛发育的保守性和特异性。本研究对铁皮石斛WOX家族基因(DcWOX)进行了系统进化、组织表达模式、异源表达功能检测等分析。结果显示,铁皮石斛WOX家族基因可分为3个进化支,具有显著差异的组织表达谱;在转基因拟南芥中,DcWOX4过表达导致植株显著矮小,叶缘羽状深裂,花期推迟2周;DcWOX9过表达导致植株矮化,叶缘锯齿状,开花推迟1周,强表型植株雌雄蕊均不育;DcWOX11过表达导致叶缘向下卷曲;DcWOX4/9/11过表达拟南芥叶片形态建成异常与TCP家族基因和CUC家族基因的下调以及KNOX家族基因的上调有关;花期推迟与FT、SOC1和CO等早花基因的下调有关。因此,本研究表明铁皮石斛WOX家族基因在调控植株形态建成、叶发育、开花时间和育性等方面具有重要功能,进一步拓展了对WOX家族基因的功能了解,为深入探讨兰科植物进化与发育的保守性和独特性提供参考。 展开更多

关键词 铁皮石斛 WOX基因家族 转基因拟南芥 生长发育

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银腺杨84K茎段瞬时转化体系的建立 被引量：3

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作者 李晓军 安轶 +2 位作者 黄李超 曾为 卢孟柱 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第4期82-89,共8页

【目的】我国需要大量人工林来满足木材需求,而速生林的木材品质有待改良。研究木材形成的基因调控是材性改良的基础。为加速鉴定木材形成相关基因的研究,建立一种快速、便捷、高效的瞬时转化体系尤为重要。【方法】采用显微切片,观察1... 【目的】我国需要大量人工林来满足木材需求,而速生林的木材品质有待改良。研究木材形成的基因调控是材性改良的基础。为加速鉴定木材形成相关基因的研究,建立一种快速、便捷、高效的瞬时转化体系尤为重要。【方法】采用显微切片,观察1年生银腺杨84K休眠茎段水培下的形成层活动规律;以其作为瞬时转化受体,增强型绿色荧光蛋白(eYGFP)作为报告基因,构建表达载体,采用农杆菌介导真空渗透侵染方法进行84K茎段的瞬时转化。并通过L9(34)正交试验对农杆菌GV3101侵染浓度、真空渗透侵染时间、真空渗透侵染次数及侵染后培养时间进行优化。【结果】银腺杨84K 1年生枝条室温水培条件下可以解除休眠,形成层在水培15天左右活动已比较旺盛,并出现新分化的导管。培养约30天,木质部大量积累。这说明枝条经1个月时间可以完成形成层的分化、木质部的形成等木材形成的全过程。从形态上观察,形成层、木质部和韧皮部的生长发育过程与正常树木没有差异。采用农杆菌介导真空渗透侵染方法,茎段及切片在激发光下可在形成层区域观察到绿色荧光,说明茎段转化成功。进一步通过正交试验分析,表明4个转化条件对转化率的影响依次为:侵染后水培天数>真空渗透侵染时间>菌液浓度>真空渗透侵染次数。农杆菌介导真空渗透瞬时转化银腺杨84K茎段的最优组合是农杆菌重悬液浓度OD600为0.9、真空渗透侵染20 min、真空渗透侵染2次、侵染后水培15天。【结论】建立了农杆菌介导的银腺杨84K茎段真空渗透侵染瞬时转化体系。这一体系可快速鉴定参与维管组织分化相关基因的功能,有助于揭示木质部发育的调控机制。同时该方法也可为研究其他木本植物的木材形成相关基因提供借鉴。 展开更多

关键词 银腺杨84K 茎段 瞬时转化 农杆菌介导 真空渗透侵染 eYGFP瞬时表达

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