鸭坦布苏病毒E蛋白的原核表达

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作者 王家宇 张弛 +2 位作者 王林 张朕鹏 刁有江 《家禽科学》 2025年第7期17-23,I0006,I0007,共9页

E蛋白是坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)的主要抗原。为利用原核表达系统表达该抗原,本研究参照GenBank中已发表的鸭坦布苏病毒E基因序列,通过基因合成技术将E基因连接到克隆载体;在此基础上,运用同源重组技术使E基因与原核表达载体pET-... E蛋白是坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)的主要抗原。为利用原核表达系统表达该抗原,本研究参照GenBank中已发表的鸭坦布苏病毒E基因序列,通过基因合成技术将E基因连接到克隆载体;在此基础上,运用同源重组技术使E基因与原核表达载体pET-28a(+)进行重组,构建重组质粒pET28a-TMUV-E,并将该质粒转化至BL21(DE3)表达菌株,在IPTG诱导培养下表达重组蛋白。SDS-PAGE结果分析显示,表达的重组蛋白分子量约为54.58kDa,与预期蛋白条带大小基本一致;为获取更纯净的目的蛋白以满足下游试验需求,本研究对表达获得的E蛋白进行了融合蛋白的Ni柱亲和纯化;纯化结果表明,目的蛋白全部结合到层析柱,SDS-PAGE显示目的蛋白纯化效果良好,无杂带。综上所述,本研究成功构建了原核表达重组载体pET28a-TMUV-E,且E蛋白可在大肠杆菌中正确表达。 展开更多

关键词 鸭坦布苏病毒 E蛋白 原核表达 纯化

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防治鸡大肠杆菌病复方中药口服液的筛选 被引量：2

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作者 刘月月 林树乾 +4 位作者 王林 张天莲 殷斌 杨世发 黄中利 《家禽科学》 2023年第10期6-11,共6页

为探究复方中药对鸡大肠杆菌病的防治效果,依据清热燥湿止痢、清热泻火健脾止痢、清热燥湿凉血止痢和清热泻火凉血止痢的原则自拟4个组方,同时用清热解毒、凉血止痢的白头翁汤作为阳性药物,煎煮法获得药液,分别进行了体外、体内抗菌效... 为探究复方中药对鸡大肠杆菌病的防治效果,依据清热燥湿止痢、清热泻火健脾止痢、清热燥湿凉血止痢和清热泻火凉血止痢的原则自拟4个组方,同时用清热解毒、凉血止痢的白头翁汤作为阳性药物,煎煮法获得药液,分别进行了体外、体内抗菌效果的试验。根据鸡群感染大肠杆菌后的死亡时间、肝周炎和心包炎率等指标评价其对大肠杆菌病的预防和治疗效果。结果表明,四个组方体内外对大肠杆菌均具有一定的抑制作用,其中清热泻火凉血止痢与清热燥湿凉血止痢组方的体外抑菌效果较好;清热泻火凉血止痢组方的预防效果最好,清热燥湿凉血止痢和清热泻火凉血止痢的治疗效果均较好。综合以上结果,以生石膏、千里光等为主要成分的清热泻火凉血止痢方剂具有较好的降低体温和防治鸡大肠杆菌病的效果,可在临床生产中使用。 展开更多

关键词 鸡 大肠杆菌病 复方中药口服液

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鸭肠炎病毒SORF3基因的克隆及表达载体的构建

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作者 刘存霞 吴静 +5 位作者 田雪 赵巧雅 路晓 王林 李玉峰 宋敏训 《家禽科学》 2018年第11期34-37,共4页

克隆鸭病毒性肠炎病毒(Duck Enteritis Virus,DEV)SORF3基因并进行原核表达,为研究SORF3基因功能奠定基础。以DEV基因组为模板,PCR扩增SOFR3基因克隆至表达载体pET32a,构建重组表达质粒pET32a-SORF3,将重组质粒转化至感受态细胞BL21中,I... 克隆鸭病毒性肠炎病毒(Duck Enteritis Virus,DEV)SORF3基因并进行原核表达,为研究SORF3基因功能奠定基础。以DEV基因组为模板,PCR扩增SOFR3基因克隆至表达载体pET32a,构建重组表达质粒pET32a-SORF3,将重组质粒转化至感受态细胞BL21中,IPTG诱导表达并进行SDS-PAGE及Werstern-blot鉴定。结果构建的原核表达质粒pET32aSORF3转化BL21后经IPTG诱导4h,可表达分子量约50kDa融合蛋白,Western blot显示重组蛋白可以被Anti-His标签抗体识别,表明成功构建了pET32a-SORF3原核表达质粒,并能在大肠杆菌中表达具有免疫反应性的SORF3,为SORF3基因的功能研究奠定基础。 展开更多

关键词 鸭肠炎病毒 SORF3 原核表达

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一例种鸭场沙门氏菌和大肠杆菌混感的临床诊治

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作者 刘存霞 张华 +8 位作者 盛媛 刘丽萍 刘娜 田雪 路晓 吴静 刘玉山 王林 宋敏训 《家禽科学》 2020年第3期40-42,共3页

