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亲环素D介导的线粒体通透性转换孔开放对骨肉瘤MG63细胞生物学行为的影响
被引量：
1
1
作者
刘一
夏德佳
+5 位作者
赵柔
王旭彤
赵岳
马玉芳
王文军
张玲
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2024年第5期602-607,共6页
目的:探讨干扰线粒体关键蛋白亲环素D(CypD)对骨肉瘤MG63细胞增殖、迁移、凋亡等生物学行为的影响。方法:构建3种转染不同siRNA的MG63细胞系,分别为CypD-siRNA1、CypD-siRNA2和CypD-siRNA3组,采用qRT-PCR和Western blot检测3组细胞中Cyp...
目的:探讨干扰线粒体关键蛋白亲环素D(CypD)对骨肉瘤MG63细胞增殖、迁移、凋亡等生物学行为的影响。方法:构建3种转染不同siRNA的MG63细胞系,分别为CypD-siRNA1、CypD-siRNA2和CypD-siRNA3组,采用qRT-PCR和Western blot检测3组细胞中CypD的表达水平,筛选用于后续实验的CypD-siRNA。将MG63细胞分为阴性对照组(转染siRNA-NC)和敲减组(转染CypD-siRNA2)。采用CCK-8法和平板克隆实验检测细胞的增殖能力,Transwell小室实验检测细胞的迁移能力;采用MitoSOX Red检测线粒体活性氧(mROS)水平,钙黄绿素-钴评价线粒体通透性转换孔的开放状态;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞迁移和凋亡相关蛋白的表达。结果:与CypD-siRNA1组和CypD-siRNA3组相比,CypD-siRNA2组中CypD mRNA和蛋白表达水平下降(P<0.05)。与阴性对照组相比,敲减组细胞克隆形成数和迁移数减少,细胞增殖能力下降,细胞凋亡率升高,N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低(P<0.05),Bax/Bcl-2、Cleaved Caspase 3/Caspase 3以及E-cadherin和细胞色素C蛋白表达水平升高(P<0.05)。敲减组细胞mROS水平高于阴性对照组,而线粒体通透性转换孔开放程度低于阴性对照组(P<0.05)。结论:敲减CypD表达可上调MG63细胞氧化应激水平,抑制其增殖、迁移能力,并通过线粒体途径诱导其凋亡。
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关键词
骨肉瘤
亲环素D
线粒体通透性转换孔
生物学行为
MG63细胞
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职称材料
题名
亲环素D介导的线粒体通透性转换孔开放对骨肉瘤MG63细胞生物学行为的影响
被引量：
1
1
作者
刘一
夏德佳
赵柔
王旭彤
赵岳
马玉芳
王文军
张玲
机构
华北理工大学公共卫生学院儿少卫生与妇幼保健学教研室
济宁
医学
院护理学院妇儿护理学教研室
济南大家医学检验有限公司临床实验室
济宁
医学
院附属医院
医学
检验
科
滨州
医学
院公共卫生学院儿少卫生与妇幼保健学教研室
潍坊护理职业学院党政办公室
出处
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2024年第5期602-607,共6页
基金
山东省自然科学基金项目(ZR2021QH294)
济宁医学院贺林院士新医学临床转化工作站科研基金项目(JYHL2022MS02)。
文摘
目的:探讨干扰线粒体关键蛋白亲环素D(CypD)对骨肉瘤MG63细胞增殖、迁移、凋亡等生物学行为的影响。方法:构建3种转染不同siRNA的MG63细胞系,分别为CypD-siRNA1、CypD-siRNA2和CypD-siRNA3组,采用qRT-PCR和Western blot检测3组细胞中CypD的表达水平,筛选用于后续实验的CypD-siRNA。将MG63细胞分为阴性对照组(转染siRNA-NC)和敲减组(转染CypD-siRNA2)。采用CCK-8法和平板克隆实验检测细胞的增殖能力,Transwell小室实验检测细胞的迁移能力;采用MitoSOX Red检测线粒体活性氧(mROS)水平,钙黄绿素-钴评价线粒体通透性转换孔的开放状态;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞迁移和凋亡相关蛋白的表达。结果:与CypD-siRNA1组和CypD-siRNA3组相比,CypD-siRNA2组中CypD mRNA和蛋白表达水平下降(P<0.05)。与阴性对照组相比,敲减组细胞克隆形成数和迁移数减少,细胞增殖能力下降,细胞凋亡率升高,N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低(P<0.05),Bax/Bcl-2、Cleaved Caspase 3/Caspase 3以及E-cadherin和细胞色素C蛋白表达水平升高(P<0.05)。敲减组细胞mROS水平高于阴性对照组,而线粒体通透性转换孔开放程度低于阴性对照组(P<0.05)。结论:敲减CypD表达可上调MG63细胞氧化应激水平,抑制其增殖、迁移能力,并通过线粒体途径诱导其凋亡。
关键词
骨肉瘤
亲环素D
线粒体通透性转换孔
生物学行为
MG63细胞
Keywords
osteosarcoma
cyclophilin D
mitochondrial permeability transition pore
biological behavior
MG63 cell
分类号
R738.1 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
亲环素D介导的线粒体通透性转换孔开放对骨肉瘤MG63细胞生物学行为的影响
刘一
夏德佳
赵柔
王旭彤
赵岳
马玉芳
王文军
张玲
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2024
1
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