细菌药物钝化酶基因分布及其表达诱导与抑制机制的研究 被引量：6

1

作者 吴亦斐 孙爱华 +2 位作者 赵金方 葛玉梅 严杰 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期131-140,共10页

目的:了解临床常见病原菌药物钝化酶基因及其优势基因携带模式,抗生素诱导药物钝化酶基因表达上调的作用及其与细菌组氨酸激酶的关系。方法:采用PCR和测序法,了解金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、阴沟肠杆菌... 目的:了解临床常见病原菌药物钝化酶基因及其优势基因携带模式,抗生素诱导药物钝化酶基因表达上调的作用及其与细菌组氨酸激酶的关系。方法:采用PCR和测序法,了解金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、阴沟肠杆菌临床菌株携带的β-内酰胺类、氨基糖苷类、大环内酯类钝化酶基因。采用实时荧光定量RT-PCR,了解抗生素诱导及组氨酸激酶阻断剂氯氰碘柳胺抑制药物钝化酶基因表达的作用。结果:63株大肠埃希菌中检出4种β-内酰胺类、2种氨基糖苷类和1种大环内酯类钝化酶基因,优势基因携带模式为[TEM+CTX-M]+aac(3)-Ⅱ+mphA 16株(25.4%)和[TEM+CTX-M]+aac(6')-Ⅰb 13株(20.6%)。24株金黄色葡萄球菌中检出2种β-内酰胺类、3种氨基糖苷类钝化酶基因,优势基因携带模式为aph(3')(41.7%)或aac(6)-Ⅰe-aph(2)-Ⅰa(25.0%)。28株肺炎克雷伯菌中检出4种β-内酰胺酶、2种氨基糖苷类钝化酶基因,优势基因携带模式为[TEM+SHV]+[aac(6')-Ⅰb+aac(3)-Ⅱ](28.6%)和[TEM+SHV]+[aac(6')-Ⅰb+aac(3)-Ⅱ]+mphA(17.8%)。鲍曼不动杆菌和阴沟肠杆菌也以携带两类或三类药物钝化酶基因为优势模式。1/4 MIC青霉素、头胞噻肟和链霉素,能诱导3种β-内酰胺类和4种氨基糖苷类钝化酶基因表达显著上调(P<0.05),该诱导作用可被氯氰碘柳胺所抑制(P<0.05)。结论:上述临床常见病原菌多携带多类药物钝化酶基因并存在不同的优势基因携带模式。低浓度抗生素可能诱导药物钝化酶基因表达上调,但可被组氨酸激酶阻断剂所抑制。 展开更多

关键词 抗药性 细菌 遗传学 药物耐受性 基因型 基因表达 聚合酶链反应 细菌 耐药基因 检测 药物钝化酶 表达 调控机制

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肠道杆菌耐药性及其耐药相关Ⅰ类整合子可变区结构与进化 被引量：2

2

作者 王欢 包其郁 +3 位作者 孙爱华 赵金方 葛玉梅 严杰 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期149-155,共7页

目的:了解大肠埃希菌、阴沟肠杆菌和鲍曼不动杆菌临床菌株耐药性,及其Ⅰ类整合子分布、可变区耐药基因盒与分子进化关系。方法:采用K-B法检测大肠埃希菌、阴沟肠杆菌和鲍曼不动杆菌对12种药物的敏感性。采用PCR及其产物测序检测上述菌... 目的:了解大肠埃希菌、阴沟肠杆菌和鲍曼不动杆菌临床菌株耐药性,及其Ⅰ类整合子分布、可变区耐药基因盒与分子进化关系。方法:采用K-B法检测大肠埃希菌、阴沟肠杆菌和鲍曼不动杆菌对12种药物的敏感性。采用PCR及其产物测序检测上述菌株中Ⅰ类整合子携带率及可变区耐药基因盒。采用Clustal X和MEGA软件分析Ⅰ类整合子基因盒中耐药基因分子进化关系。结果:鲍曼不动杆菌对临床常用青霉素类和头孢菌素类抗生素耐药率为54.2%～100%,大肠埃希菌和阴沟肠杆菌对菌素类抗生素耐药率也高达41.6%～62.5%。62.5%(15/24)大肠埃希菌、67.9%(19/28)阴沟肠杆菌、83.3%(20/24)鲍曼不动杆菌检出Ⅰ类整合子,81.5%(44/54)Ⅰ类整合子呈现为4种单条带谱型,其余为3种双条带谱型。Ⅰ类整合子可变区耐药基因盒中存在aac(6')、sad(3″)、aad(2″)、cat(4')和dfr(7、A13和15)耐药基因,可分别介导细菌对氨基糖苷类、氯霉素和磺胺类抗生素耐药。根据二氢叶酸还原酶基因序列差异,上述菌株携带的Ⅰ类整合子可分成4个分子进化组。结论:上述肠道杆菌耐药情况严重并携带高含多种耐药基因盒的Ⅰ类整合子,Ⅰ类整合子有4条不同的进化途径。 展开更多