雏鸭沙门氏菌病是由沙门氏菌感染引起的一种急性流行性传染性疾病,具有很高的致死率。某种鸭场临床上出现雏鸭零星死亡,采食量下降,剖检可见浆膜炎、包心包肝、肝脏肿大出血、脾脏出血坏死,送检样品经细菌分离、镜检、PCR检测,鉴定为沙... 雏鸭沙门氏菌病是由沙门氏菌感染引起的一种急性流行性传染性疾病,具有很高的致死率。某种鸭场临床上出现雏鸭零星死亡,采食量下降,剖检可见浆膜炎、包心包肝、肝脏肿大出血、脾脏出血坏死,送检样品经细菌分离、镜检、PCR检测,鉴定为沙门氏菌、大肠杆菌混合感染,根据药敏试验结果,联合使用头孢曲松钠、氟苯尼考治疗,效果显著。 展开更多

关键词 鸭 沙门氏菌 大肠杆菌 混感

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鹅源番鸭呼肠孤病毒的分离鉴定 被引量：7

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作者 路晓 杨晶晶 +5 位作者 丛雁方 王林 刘丽萍 高月花 亓丽红 于可响 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第1期134-138,共5页

近几年,鹅“白点病”频发。本研究从江苏沛县地区肝脏有坏死点的发病鹅中收集肝脏病料,进行病毒分离,通过RT-PCR检测、序列分析进行病毒鉴定,并回归雏鹅进行致病性试验。结果发现:该毒株在鹅胚上生长良好;回归鹅能完全复制出临床中肝脏... 近几年,鹅“白点病”频发。本研究从江苏沛县地区肝脏有坏死点的发病鹅中收集肝脏病料,进行病毒分离,通过RT-PCR检测、序列分析进行病毒鉴定,并回归雏鹅进行致病性试验。结果发现:该毒株在鹅胚上生长良好;回归鹅能完全复制出临床中肝脏出现坏死点的病变,并能从实验鹅中重新分离到该病毒;对其主要抗原基因σC进行测序比对和进化树分析发现,其与番鸭呼肠孤病毒基因序列的进化关系较近,同源性为89.6~98.9%。本研究证实了鹅“白点病”的病原为番鸭呼肠孤病毒,为该病的防控奠定了基础。 展开更多

关键词 鹅源 番鸭呼肠孤病毒 分离 鉴定

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金芩蓝口服液中连翘苷含量测定方法的改进 被引量：1

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作者 冉蓉 生立嵩 +7 位作者 杨艳艳 张露萍 李亦奇 王林 吴雪旖 冯静 邓锐涵 周紫冲 《中兽医医药杂志》 CAS 2021年第1期62-64,共3页

改进金芩蓝口服液中连翘苷的含量测定方法。通过对超声溶剂及超声时间的比较,优选出供试品的制备方法。结果显示金芩蓝口服液中连翘苷含量测定的供试品溶液的制备方法为以50%甲醇为溶剂、超声10 min。说明该方法快速简便、精密度高、稳... 改进金芩蓝口服液中连翘苷的含量测定方法。通过对超声溶剂及超声时间的比较,优选出供试品的制备方法。结果显示金芩蓝口服液中连翘苷含量测定的供试品溶液的制备方法为以50%甲醇为溶剂、超声10 min。说明该方法快速简便、精密度高、稳定性、重复性好,可用于金芩蓝口服液中连翘苷的含量测定。 展开更多

关键词 金芩蓝口服液 连翘苷 含量测定

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不同免疫抗体水平下H9亚型AIV的排毒规律研究

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作者 盛媛 魏秀丽 +6 位作者 徐恩民 刘娜 吴静 艾武 宋敏训 王林 马秀丽 《家禽科学》 2020年第12期5-7,共3页

本研究旨在研究不同免疫抗体水平下H9亚型AIV的排毒规律。选取SPF鸡进行H9N2灭活疫苗免疫,根据HI效价将鸡群分成高、中、低三组,攻毒后分析其排毒差异。结果发现:抗体水平为9.44 log2时,个别鸡只仍会感染排毒,且抗体水平越低,感染排毒... 本研究旨在研究不同免疫抗体水平下H9亚型AIV的排毒规律。选取SPF鸡进行H9N2灭活疫苗免疫,根据HI效价将鸡群分成高、中、低三组,攻毒后分析其排毒差异。结果发现:抗体水平为9.44 log2时,个别鸡只仍会感染排毒,且抗体水平越低,感染排毒鸡只数量越多;当抗体水平达到11 log2时,鸡群不再排毒。 展开更多

关键词 禽流感病毒 H9亚型 不同免疫抗体水平 排毒规律

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金芩蓝口服液对鸡风热犯肺证的疗效研究 被引量：6

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作者 邓锐涵 周紫冲 +8 位作者 杨艳艳 吴雪旖 冯静 张露萍 李亦奇 冉蓉 陈洪亮 徐美荣 王林 《中国兽药杂志》 2021年第2期46-52,共7页

