目的：应用大鼠血清建立大鼠体外软骨细胞退变模型。方法：取出生24 h SD大鼠关节处软骨，Ⅱ型胶原酶多次消化后获得原代软骨细胞，取原代细胞进行实验。软骨细胞分别用含10％胎牛血清的DMEM （对照组）、含50 ng／mL 白细胞介素（ IL ...目的：应用大鼠血清建立大鼠体外软骨细胞退变模型。方法：取出生24 h SD大鼠关节处软骨，Ⅱ型胶原酶多次消化后获得原代软骨细胞，取原代细胞进行实验。软骨细胞分别用含10％胎牛血清的DMEM （对照组）、含50 ng／mL 白细胞介素（ IL ）－1β＋10％胎牛血清的 DMEM （ IL－1β组）、含2．5％大鼠血清的DMEM（2．5％血清组）及含5．0％大鼠血清的DMEM（5．0％血清组）中培养。培养24 h后，观察细胞形态变化，MTT法检测各组细胞的增殖情况，蛋白质印迹法检测增殖细胞核抗原的表达和Ⅱ型胶原及MMP－13的表达，实时定量PCR检测退变相关基因ADAMTS5、MMP－9、Aggrecan和SOX－9的表达。结果：两血清组和IL－1β组的软骨形态均由原来的多角形变成长梭形，且两血清组和IL－1β组均促进软骨细胞的增殖，下调转录因子SOX－9和上调基质降解酶MMP－13、MMP－9、ADAMTS5的表达。结论：大鼠血清具有促进软骨退变的作用，可用于建立体外软骨退变模型。展开更多