关键词 肠杆菌属 药物作用 鲍氏不动杆菌 药物作用 埃希氏菌属 药物作用 抗药性 细菌 肠道杆菌 耐药 整合子 耐药基因盒 进化

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一步法多重荧光定量RT-PCR检测人杯状病毒的建立及应用 被引量：3

3

作者 王原 崔大伟 +1 位作者 胡正军 陈功祥 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期647-651,共5页

目的建立检测人杯状病毒(human calicivirus,HuCVs,主要包括SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ)的一步法多重荧光定量RTPCR(rRT-PCR)法。方法用Primer Express 3.0软件设计特异性引物和探针,通过合成的对应病毒基因的质粒来评价该方法的灵敏度、特... 目的建立检测人杯状病毒(human calicivirus,HuCVs,主要包括SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ)的一步法多重荧光定量RTPCR(rRT-PCR)法。方法用Primer Express 3.0软件设计特异性引物和探针,通过合成的对应病毒基因的质粒来评价该方法的灵敏度、特异性和重复性,检测临床标本并对阳性结果进行基因测序验证。结果建立的rRT-PCR法检测SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ的灵敏度均达到103copies/mL,特异性为100%,且变异系数(CV)均≤1.275%。HuCVs检出率为21.43%(75/350),其中SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ分别为14.67%(11/75)、21.33%(16/75)和64.00%(48/75)。随机选择检测阳性结果进行测序,结果均与该法检测结果一致。结论建立的rRT-PCR法可同时检测并区分SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ病毒,可用于HuCVs引起的急性腹泻散发和暴发疫情的监测。 展开更多

关键词 人杯状病毒 札如病毒 诺如病毒 一步法多重荧光定量聚合酶链反应

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fliY基因在空肠弯曲菌致病性相关趋化和定植中的作用 被引量：1

4

作者 楼宏强 葛玉梅 +2 位作者 张金良 严杰 赵金方 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期141-148,共8页

目的:构建空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)鞭毛马达开关蛋白FliY编码基因(fliY)敲除突变株,了解FliY蛋白控制细菌鞭毛运动的作用及其与细菌趋化和定植的关系。方法:采用pBluescript-Ⅱ-SK质粒构建用于敲除空肠弯曲菌NCTC11168株fliY... 目的:构建空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)鞭毛马达开关蛋白FliY编码基因(fliY)敲除突变株,了解FliY蛋白控制细菌鞭毛运动的作用及其与细菌趋化和定植的关系。方法:采用pBluescript-Ⅱ-SK质粒构建用于敲除空肠弯曲菌NCTC11168株fliY基因的自杀质粒。根据同源交换原理,利用自杀质粒构建空肠弯曲菌fliY基因敲除突变株(fliY-)。采用PCR、PCR产物测序与Western Blot,对fliY-突变株进行鉴定。采用体外菌落迁徙试验、细菌趋化试验以及小鼠空肠定植试验,检测fliY-突变株趋化和定植能力。结果:fliY-突变株生长曲线与野生株相似,但PCR与测序及Western Blot结果显示,fliY-突变株中fliY基因已被敲除。与野生株比较,fliY-突变株半固体平板上菌落明显较小(P<0.05),对脱氧胆酸钠和牛胆汁趋化能力显著下降(P<0.05),在感染小鼠空肠组织标本中的细菌数(CFU)也明显减少(P<0.05)。结论:空肠弯曲菌fliY基因功能与调控鞭毛运动作用有关,从而对细菌趋化和定植过程产生重大影响。 展开更多