为探讨金芩蓝口服液对人工诱导和自然发病鸡风热犯肺证的治疗效果,以H9N2 AIV与脂多糖(LPS)为诱导因素人工建立鸡风热犯肺证,通过发病率、死亡率、临床症状等指标进行中兽医辨证来考察模型的建立情况;通过肛温变化、治愈率、有效率和无... 为探讨金芩蓝口服液对人工诱导和自然发病鸡风热犯肺证的治疗效果,以H9N2 AIV与脂多糖(LPS)为诱导因素人工建立鸡风热犯肺证,通过发病率、死亡率、临床症状等指标进行中兽医辨证来考察模型的建立情况;通过肛温变化、治愈率、有效率和无效率等指标考察金芩蓝口服液对人工诱发鸡风热犯肺证的疗效;将蛋鸡养殖场自然发病的600只200日龄的风热犯肺证患鸡随机分为两组,分别采用金芩蓝口服液与双黄连口服液进行治疗,观察记录采食情况和产蛋率,并计算治愈率、有效率、无效率和死亡率。结果显示,采用H9N2 AIV与LPS混合感染配合热应激的方式成功建立鸡风热犯肺证的动物模型;金芩蓝高剂量组治愈率和总有效率分别为90%、95%,金芩蓝中剂量组治愈率和总有效率为85%、95%,与模型对照组相比,皆具有极显著的统计学意义(P<0.01);而自然发病的鸡风热犯肺证病鸡,经金芩蓝口服治疗,治愈率达89%,总有效率达96.3%。结果表明,金芩蓝口服液可有效的治疗鸡风热犯肺证。 展开更多

关键词 金芩蓝口服液 鸡 风热犯肺证模型 临床疗效

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新制剂技术在兽药中的应用及发展 被引量：5

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作者 王晓艺 王林 +1 位作者 郭梦鸿 冉荣 《家禽科学》 2017年第6期51-54,共4页

新制剂技术的广泛应用可对兽药的质量、稳定性、疗效、生物利用度等起到至关重要的作用,阐述了现代应用较多的几项新制剂技术在兽药领域的应用及发展,以期为兽药新剂型的探索与研究提供理论参考。

关键词 新制剂技术 兽药 新剂型

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一例肉鸡呼吸道疾病的诊疗体会

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作者 王晓艺 宋玉彬 《家禽科学》 2017年第5期36-37,共2页

近年来，肉食鸡呼吸道疾病的流行一直比较严重，不仅发病面积广泛，而且发病率和死亡率都比较高，给养鸡业造成很大危害。肉食鸡呼吸道疾病主要发生于30日龄以内的鸡群，其中以10～25日龄雏鸡最易感染，鸡群发病日龄越小其发病率和死亡... 近年来，肉食鸡呼吸道疾病的流行一直比较严重，不仅发病面积广泛，而且发病率和死亡率都比较高，给养鸡业造成很大危害。肉食鸡呼吸道疾病主要发生于30日龄以内的鸡群，其中以10～25日龄雏鸡最易感染，鸡群发病日龄越小其发病率和死亡率越高，本病一年四季均可发生．尤其冬春季节天气寒冷、大风、气候突变以及受冷热应激时多发。 展开更多

关键词 鸡呼吸道疾病 肉食 诊疗 30日龄 发病率 发病日龄 冬春季节 一年四季

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鸭坦布苏病毒E蛋白重组乳酸菌的构建与鉴定

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作者 张弛 高玉宸 +3 位作者 杨晶 王林 张朕鹏 刁有江 《家禽科学》 2025年第8期1-7,I0006,共8页

E蛋白为鸭坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)表面的囊膜蛋白,是该病毒主要的抗原蛋白。为构建表达鸭坦布苏病毒E蛋白的重组乳酸菌,本研究首先通过比对GenBank中已发布的DTMUVE基因序列,扩增E基因全长并纯化,构建pMD19-T-E重组克隆载体;以p... E蛋白为鸭坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)表面的囊膜蛋白,是该病毒主要的抗原蛋白。为构建表达鸭坦布苏病毒E蛋白的重组乳酸菌,本研究首先通过比对GenBank中已发布的DTMUVE基因序列,扩增E基因全长并纯化,构建pMD19-T-E重组克隆载体;以pMD19-T-E重组载体为基础,利用同源重组技术将E基因重组至乳酸菌载体pNZ8149,菌液PCR及测序表明,本研究成功构建了pNZ8149-TMUV-E重组乳酸菌表达载体。SDS-PAGE试验结果显示重组乳酸菌pNZ8149-TMUV-E可成功表达E蛋白。综上所述,本研究成功构建了能够表达鸭坦布苏病毒E蛋白的重组乳酸菌,为进一步开发鸭坦布苏病毒病的新型疫苗奠定了基础。 展开更多

关键词 鸭坦布苏病毒 E蛋白 乳酸菌

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