目的：应用大鼠血清建立大鼠体外软骨细胞退变模型。方法：取出生24 h SD大鼠关节处软骨，Ⅱ型胶原酶多次消化后获得原代软骨细胞，取原代细胞进行实验。软骨细胞分别用含10％胎牛血清的DMEM （对照组）、含50 ng／mL 白细胞介素（ IL ...目的：应用大鼠血清建立大鼠体外软骨细胞退变模型。方法：取出生24 h SD大鼠关节处软骨，Ⅱ型胶原酶多次消化后获得原代软骨细胞，取原代细胞进行实验。软骨细胞分别用含10％胎牛血清的DMEM （对照组）、含50 ng／mL 白细胞介素（ IL ）－1β＋10％胎牛血清的 DMEM （ IL－1β组）、含2．5％大鼠血清的DMEM（2．5％血清组）及含5．0％大鼠血清的DMEM（5．0％血清组）中培养。培养24 h后，观察细胞形态变化，MTT法检测各组细胞的增殖情况，蛋白质印迹法检测增殖细胞核抗原的表达和Ⅱ型胶原及MMP－13的表达，实时定量PCR检测退变相关基因ADAMTS5、MMP－9、Aggrecan和SOX－9的表达。结果：两血清组和IL－1β组的软骨形态均由原来的多角形变成长梭形，且两血清组和IL－1β组均促进软骨细胞的增殖，下调转录因子SOX－9和上调基质降解酶MMP－13、MMP－9、ADAMTS5的表达。结论：大鼠血清具有促进软骨退变的作用，可用于建立体外软骨退变模型。展开更多
目的:运用网络药理学方法建立补阳还五汤靶点-疾病网络,挖掘补阳还五汤治疗勃起功能障碍(erectile dysfunction,ED)的作用机制。方法:运用中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database ...目的:运用网络药理学方法建立补阳还五汤靶点-疾病网络,挖掘补阳还五汤治疗勃起功能障碍(erectile dysfunction,ED)的作用机制。方法:运用中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)收集补阳还五汤组成药物的主要活性成分,采用Swiss target prediction和TCMSP靶点预测工具预测药物成分潜在作用靶点,在GENECARDS等多个数据库获取ED相关靶标。寻找复方成分与疾病共有靶标,应用拓扑分析明确重要靶点,借助AVID在线工具进行关键作用靶点的基因本体论功能富集分析(gene ontology,GO)和KEGG富集(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析。最后通过Cytoscape 3.5.1构建补阳还五汤中药-靶点-疾病可视化网络图。结果:补阳还五汤中共收集到符合条件的活性成分73个,其中黄芪18个,当归尾2个,赤芍14个,川芎6个,桃仁18个,红花15个。这些活性成分有621个潜在靶标,ED疾病靶标308个,补阳还五汤靶标基因与ED疾病靶标基因的交集基因有71个,其中hub节点36个。对这36个关键作用靶点进行整合分析发现,补阳还五汤主要通过细胞因子与细胞因子受体的相互作用、PI3K-Akt信号通路、肿瘤坏死因子信号通路、核转录因子κB信号通路、HIF-1信号通路、NOD样受体信号通路、Jak-STAT信号通路、p53信号通路、前列腺癌等途径实现对基因表达的干预,从而治疗ED。结论:网络药理学方法揭示补阳还五汤治疗ED是多成分、多靶点、多条信号通路共同作用的结果。展开更多
文摘目的:运用网络药理学方法建立补阳还五汤靶点-疾病网络,挖掘补阳还五汤治疗勃起功能障碍(erectile dysfunction,ED)的作用机制。方法:运用中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)收集补阳还五汤组成药物的主要活性成分,采用Swiss target prediction和TCMSP靶点预测工具预测药物成分潜在作用靶点,在GENECARDS等多个数据库获取ED相关靶标。寻找复方成分与疾病共有靶标,应用拓扑分析明确重要靶点,借助AVID在线工具进行关键作用靶点的基因本体论功能富集分析(gene ontology,GO)和KEGG富集(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析。最后通过Cytoscape 3.5.1构建补阳还五汤中药-靶点-疾病可视化网络图。结果:补阳还五汤中共收集到符合条件的活性成分73个,其中黄芪18个,当归尾2个,赤芍14个,川芎6个,桃仁18个,红花15个。这些活性成分有621个潜在靶标,ED疾病靶标308个,补阳还五汤靶标基因与ED疾病靶标基因的交集基因有71个,其中hub节点36个。对这36个关键作用靶点进行整合分析发现,补阳还五汤主要通过细胞因子与细胞因子受体的相互作用、PI3K-Akt信号通路、肿瘤坏死因子信号通路、核转录因子κB信号通路、HIF-1信号通路、NOD样受体信号通路、Jak-STAT信号通路、p53信号通路、前列腺癌等途径实现对基因表达的干预,从而治疗ED。结论:网络药理学方法揭示补阳还五汤治疗ED是多成分、多靶点、多条信号通路共同作用的结果。