关键词 弯曲杆菌 空肠 致病力 小鼠 基因敲除 鞭毛 聚合酶链反应 印迹法 蛋白质 鞭毛马达开关蛋白 运动力 趋化 定植

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超声结合BP神经网络技术诊断女童中枢性性早熟 被引量：6

5

作者 梁哲浩 鲁伟 《医学影像学杂志》 2015年第2期304-307,共4页

目的探讨超声结合人工神经网络技术在女童中枢性性早熟诊断中的应用价值。方法选用170例性早熟女童进行常规超声检查子宫、卵巢,以其中130例的子宫体积、卵巢体积以及双侧卵巢最大卵泡内径为输入变量,以中枢性性早熟或非中枢性性早熟为... 目的探讨超声结合人工神经网络技术在女童中枢性性早熟诊断中的应用价值。方法选用170例性早熟女童进行常规超声检查子宫、卵巢,以其中130例的子宫体积、卵巢体积以及双侧卵巢最大卵泡内径为输入变量,以中枢性性早熟或非中枢性性早熟为输出变量,建立反向传播(BP)神经网络,并对另40例性早熟病例分类。结果利用BP神经网络结合常规超声检查对中枢性性早熟诊断的敏感性、特异性和准确率分别为95.0%、85.0%、90.0%。结论神经网络结合超声检查对中枢性性早熟的诊断和鉴别诊断具有较大的价值。 展开更多

关键词 反向传播神经网络 中枢性性早熟 超声诊断

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血流感染病原菌菌群分布特征分析 被引量：1

6

作者 林少华 鲁遥 +1 位作者 俞斐 缪红梅 《浙江临床医学》 2015年第7期1217-1218,共2页

目的分析医院血流感染菌群分布情况，为临床合理治疗提供重要依据。方法采用自动血培养仪对血培养瓶进行连续培养监测，全自动微生物分析系统对血标本中分离的病原菌进行鉴定，对结果进行回顾性分析。结果5476份血液标本中分离到病原菌... 目的分析医院血流感染菌群分布情况，为临床合理治疗提供重要依据。方法采用自动血培养仪对血培养瓶进行连续培养监测，全自动微生物分析系统对血标本中分离的病原菌进行鉴定，对结果进行回顾性分析。结果5476份血液标本中分离到病原菌492株，阳性率8．98％。其中革兰阴性菌248株（50．4l％）、革兰阳性菌233株（47．36％）、真菌11株（2．24％）。结论住院患者血流感染以革兰阴性菌为主，感染分离率以重症监护病房和儿科最高，菌群分布重症监护病房以非发酵菌为主，儿科患者易感菌株为凝固酶阴性葡萄球菌为主，及时准确的培养结果，可为临床合理治疗提供重要依据。 展开更多

关键词 住院患者 血流感染 菌群分布

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超声结合人工神经网络技术预测血清促黄体激素基础值

7

作者 梁哲浩 鲁伟 《医学影像学杂志》 2011年第5期637-639,共3页

目的:利用超声结合人工神经网络技术预测血清促黄体激素(luteinizing hormone,LH)基础值。方法:选用71例性早熟女童进行常规超声检查子宫、卵巢,以其中61个病例的子宫体积、卵巢体积以及双侧卵巢最大卵泡内径为输入变量,以LH基础值为输... 目的:利用超声结合人工神经网络技术预测血清促黄体激素(luteinizing hormone,LH)基础值。方法:选用71例性早熟女童进行常规超声检查子宫、卵巢,以其中61个病例的子宫体积、卵巢体积以及双侧卵巢最大卵泡内径为输入变量,以LH基础值为输出变量,建立BP神经网络,并用另10个病例作为测试检验,将预测结果与实际值作统计分析。结果:BP网络预测的结果与实际值作线性回归,得到回归直线的斜率为1.0088,回归直线的相关系数为0.977。结论:性早熟女童超声检查结合BP神经网络技术可以预测LH基础值。 展开更多

