蟾蜍灵在体内外抑制急性红白血病细胞K562增殖及下调WT1表达的研究 被引量：3

1

作者 汪丽佩 李天一 +2 位作者 高瑞兰 杜月光 赵燕娜 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期229-233,共5页

目的研究蟾蜍灵在体内外抗K562细胞增殖及对WT1表达影响。方法半固体集落形成实验检测蟾蜍灵对K562细胞的增殖抑制作用,流式细胞术分析蟾蜍灵对K562细胞周期的影响,Western blot观察蟾蜍灵对WT1表达作用。通过高致瘤性K562细胞制备裸鼠... 目的研究蟾蜍灵在体内外抗K562细胞增殖及对WT1表达影响。方法半固体集落形成实验检测蟾蜍灵对K562细胞的增殖抑制作用,流式细胞术分析蟾蜍灵对K562细胞周期的影响,Western blot观察蟾蜍灵对WT1表达作用。通过高致瘤性K562细胞制备裸鼠皮下荷瘤模型,分组为模型组、蟾蜍灵组及高三尖杉酯碱组,比较各组皮下瘤体积与重量、病理形态学改变及WT1蛋白表达情况。结果①半固体集落形成实验、流式及Westem blot结果显示,蟾蜍灵能明显抑制K562细胞增殖,阻滞细胞在G_0/G_1期,并下调其WT1蛋白表达,呈剂量依赖性;②蟾蜍灵组和阳性对照组裸鼠肿瘤的抑瘤率均明显高于模型组(P<0.05),且蟾蜍灵组和阳性对照组裸鼠皮下瘤重量均明显低于模型组(P<0.05);③病理切片显示,蟾蜍灵导致K562皮下瘤组织内肿瘤细胞大量坏死、凋亡,继发出血及纤维化等改变;并明显抑制K562皮下瘤组织中WT1蛋白表达水平。结论蟾蜍灵在体外可抑制K562细胞增殖及阻滞细胞周期于G_0/G_1期并下调其WT1蛋白表达,在体内可明显抑制裸鼠K562皮下瘤体积和重量,导致皮下瘤组织坏死、凋亡,并可下调其WT1蛋白的表达。 展开更多

关键词 蟾蜍灵 WT1 K562 细胞周期 G0/G1期 皮下瘤

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人参二醇组皂苷提取物对再生障碍性贫血小鼠免疫调节作用的研究 被引量：20

2

作者 郑智茵 尹利明 +4 位作者 庄海峰 成志 赵燕娜 余潇苓 高瑞兰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期790-795,共6页

目的观察自行提取分离的中药新药人参二醇组皂苷提取物(PDS-C)对再生障碍性贫血(再障)小鼠促进造血和调节免疫的作用。方法 BALB/c小鼠经亚致死量照射后输入DBA/2小鼠的淋巴细胞,制成免疫介导型再障模型。实验分6组,正常小鼠、模型组、P... 目的观察自行提取分离的中药新药人参二醇组皂苷提取物(PDS-C)对再生障碍性贫血(再障)小鼠促进造血和调节免疫的作用。方法 BALB/c小鼠经亚致死量照射后输入DBA/2小鼠的淋巴细胞,制成免疫介导型再障模型。实验分6组,正常小鼠、模型组、PDS-C低、中和高剂量治疗组及环孢素阳性药物对照组,均灌胃给药15 d。检测外周血象、骨髓病理检查造血组织增生状况、脾脏T细胞亚群比例,及T细胞分化相关T-bet、GATA-3和FOXP3转录调控蛋白的表达水平。结果 PDS-C治疗再障小鼠的疗效明显,中、高剂量组的外周血红蛋白、白细胞和血小板计数均明显高于模型组,骨髓造血组织增生状况也明显优于模型组。PDS-C升高Th2细胞和调节性T细胞(Treg)的比例,降低Th1细胞比例,并上调GATA-3和FOXP3蛋白及下调T-bet蛋白的表达。结论 PDS-C有效地促进造血,改善再障的骨髓抑制,加快造血功能恢复而升高外周血象;同时通过恢复再障小鼠失衡的Th1/Th2/Treg细胞比例而参与调节免疫,该文为PDS-C的临床应用提供实验依据。 展开更多

关键词 人参二醇组皂苷 再生障碍性贫血 免疫调节 T细胞亚群 小鼠 实验研究

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人参总皂苷增强成骨分化的间充质干细胞促造血作用研究 被引量：14

3

作者 尹利明 赵燕娜 +3 位作者 杜文喜 王潇 沃立科 高瑞兰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期45-49,共5页

