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题名大鼠脂肪干细胞的分离培养鉴定及多向诱导分化研究
被引量：2
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作者
何帮剑
董正超
成锋
李桂锦
吕一
姚新苗
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机构
浙江中医药大学附属第一医院骨伤科
浙江中医药大学附属第三医院骨伤科
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出处
《中华中医药学刊》
CAS
北大核心
2017年第10期2571-2575,I0014,I0015,共7页
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基金
国家自然科学基金项目(81273771)
浙江省姚新苗名老中医专家传承工作室建设项目
+4 种基金
浙江省中医药重点学科(中医老年骨伤学)建设项目(2012-XK-A17)
浙江省中医药管理局一般项目(2016ZA103)
浙江省科技厅创新团队项目(2011R50022-09)
浙江中医药大学项目(2015XJ05-01)
浙江中医药大学附属第三医院项目(2015ZS03-01)
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文摘
目的:通过体外分离培养脂肪干细胞,并进行传代、表型鉴定及多向诱导分化,进一步了解其生物学特性,为临床运用奠定实验基础。方法:取SD大鼠附睾近心端,肾周及腹股沟韧带皮下脂肪组织,采用密度梯度离心和贴壁培养相结合方法,对脂肪干细胞进行分离、体外培养及扩增、表型鉴定及成骨成脂诱导分化,在倒置显微镜下观察原代及传代细胞形态变化,并采用MTT法检测第3、5、7、9代细胞增殖能力,用流式细胞仪检测细胞表面抗原标记,取第3代细胞进行成骨成脂诱导分化,并采用茜素红染色、油红O染色方法进行鉴定。结果:采用密度梯度离心和贴壁培养相结合方法得到的脂肪干细胞,其细胞形态较为均一,基本呈长梭形,旋涡状生长,并形成集落样生长。MTT法检测第3、5、7、9代ADSCs呈典型的"S"形增殖曲线,符合干细胞的特性,脂肪干细胞表型鉴定结果显示CD29阳性高表达,CD34阴性表达,CD45低表达,CD105弱阳性表达,脂肪干细胞能向成骨细胞及脂肪细胞分化。结论:脂肪干细胞取材较方便,含量丰富、并能够在体外分离培养,其稳定表达特异性的表面抗原,并且经过相应诱导培养后可向成骨及成脂多向分化,可作为优良的骨组织工程的种子细胞来源。
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关键词
脂肪干细胞
大鼠
生物学特性
表型鉴定
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Keywords
adipose - derived stem cells
rats
bionomics
phenotype identification
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分类号
R285.5
[医药卫生—中药学]
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