关键词 血清促黄体激素 超声检查 反向传播神经网络

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姜黄素对内毒素血症小鼠细胞因子表达的影响

8

作者 曹俊敏 杨雪静 侯佳惠 《浙江临床医学》 2015年第12期2103-2104,共2页

目的 探讨姜黄素对内毒素血症小鼠细胞因子表达的影响,观察姜黄素在其中所起的作用及意义.方法 选用45只清洁级ICR小鼠随机均分为9组,每组5只.9组分别为：预防高、中、低剂量组,治疗高、中、低剂量组,药物对照组,内毒素（LPS）对照组,... 目的 探讨姜黄素对内毒素血症小鼠细胞因子表达的影响,观察姜黄素在其中所起的作用及意义.方法 选用45只清洁级ICR小鼠随机均分为9组,每组5只.9组分别为：预防高、中、低剂量组,治疗高、中、低剂量组,药物对照组,内毒素（LPS）对照组,空白对照组.给药5d后眼球取血分离血清,用固相夹心法酶联免疫吸附法测定血清TNF-α、IL-1、IL-6水平.结果 治疗组、预防组的TNF-α、IL-1、IL-6水平较正常组高,但较LPS组低,经统计学分析,治疗组、预防组与LPS组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 姜黄素对内毒素血症小鼠有保护作用,预防、治疗均有效果,预防效应强于治疗. 展开更多

关键词 内毒素血症 姜黄素 小鼠

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耐三代头孢菌素沙门菌的耐药基因分析 被引量：8

9

作者 黄晓黎 陈晓 +1 位作者 王若南 陈瑜 《临床检验杂志》 CAS 2021年第2期105-109,共5页

目的了解耐三代头孢菌素沙门菌的耐药基因分布特征,为疾病的防控和治疗提供依据。方法选取对头孢噻肟(CTX)和(或)头孢他啶(CAZ)耐药的临床分离的沙门菌157株,进行血清学分型和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)确证试验,采用PCR方法检测7种β-... 目的了解耐三代头孢菌素沙门菌的耐药基因分布特征,为疾病的防控和治疗提供依据。方法选取对头孢噻肟(CTX)和(或)头孢他啶(CAZ)耐药的临床分离的沙门菌157株,进行血清学分型和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)确证试验,采用PCR方法检测7种β-内酰胺类耐药基因。结果157株沙门菌中,分布有20种血清型,以鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌为主。共127株检出耐药基因,检出率为80.89%,包括bla_(TEM)103株、bla_(CTX-M)79株、bla_(OXA-10)9株和bla_(SHV)1株,未检出bla_(PER)、bla_(CMY)和bla_(ACC)。ESBLs阳性80株,占50.96%;其中23株(28.75%)检出1种耐药基因,50株(62.50%)检出2种耐药基因,7株(8.75%)检出3种耐药基因;携带的耐药基因模式以bla_(CTX-M-1G)+bla_(TEM)(35株)、bla_(CTX-M-9G)+bla_(TEM)(14株)和bla_(CTX-M-9G)(12株)多见。ESBLs阴性77株,占49.04%;其中46株(59.74%)检出1种耐药基因,1株(1.30%)检出2种耐药基因,30株(38.96%)未检出耐药基因;携带的耐药基因模式以bla_(TEM)(46株)为主。对CTX耐药的沙门菌和对CTX不耐药的沙门菌bla_(CTX-M)的检出率差异有统计学意义(χ^(2)=83.366,P=0.000)。对CAZ耐药的沙门菌和对CAZ不耐药的沙门菌bla_(TEM)检出率差异无统计学意义(χ^(2)=0.268,P=0.384)。鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌bla_(CTX-M-1G)和bla_(CTX-M-9G)的携带率差异有统计学意义(χ^(2)=6.285,P=0.012;χ^(2)=8.735,P=0.003)。bla_(TEM)在表型为CAZ耐药、CTX敏感或中介组,CTX耐药、CAZ敏感或中介组及CAZ和CTX均耐药组中的携带率差异无统计学意义(χ^(2)=0.270,P=0.874)。结论耐三代头孢菌素沙门菌携带的耐药基因以bla_(TEM)和bla_(CTX-M)为主,同时伴有bla_(OXA-10)和bla_(SHV),呈多样性,需要持续监测和研究。 展开更多

关键词 沙门菌 三代头孢菌素 耐药基因 超广谱Β-内酰胺酶

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高超二倍体、三/四倍体染色体核型在急性髓细胞白血病中的预后意义

