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替加环素单药及与5种抗菌药物联用对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的体外抑菌及生物膜清除作用研究 被引量:11
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作者 李佳慧 陈华乐 +4 位作者 张能华 周翠 张艺之 王冲 周铁丽 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 2018年第2期121-126,共6页
目的评价替加环素单用及与其他5种临床常用抗菌药物分别联合使用,对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(carbapenems-resistant Acinetobacter baumannii,CRAB)的体外抑菌及生物膜清除作用。方法微量肉汤稀释法测定替加环素、阿米卡星、美罗培南... 目的评价替加环素单用及与其他5种临床常用抗菌药物分别联合使用,对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(carbapenems-resistant Acinetobacter baumannii,CRAB)的体外抑菌及生物膜清除作用。方法微量肉汤稀释法测定替加环素、阿米卡星、美罗培南、环丙沙星、黏菌素和舒巴坦对42株CRAB的最低抑菌浓度(minimal inhibititory concentration,MIC)和最低生物被膜清除浓度(minimal biofilm eradication concentration,MBEC)。棋盘稀释法测定替加环素分别联用阿米卡星、美罗培南、环丙沙星、黏菌素和舒巴坦对42株CRAB的MIC值和MBEC值,并计算分级抑菌浓度指数(fractional inhibitory concentration index,FICI)和分级生物膜清除浓度指数(fractional eradication concentration index,FECI)。结果替加环素与5种抗菌药物分别联用后,对CRAB的抑菌作用和生物被膜清除作用表现为协同或无关,均未发现拮抗现象。其中替加环素与阿米卡星联用后具有较高的协同抑菌率(47.6%,20/42),而替加环素与环丙沙星联用后则具有较高的生物膜协同清除率(30.9%,13/42)。结论与单药相比,替加环素与5种药物分别联用,对CRAB的体外抑菌及生物膜清除作用具有一定的增强效果。 展开更多
关键词 耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌 替加环素 药物联用 微量肉汤稀释法 棋盘稀释法
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circKEAP1通过影响miR-661/LIF轴促进骨肉瘤细胞增殖和迁移 被引量:2
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作者 黄晓文 张能华 +3 位作者 陈兴英 袁梅 费春霞 徐屹宁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1856-1865,共10页
目的:探讨环状RNA circKEAP1通过影响微小RNA-661(miR-661),进而调控白血病抑制因子(LIF)基因促进骨肉瘤细胞凋亡和迁移的作用及其机制。方法:采用RT-qPCR探究不同骨肉瘤细胞系和成骨细胞hFOB1.19对照中circKEAP1的表达量,并通过一代测... 目的:探讨环状RNA circKEAP1通过影响微小RNA-661(miR-661),进而调控白血病抑制因子(LIF)基因促进骨肉瘤细胞凋亡和迁移的作用及其机制。方法:采用RT-qPCR探究不同骨肉瘤细胞系和成骨细胞hFOB1.19对照中circKEAP1的表达量,并通过一代测序验证其成环剪切位点。通过PCR验证circKEAP1在互补DNA与基因组DNA中的表达,并探究其在放线菌素D作用下的降解速率。构建circKEAP1的小干扰RNA,敲减circKEAP1后通过CCK-8、流式细胞术和细胞迁移实验评估骨肉瘤细胞143B活力、凋亡和迁移的改变。萤光素酶报告基因实验评估circKEAP1与miR-661的结合情况。通过CCK-8、流式细胞术和细胞迁移实验评估miR-661抑制剂对circKEAP1敲减的影响。转录组测序结合生物信息学分析预测circKEAP1的下游靶基因,并通过萤光素酶报告基因实验评估miR-661与LIF的结合情况。通过CCK-8、流式细胞术和细胞迁移实验评估LIF过表达对circKEAP1敲减的影响。结果:RT-qPCR结果显示,与成骨细胞hFOB1.19相比,多种骨肉瘤细胞系高表达circKEAP1(P<0.01)。circKEAP1存在于互补DNA中,而不存在于基因组DNA中,并且相对于其母基因KEAP1具有更好的稳定性。敲减circKEAP1显著抑制了143B细胞的生长,促进其凋亡,增加其迁移能力(P<0.01)。萤光素酶报告基因实验结果显示circKEAP1能与miR-661结合(P<0.01)。miR-661抑制剂可逆转敲减circKEAP1介导的细胞活力降低、凋亡增加和迁移能力减弱(P<0.01)。转录组测序结合生物信息学分析锁定下游靶基因LIF。萤光素酶报告基因实验结果显示miR-661能结合LIF(P<0.01)。RT-qPCR结果显示,敲减circKEAP1显著下调了LIF的mRNA水平(P<0.01)。在143B细胞中过表达LIF可逆转敲减circKEAP1介导的细胞活力降低、凋亡增加和迁移能力减弱(P<0.01)。结论:环状RNA circKEAP1能吸附miR-661,进而调控其下游靶基因LIF。circKEAP1-miR-661-LIF轴可能在骨肉瘤细胞的发生与进展中发挥重要作用。 展开更多
关键词 circKEAP1 骨肉瘤 细胞凋亡 细胞迁移 miR-661/LIF轴
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