目的观察人参总皂苷(TSPG)诱导间充质干细胞向成骨细胞分化的作用,探讨TSPG增强成骨分化的间充质干细胞促造血的可能机制。方法贴壁法培养人源骨髓间充质干细胞(h MSCs),成骨细胞分化和免疫表型进行鉴定。不同剂量的TSPG联合成骨细胞条... 目的观察人参总皂苷(TSPG)诱导间充质干细胞向成骨细胞分化的作用,探讨TSPG增强成骨分化的间充质干细胞促造血的可能机制。方法贴壁法培养人源骨髓间充质干细胞(h MSCs),成骨细胞分化和免疫表型进行鉴定。不同剂量的TSPG联合成骨细胞条件诱导液培养h MSCs,MTT法检测细胞增殖活性,对-硝基苯磷酸盐(p NPP)法检测培养上清碱性磷酸酶含量,茜素红染色法观察钙结节数量,Western blot法检测成骨细胞分化转录因子-核心结合蛋白因子2(RUNX2)蛋白表达水平,Elisa法检测培养上清造血相关因子含量,造血祖细胞集落生成实验检测培养上清造血支持能力。结果 MTT和p NPP结果均显示随着TSPG剂量增加,吸光值逐渐增加,呈剂量依赖性。钙结节数量和RUNX2蛋白表达水平明显高于对照组。造血相关生长因子和造血祖细胞集落数明显高于对照组。结论TSPG通过上调RUNX2蛋白表达诱导h MSCs向成骨细胞分化,同时增强成骨分化的MSCs支持造血。 展开更多

关键词 人参总皂苷 间充质干细胞 成骨细胞 造血微环境 分化 造血

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白藜芦醇对K562白血病细胞抑制增殖和诱导分化的作用 被引量：6

4

作者 赵燕娜 高瑞兰 +2 位作者 汪丽佩 余潇苓 尹利明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期853-856,共4页

目的探索白黎芦醇对K562白血病细胞株的抑制增殖和诱导分化作用。方法不同浓度的白黎芦醇处理K562白血病细胞6 d后,利用半固体集落生成实验检测K562白血病细胞集落数;通过细胞免疫化学法和Western-blot法检测分化相关转录因子GATA-1和P... 目的探索白黎芦醇对K562白血病细胞株的抑制增殖和诱导分化作用。方法不同浓度的白黎芦醇处理K562白血病细胞6 d后,利用半固体集落生成实验检测K562白血病细胞集落数;通过细胞免疫化学法和Western-blot法检测分化相关转录因子GATA-1和PU.1蛋白表达情况;流式细胞术检测分化相关抗原CD11b、CD14和CD42b阳性细胞的表达率。结果白黎芦醇能够降低K562白血病细胞集落数,且呈剂量依赖性(P<0.05);提高分化相关转录因子GATA-1和PU.1蛋白表达水平,升高K562细胞分化相关抗原CD11b、CD14、CD42b的表达阳性的细胞率,呈剂量依赖性(P<0.05)。结论白黎芦醇可能通过上调GATA-1和PU.1蛋白表达和升高CD11b、CD14和CD42b表达阳性的细胞率,诱导K562细胞向红系、粒系和巨核系方向分化,并抑制其增殖。 展开更多

关键词 白藜芦醇 白血病 分化 CD11B CD14 CD42B GATA-1 PU 1

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地西他滨抑制K562白血病细胞增殖和诱导分化的作用 被引量：7

5

作者 余潇苓 赵燕娜 +2 位作者 郑智茵 高瑞兰 尹利明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期13-17,共5页

目的:观察地西他滨(DAC)抑制白血病K562细胞生长和诱导分化的作用。方法:不同浓度的DAC处理K562细胞。MTT法和半固体集落生成实验检测K562细胞增殖能力;瑞氏染色观察细胞形态;流式细胞术检测分化相关抗原CD11b和CD42b阳性表达率;Western... 目的:观察地西他滨(DAC)抑制白血病K562细胞生长和诱导分化的作用。方法:不同浓度的DAC处理K562细胞。MTT法和半固体集落生成实验检测K562细胞增殖能力;瑞氏染色观察细胞形态;流式细胞术检测分化相关抗原CD11b和CD42b阳性表达率;Western blot检测细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、细胞周期蛋白E1(cyclin E1)、细胞周期负调控因子P27、红系分化核转录因子GATA-1及粒系分化核转录因子PU.1蛋白的表达水平。结果:DAC能够减少K562细胞集落形成的数量,降低细胞活力,减少核质比,抑制K562细胞进入S期,并阻滞在G_2/M期,提高分化相关抗原CD11b和CD42b阳性表达率,上调P27、GATA-1和PU.1蛋白表达,同时下调CDK2和cyclin E1蛋白表达。结论:DAC可能通过调控细胞周期抑制K562细胞增殖,同时诱导多向分化。 展开更多