10

作者 楼敏君 侯佳惠 +3 位作者 钱丽丽 王小春 朱琳超 俞颖 《临床检验杂志》 CAS 2019年第3期183-187,共5页

目的描述高超二倍体、三/四倍体染色体核型急性髓细胞白血病(HH/TT-AML)患者的生物学特征,探讨其与预后的关系。方法回顾性分析2006年3月至2017年6月28例HH/TT-AML初治患者一般临床特征、治疗情况,用Kaplan-Meier方法分析预后影响因素... 目的描述高超二倍体、三/四倍体染色体核型急性髓细胞白血病(HH/TT-AML)患者的生物学特征,探讨其与预后的关系。方法回顾性分析2006年3月至2017年6月28例HH/TT-AML初治患者一般临床特征、治疗情况,用Kaplan-Meier方法分析预后影响因素。结果 HH/TT-AML患者核型以49条染色体为主,占39.3%(11/28),50～55条染色体次之,占32.1%(9/28)。高超二倍体核型急性髓细胞白血病(HH-AML)患者以+8(77.3%,17/22)、+21(54.5%,12/22)多见。生存分析显示,伴-5/5q-、-7/7q-、-17/der(17p)及der(3q)的HH/TT-AML患者总体生存率劣于不伴此类异常者(4.1月vs 10.1月,P<0.05);三/四倍体染色体核型急性髓细胞白血病(TT-AML)患者总体生存率与HH-AML患者差异无统计学意义(8.4月vs 7.2月,P>0.05);异基因造血干细胞移植患者总体生存率优于仅化疗患者(25.4月vs 4.1月,P<0.01)。结论 HH/TT-AML患者存在较大异质性,不良预后相关染色体异常的识别有助于预后分层。此类患者总体生存期短,联合化疗获缓解后尽早行异基因造血干细胞移植能显著改善患者预后。 展开更多

关键词 急性髓细胞白血病 高超二倍体 三/四倍体 预后

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国际血液学标准委员会关于裂红细胞的标准化及临床应用建议 被引量：3

11

作者 鲁伟 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期478-479,共2页

裂红细胞（schistocytes）检测目前是通过对外周血涂片、染色和显微镜下观察进行的。但由于裂红细胞形态学上的多样性和异质性,检测者的主观性和对形态认知的不一致性,以及计数方法多样性,不同实验室、操作人员之间形态学描述和报告可... 裂红细胞（schistocytes）检测目前是通过对外周血涂片、染色和显微镜下观察进行的。但由于裂红细胞形态学上的多样性和异质性,检测者的主观性和对形态认知的不一致性,以及计数方法多样性,不同实验室、操作人员之间形态学描述和报告可能不统一,影响治疗和临床效果。 展开更多

关键词 裂红细胞 血栓性微血管病 细胞形态学 红细胞碎片

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探讨FISH技术在检测MDS患者5种常见骨髓染色体异常中的应用价值

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作者 朱炳伟 刘永林 彭来君 《浙江临床医学》 2018年第10期1656-1658,共3页

目的 探究荧光原位杂交技术(FISH)在检测骨髓增生异常综合征(MDS)患者5种常见骨髓染色体异常中的应用价值.方法 对符合维也纳最低诊断标准的70例MDS患者采用6组含上述5种常见染色体异常的FISH探针进行检测,并将检测结果 与常规染色体核... 目的 探究荧光原位杂交技术(FISH)在检测骨髓增生异常综合征(MDS)患者5种常见骨髓染色体异常中的应用价值.方法 对符合维也纳最低诊断标准的70例MDS患者采用6组含上述5种常见染色体异常的FISH探针进行检测,并将检测结果 与常规染色体核型分析(CC)结果 进行回顾性分析比较.结果 70例MDS患者中,两种方法 共检出染色体异常克隆40例,总阳性率为57.1％,其中FISH检测出35例染色体异常,阳性率为50.0％,CC法检测出27例染色体异常,阳性率为38.6％.35例FISH阳性患者标本中,20q-的检出率最高,为20.0％,其余阳性检出率依次为+8(17.1％),-7/7q-(15.7％),-5/5q-(12.9％)和-Y(2.9％).FISH技术在MDS各亚型RA、RCMD、RAEB-1、RAEB-2和RAS的染色体异常检出频率由低到高依次为30.0％、47.1％、53.8％、60.0％和75.0％.结论 FISH技术在检测MDS常见骨髓染色体异常的敏感性要高于CC法,对于那些CC检测失败或者正常的MDS病例,有着较高的应用价值. 展开更多

关键词 荧光原位杂交 常规染色体核型分析 骨髓增生异常综合征

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