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铁皮石斛SCoT-PCR反应体系构建及优化 被引量:39
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作者 赵瑞强 高燕会 +1 位作者 章晓玲 斯金平 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期648-655,共8页
采用正交设计和单因素试验相结合的方法,对铁皮石斛的SCoT-PCR反应中5个因素(DNA模板、Mg2+、dNTPs、Taq酶和引物)进行优化试验。建立了适合铁皮石斛既稳定且多态性高的SCoT-PCR的最佳反应体:20μl PCR反应体系中含有1×Buffer、30n... 采用正交设计和单因素试验相结合的方法,对铁皮石斛的SCoT-PCR反应中5个因素(DNA模板、Mg2+、dNTPs、Taq酶和引物)进行优化试验。建立了适合铁皮石斛既稳定且多态性高的SCoT-PCR的最佳反应体:20μl PCR反应体系中含有1×Buffer、30ng DNA模板、2.5mmol.L-1Mg2+、0.15mmol.L-1dNTPs、1.5U Taq DNA聚合酶和0.4μmol.L-1引物。对铁皮石斛的SCoT-PCR最佳反应体系的退火温度进行梯度试验,发现本试验引物S6的退火温度为54.5℃,且最适退火温度因引物而异。这一优化的SCoT-PCR反应体系在32份铁皮石斛材料的验证中表现出良好的稳定性和重复性。该优化的SCoT-PCR反应体系为进一步进行铁皮石斛种质鉴定、遗传图谱构建、基因定位和遗传多样性的分析奠定了技术基础。 展开更多
关键词 铁皮石斛 SCoT 正交设计 单因素试验 体系优化
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不同竹种竹笋中5-脱氧独脚金醇的UPLC分析 被引量:2
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作者 胡骁伟 李国栋 +3 位作者 刘颖坤 桂仁意 张少伟 谢寅峰 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1114-1120,共7页
5-脱氧独角金醇(5-DS)是植物激素独脚金内酯的合成前体,是当前独脚金内酯定量的重要指标。为研究独角内脂对植物分枝/分蘖的抑制作用,本研究通过比较不同提取剂、提取纯化方法对刚竹属不同竹种竹笋5-DS含量的影响。结果发现:乙酸乙... 5-脱氧独角金醇(5-DS)是植物激素独脚金内酯的合成前体,是当前独脚金内酯定量的重要指标。为研究独角内脂对植物分枝/分蘖的抑制作用,本研究通过比较不同提取剂、提取纯化方法对刚竹属不同竹种竹笋5-DS含量的影响。结果发现:乙酸乙酯作为提取剂,利用超声辅助提取可节约前处理时间并提高提取率,固相萃取纯化可有效减少杂峰干扰。经以上处理后,使用超高效液相色谱仪(UPLC)能快速准确检测竹笋组织中5-DS的含量。40-8 000 ng·m L^-1范围内线性关系良好,检出限为8.7 ng·m L^-1,定量限为29.0 ng·m L^-1;平均加标回收率在87.9%-116.5%。检测发现不同种类竹笋中5-DS含量变化为11.27-51.17 ng·g^-1(FW),其中毛竹中5-DS含量最高。本研究使用超高效液相色谱仪建立竹笋中5-DS的前处理和检测方法,方法准确、精密度高、重现性好,可为竹子的分枝生理研究提供参考。 展开更多
关键词 固相萃取 超高效液相色谱仪 竹笋 独脚金内酯 5-脱氧独角金醇
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红秆寒竹的园林应用 被引量:1
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作者 魏建芬 申亚梅 +1 位作者 路英 应叶青 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2011年第2期286-287,共2页
红秆寒竹为珍稀观赏竹种,为实现其商业化开发,研究了红秆寒竹生物生态学特性,结合其美学的特征分析,探索红秆寒竹园林应用策略。研究发现红秆寒竹个体纤秀,秆红叶绿,抗性强,耐修剪,适合盆栽,制作盆景,也可孤植,对植于庭院及建筑入口;红... 红秆寒竹为珍稀观赏竹种,为实现其商业化开发,研究了红秆寒竹生物生态学特性,结合其美学的特征分析,探索红秆寒竹园林应用策略。研究发现红秆寒竹个体纤秀,秆红叶绿,抗性强,耐修剪,适合盆栽,制作盆景,也可孤植,对植于庭院及建筑入口;红秆寒竹可与观赏花卉或地被植物组合,与山石、建筑配置,创造优美景致。 展开更多