关键词 地西他滨 白血病 细胞增殖 分化 细胞周期

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Th17/Treg细胞失衡与再生障碍性贫血研究进展 被引量：21

6

作者 杨友卫 郑智茵 姚红章 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期214-218,共5页

再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)是一种以效应T细胞功能亢进导致造血组织损伤为特征的自身免疫性疾病。近年来研究发现,AA与Th17细胞数量增加及Treg细胞数量减少密切相关,且Th17和Treg细胞功能上相互拮抗。动物实验表明,IL-17抗体... 再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)是一种以效应T细胞功能亢进导致造血组织损伤为特征的自身免疫性疾病。近年来研究发现,AA与Th17细胞数量增加及Treg细胞数量减少密切相关,且Th17和Treg细胞功能上相互拮抗。动物实验表明,IL-17抗体靶向治疗及Treg细胞回输治疗均可改善免疫介导的AA小鼠骨髓衰竭状态。本文就Th17/Treg细胞与AA关系最新研究进展作一综述,旨在进一步探讨AA发病机制,为临床治疗提供新思路。本综述讨论的主要问题有:Th17/Treg细胞一般生物学特性,Th17/Treg细胞平衡的调节及相关细胞因子,Th17/Treg细胞与再生障碍性贫血关系等。 展开更多

关键词 TH17细胞 TREG细胞 再生障碍性贫血

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七叶皂苷诱导HL-60细胞凋亡的研究 被引量：5

7

作者 成志 高瑞兰 +2 位作者 陈小红 林筱洁 钱煦岱 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期290-293,共4页

本研究观察七叶皂苷对髓系白血病HL-60细胞的抑制和诱导凋亡作用。取对数期生长的HL-60细胞经饥饿处理后,加入不同浓度的七叶皂苷观察七叶皂苷抑制细胞生长的指数、形态学变化,用DNA片段凝胶电泳(DNA Ladder)和Annexin V/PI-FITC双标法... 本研究观察七叶皂苷对髓系白血病HL-60细胞的抑制和诱导凋亡作用。取对数期生长的HL-60细胞经饥饿处理后,加入不同浓度的七叶皂苷观察七叶皂苷抑制细胞生长的指数、形态学变化,用DNA片段凝胶电泳(DNA Ladder)和Annexin V/PI-FITC双标法分析诱导细胞凋亡的作用。结果表明:七叶皂苷抑制HL-60细胞生长,15-120mg/L的七叶皂苷处理细胞48小时后,存活率为(92.2±0.69)%-(8.2±0.96)%,均明显低于不加药的对照组(99.4±0.31)%(p均<0.05);七叶皂苷15-60mg/L处理细胞24小时后细胞发生凋亡。Annexin V/PI分析显示,给药组AnnexinV阳性细胞为(12.7±0.58)%-(65.4±1.30)%,明显高于对照组的(0.57±0.03)%(p均<0.01)。七叶皂苷处理的细胞DNA琼脂糖凝胶电泳显示典形的凋亡DNA梯形条带。结论:七叶皂苷能特异性地诱导HL-60细胞凋亡,此研究结果为七叶皂苷今后作为治疗白血病的辅助药物提供实验依据。 展开更多

关键词 七叶皂苷 HL-60细胞 细胞凋亡

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异基因骨髓移植小鼠肠道菌群和NLRP3炎症小体改变与急性移植物抗宿主病发生发展的关系 被引量：2

8

作者 赵燕娜 汪丽佩 +3 位作者 李天一 何志兴 张婷 温成平 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期915-920,共6页

