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鸡WDR72基因的克隆表达及其相应抗体的制备
1
作者
李炳熠
刘长国
《中国家禽》
北大核心
2012年第14期31-34,共4页
WDR72是课题组前期初步鉴定的蛋壳强度相关基因,它是个新基因。本文首先参考GenBank中原鸡(G.gallus)的WDR72基因序列设计3对引物,从仙居鸡子宫组织的cDNA中克隆WDR72基因,并构建家鸡WDR72编码基因的pEGFP-N1真核表达重组质粒;其次,将...
WDR72是课题组前期初步鉴定的蛋壳强度相关基因,它是个新基因。本文首先参考GenBank中原鸡(G.gallus)的WDR72基因序列设计3对引物,从仙居鸡子宫组织的cDNA中克隆WDR72基因,并构建家鸡WDR72编码基因的pEGFP-N1真核表达重组质粒;其次,将所克隆的WDR72基因的3′端编码序列构建到原核表达质粒pET-28b,然后利用0.4mmol/L的IPTG于37℃诱导表达WDR72的C端肽链;最后利用500mmol/L的咪唑纯化该肽链,并免疫大白兔制备wdr72特异性多抗。上述工作将为深入研究WDR72基因的生物学特性及其生化功能提供基础。
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关键词
鸡
WDR72
基因克隆
原核表达与纯化
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题名
鸡WDR72基因的克隆表达及其相应抗体的制备
1
作者
李炳熠
刘长国
机构
浙江
农林大学
亚热带森林培育国家重点实验室培育基地
浙江
农林大学
动物
科技
学院
(
筹
)
出处
《中国家禽》
北大核心
2012年第14期31-34,共4页
基金
国家自然科学基金项目(30700567)
浙江省自然科学基金项目(LY12C17002)
文摘
WDR72是课题组前期初步鉴定的蛋壳强度相关基因,它是个新基因。本文首先参考GenBank中原鸡(G.gallus)的WDR72基因序列设计3对引物,从仙居鸡子宫组织的cDNA中克隆WDR72基因,并构建家鸡WDR72编码基因的pEGFP-N1真核表达重组质粒;其次,将所克隆的WDR72基因的3′端编码序列构建到原核表达质粒pET-28b,然后利用0.4mmol/L的IPTG于37℃诱导表达WDR72的C端肽链;最后利用500mmol/L的咪唑纯化该肽链,并免疫大白兔制备wdr72特异性多抗。上述工作将为深入研究WDR72基因的生物学特性及其生化功能提供基础。
关键词
鸡
WDR72
基因克隆
原核表达与纯化
Keywords
chicken
WDR72
gene cloning
prokaryotic expression and purifyication
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鸡WDR72基因的克隆表达及其相应抗体的制备
李炳熠
刘长国
《中国家禽》
北大核心
2012
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