关键词 红秆寒竹 景观设计 园林应用
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海岛棉纤维发育相关基因GbPDF2酵母单杂交文库构建及其上游基因解析 被引量:2
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作者 郑云娜 代华琴 +3 位作者 曹跃芬 李金娟 戎均康 丁明全 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2014年第3期204-212,共9页
为研究棉纤维起始发育的分子调控网络,以海岛棉(Gossypium barbadence L.)品种"海渝"开花当天(0 DPA)胚珠为实验材料,利用酵母单杂交技术来筛选棉纤维起始发育相关基因GbPDF2的上游调控转录因子。首先,克隆GbPDF2的启动子(Acc... 为研究棉纤维起始发育的分子调控网络,以海岛棉(Gossypium barbadence L.)品种"海渝"开花当天(0 DPA)胚珠为实验材料,利用酵母单杂交技术来筛选棉纤维起始发育相关基因GbPDF2的上游调控转录因子。首先,克隆GbPDF2的启动子(Accession:KJ475468);构建了该启动子的诱饵融合载体(GbPDF2-PRO)-pAbAi,转入酵母细胞中重组为Y1HGold[Bait-pAbAi]菌株。之后,应用Matchmaker Gold Yeast One-Hybrid Library Screening System系统构建酵母单杂交cDNA文库,转化重组酵母菌株,通过同源重组筛选GbPDF2的上游转录调节因子。构建的cDNA文库库容为2.23×106,重组率为95.8%,插入片段大小为300 bp^2000 bp,其中大于1000bp的阳性克隆为109个。cDNA插入片段经测序和Blast同源性分析,筛选出2个生长素响应因子,1个WRKY7转录因子,1个WD-repeatprotein 40等与纤维发育相关的转录调节因子,为研究棉纤维起始发育的信号转导通路奠定了基础。 展开更多
关键词 棉花纤维 基因功能 酵母单杂交 SMART技术 CDNA文库
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竹红菌甲素及其环糊精包合物稳定性与抑菌活性研究 被引量:1
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作者 李朋举 张媚 +4 位作者 殷红福 赵学 朱旭伟 朱齐超 林海萍 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2014年第6期801-806,共6页
为解决竹红菌甲素(HA)做为光活化农药易降解与难溶于水的瓶颈问题,本文通过振荡培养法制备竹红菌甲素羟丙基-β-环糊精包合物水溶液(HA-HP-β-CD),采用紫外分光光度法测定HA乙醇水溶液(HA-E-W)与HA-HP-β-CD中HA的稳定性;菌丝生长速率... 为解决竹红菌甲素(HA)做为光活化农药易降解与难溶于水的瓶颈问题,本文通过振荡培养法制备竹红菌甲素羟丙基-β-环糊精包合物水溶液(HA-HP-β-CD),采用紫外分光光度法测定HA乙醇水溶液(HA-E-W)与HA-HP-β-CD中HA的稳定性;菌丝生长速率法测定两者抑菌率。结果表明,水、氧气和光照均能促进HA降解,环糊精包合能显著提高HA的抑菌率与光热稳定性。26℃、12000 Lx光照处理10 h,HA乙醇溶液(HA-E)、HA-E-W与HA-HP-β-CD中HA保留率分别为92.1%、39.0%与83.6%;HA-E-W去除氧气后HA保留率达99.6%。黑暗条件下26与50℃处理10 h后,HA-E-W中HA保留率分别为94.9%与57.1%,而50℃处理10 h后,HA-HP-β-CD中HA保留率可达95.3%。26℃、12000 Lx处理6 d,浓度10 mg/L的HA-HP-β-CD对苹果腐烂病菌和山核桃干腐病菌的抑菌率分别为93.1%和37.3%,均极显著高于HA-E-W对两种病原菌的抑菌率68.7%和25.4%。可见,环糊精包合是HA绿色农药制备的一种有效方式。 展开更多
关键词 竹红菌甲素 羟丙基-Β-环糊精包合物 抑菌率 稳定性 保留率
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