目的:探讨异基因骨髓移植小鼠肠道菌群和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体改变与急性移植物抗宿主病(aGVHD)的关系。方法:建立C57BL/6雄性小鼠致BALB/c雌性小鼠异基因骨髓移植模型,诱导aGVHD为aGVHD组,以BALB/c雌性小... 目的:探讨异基因骨髓移植小鼠肠道菌群和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体改变与急性移植物抗宿主病(aGVHD)的关系。方法:建立C57BL/6雄性小鼠致BALB/c雌性小鼠异基因骨髓移植模型,诱导aGVHD为aGVHD组,以BALB/c雌性小鼠为对照,ELISA方法检测模型组小鼠血清白细胞介素1β(IL-1β)、IL-4、IL-10和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,免疫组化检测肠闭合蛋白(occludin)的表达,检测16S rDNA以评估肠道菌群改变,HE染色观察aGVHD靶器官(肺、肝、脾和回肠)的病理变化,Western blot分析肠组织NLRP3炎症小体的表达。结果:与正常小鼠相比,aGVHD小鼠血清IL-1β和TNF-α水平明显上升,而IL-4和IL-10水平下降(P<0.01);aGVHD小鼠肠紧密连接蛋白occludin表达下降,其肠道菌群也发生改变,表现为疣微菌门(Verrucomicrobia)等微生物物种富集,而红蝽杆菌目(Coriobacteriales)等多个微生物种类下调;aGVHD组靶器官病理损伤明显,NLRP3炎症小体表达显著增加。结论:aGVHD可能通过炎症因子影响小鼠肠道屏障功能,改变肠道菌群,进而激活NLRP3炎症小体,导致恶性循环。 展开更多

关键词 急性移植物抗宿主病 细胞因子 肠道菌群 闭合蛋白 NLRP3炎症小体

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人参总皂苷促进再生障碍性贫血小鼠造血及其机制探讨 被引量：9

9

作者 尹利明 郑智茵 +3 位作者 沃立科 王潇 赵燕娜 高瑞兰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期732-737,共6页

目的:观察人参总皂苷(TSPG)对免疫介导型再生障碍性贫血(再障)小鼠的疗效及其相关作用机制。方法:BALB/c小鼠经亚致死剂量照射后输入DBA/2小鼠淋巴细胞,制成再障小鼠模型。实验分6组,正常小鼠组,模型组,TSPG低、中和高剂量治疗组,环孢菌... 目的:观察人参总皂苷(TSPG)对免疫介导型再生障碍性贫血(再障)小鼠的疗效及其相关作用机制。方法:BALB/c小鼠经亚致死剂量照射后输入DBA/2小鼠淋巴细胞,制成再障小鼠模型。实验分6组,正常小鼠组,模型组,TSPG低、中和高剂量治疗组,环孢菌素A(Cs A)阳性对照组,灌胃给药15 d。观察外周血象,检测血清Th1/Th2/Th17因子含量、骨髓造血祖细胞集落生成率及细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase1/2,ERK1/2)的磷酸化水平。结果:TSPG治疗再障小鼠的疗效显著,中、高剂量组的血红蛋白含量、白细胞和血小板计数均明显高于模型组;红、粒和巨核系造血祖细胞集落生成率均明显高于模型组。同时,显著上调骨髓细胞磷酸化ERK1/2蛋白表达,降低血清Th1和Th17因子含量,并升高Th2因子含量。结论:人参总皂苷有效地治疗再障小鼠,具有一定程度的促进造血和调节免疫的功效,其作用机制可能是调节Th1/Th2/Th17因子的表达及ERK1/2的磷酸化。 展开更多

关键词 人参总皂苷 再生障碍性贫血 造血 免疫调节

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大黄素对HL-60细胞增殖和凋亡的影响 被引量：4

10

作者 王潇 钱煦岱 +3 位作者 陈小红 尹利明 林筱洁 高瑞兰 《中华中医药学刊》 CAS 2011年第12期2764-2766,共3页

目的:探讨大黄素对人白血病细胞HL-60增殖及凋亡的影响。方法:应用MTT法检测大黄素对HL-60细胞增殖的影响;应用流式细胞术、DNA琼脂糖凝胶电泳观察和检测细胞凋亡;蛋白印迹法(Western-Blot)检测Bcl-2蛋白表达水平的变化。结果:在5～20m... 目的:探讨大黄素对人白血病细胞HL-60增殖及凋亡的影响。方法:应用MTT法检测大黄素对HL-60细胞增殖的影响;应用流式细胞术、DNA琼脂糖凝胶电泳观察和检测细胞凋亡;蛋白印迹法(Western-Blot)检测Bcl-2蛋白表达水平的变化。结果:在5～20mg/L浓度范围内,大黄素对HL-60细胞增殖的抑制作用呈时间剂量依赖性20mg/L作用72h后,抑制率分别达到(19.8±2.7)%,(58.8±4.4)%和(73.8±5.7)%;流式细胞术检测发现:大黄素5、10和20mg/L作用24h后,细胞凋亡率分别为(15.5±3.4)%、(56.0±3.4)%和(71.1±5.0)%,与对照组(1.01±0.06)%有显著性差异(P<0.05);DNA琼脂糖凝胶电泳显示典型的梯形条带。大黄素作用24h后,Bcl-2蛋白的表达水平随药物波度增加呈逐渐下降趋势。结论:大黄素能够抑制HL-60细胞增殖,并诱导其凋亡。Bcl-2基因可能参与了大黄素抑制HL-60细胞增殖和诱导凋亡的过程。 展开更多

关键词 大黄素 HL-60细胞 细胞增殖 细胞凋亡 BCL-2

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蛇六谷石油醚提取物对K562细胞生物学特性的影响及其机制 被引量：2

11

作者 余潇苓 赵燕娜 +3 位作者 尹利明 高瑞兰 潘磊 杜文喜 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期1028-1033,共6页

目的:探讨蛇六谷石油醚提取物(SLG)抑制白血病K562细胞增殖、促进凋亡和诱导分化的作用。方法:SLG处理K562细胞,同时加入ERK信号通路阻滞剂PD98059。采用MTT检测细胞活力,采用流式细胞术检测细胞凋亡率及分化相关抗原表达阳性的细胞比例... 目的:探讨蛇六谷石油醚提取物(SLG)抑制白血病K562细胞增殖、促进凋亡和诱导分化的作用。方法:SLG处理K562细胞,同时加入ERK信号通路阻滞剂PD98059。采用MTT检测细胞活力,采用流式细胞术检测细胞凋亡率及分化相关抗原表达阳性的细胞比例,采用Western blot检测ERK1/2和p-ERK1/2的蛋白表达水平。结果:SLG 50、100、200 mg/L能够降低K562细胞的增殖活力,其抑制作用呈剂量依赖性(r=0.9997)。SLG能够提高细胞凋亡率及分化相关抗原CD11b、CD14和CD42b表达阳性的细胞比例,同时能够上调p-ERK1/2的表达。PD98059可部分逆转SLG促凋亡和分化的作用。结论:SLG通过ERK信号通路抑制K562细胞增殖、促进凋亡和诱导分化。 展开更多

关键词 蛇六谷 白血病 ERK信号通路 凋亡 细胞分化 细胞增殖

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人参皂苷Rd通过下调Nrf2表达调控H460细胞的增殖和凋亡 被引量：3

12

作者 钱松 柴尹泽 +4 位作者 余潇苓 苗青 赵燕娜 高瑞兰 尹利明 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期566-572,共7页

核转录因子红细胞系-2p45相关因子-2(nuclear factor erythroid-2p45-related factor 2,Nrf2)是细胞应对外界应激的主要调控因子,通过调控一系列细胞保护酶,维持细胞稳态。然而,在许多肿瘤细胞中Nrf2过度激活,导致肿瘤细胞获得增殖优势... 核转录因子红细胞系-2p45相关因子-2(nuclear factor erythroid-2p45-related factor 2,Nrf2)是细胞应对外界应激的主要调控因子,通过调控一系列细胞保护酶,维持细胞稳态。然而,在许多肿瘤细胞中Nrf2过度激活,导致肿瘤细胞获得增殖优势并产生化疗耐药,因此,靶向抑制Nrf2是肿瘤增敏治疗的一种新思路。人参皂苷Rd是人参皂苷中的重要活性成分,具有显著的抗肿瘤作用。本研究以不同浓度的人参皂苷Rd处理人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)H460细胞,利用CCK-8法检测细胞活力;倒置显微镜观察H460细胞的形态变化;流式细胞术检测细胞周期及凋亡率;RT-qPCR和Western印迹检测的Nrf2及其下游调控基因的表达情况;此外通过转染Nrf2-siRNA下调H460细胞中Nrf2的表达,观察其对人参皂苷Rd增敏的影响。结果显示,与对照组相比,人参皂苷Rd能够抑制H460细胞增殖活力,诱导细胞G0/G1期阻滞,促进细胞凋亡,具有剂量依赖性(P<0.05);此外,人参皂苷Rd能够下调Nrf2,醌氧化还原酶1[NAD(P)H:quinoneoxidoreductase,NQO1],谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基(glutamate--cysteine ligase catalytic subunit,GCLC)和调节亚基(glutamate--cysteine ligase regulatory subunit,GCLM)的mRNA和蛋白质水平,同时增强H460细胞对化疗药的敏感性(P<0.05),而转染Nrf2-siRNA后,人参皂苷Rd的增敏作用减弱。表明人参皂苷Rd可以抑制非小细胞肺癌H460细胞活性并增敏化疗,其机制可能是通过抑制Nrf2信号通路来实现。 展开更多

关键词 人参皂苷RD 细胞毒性 非小细胞肺癌 核转录因子红细胞系-2p45相关因子-2 增敏

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