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抗菌肽NK-lysin生物信息学分析及其抑菌作用研究 被引量:1
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作者 赖隆永 刘友霖 +6 位作者 刘小龙 谭礼宁 吴昌标 杨慧 余勋信 杨守深 徐磊 《江西农业学报》 CAS 2019年第9期95-101,共7页
为分析猪源抗菌肽NK-lysin的理化性质和蛋白结构,并研究猪源抗菌肽在小鼠体内的抑菌效果,以猪小肠组织cDNA为模板进行PCR扩增和测序,通过生物信息学相关软件和工具对其测序结果进行分析。试验选用60只小鼠,随机分为4组(预防组、细菌模... 为分析猪源抗菌肽NK-lysin的理化性质和蛋白结构,并研究猪源抗菌肽在小鼠体内的抑菌效果,以猪小肠组织cDNA为模板进行PCR扩增和测序,通过生物信息学相关软件和工具对其测序结果进行分析。试验选用60只小鼠,随机分为4组(预防组、细菌模型组、治疗组和对照组),设置不同的大肠杆菌和猪源抗菌肽给药方案。结果表明,猪源抗菌肽NK-lysin为稳定的,半衰期在大肠杆菌中(体内)长,与白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)和颗粒性蛋白B(Granzyme B,GZMB)具有相互作用;预防组和治疗组小鼠存活率分别为80.00%和86.67%。综上所述,猪源抗菌肽在小鼠体内安全且具有一定的抑菌作用。 展开更多
关键词 猪源抗菌肽 抑菌 生物信息学 大肠杆菌 预防
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猪脾转移因子提高LaSota株鸡新城疫弱毒疫苗的免疫保护率 被引量:5
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作者 徐磊 钟佳莲 +8 位作者 余勋信 刘毅发 黄瑜 刘小龙 赖隆永 闫丽萍 许秀梅 宋素泉 张渊魁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期3578-3587,共10页
旨在了解猪脾转移因子(TF)对新城疫病毒(NDV)弱毒疫苗LaSota株的免疫增强效果及机制。本研究分别采用不同剂量(10^(-2)、10^(-3)、10^(-4)、10^(-5)羽份)LaSota疫苗株单独(单独免疫组)、LaSota疫苗株与TF联合(联合免疫组)免疫SPF鸡,14 ... 旨在了解猪脾转移因子(TF)对新城疫病毒(NDV)弱毒疫苗LaSota株的免疫增强效果及机制。本研究分别采用不同剂量(10^(-2)、10^(-3)、10^(-4)、10^(-5)羽份)LaSota疫苗株单独(单独免疫组)、LaSota疫苗株与TF联合(联合免疫组)免疫SPF鸡,14 d后以NDV F 48 E 9强毒攻毒,同时设立对照组(非免疫攻毒)和空白组(非免疫非攻毒),并采用ELISA方法与蛋白质芯片技术分别测定外周血IL-4、IFN-γ与IL-12 P40浓度。结果显示,鸡免疫10^(-2)、10^(-3)、10^(-4)、10^(-5)羽份时疫苗攻毒保护率和半数保护量(PD_(50))如下:单独免疫组分别为100%、55%、0%、0%和0.0008羽份,联合免疫组分别为100%、75%、0%、0%和0.0005羽份,对照组和空白组死亡率分别为100%和0%。免疫10^(-3)羽份疫苗后,联合免疫组IL-4和IFN-γ含量均高于其他组,并于第7、14天差异极显著(P<0.01);攻毒后,联合免疫组IL-4、IFN-γ和IL-12 P40含量均高于其他组,IL-4于第1、14天,IFN-γ于第1、3天,IL-12 P40于第1天差异极显著(P<0.01)。综上表明,TF可增强IFN-γ、IL-12介导的细胞免疫和IL-4介导的体液免疫,提高LaSota株弱毒疫苗的免疫保护率,降低疫苗PD_(50);在抵抗NDV F 48 E 9强毒攻击时,联合免疫组的免疫保护率明显高于单独免疫组。 展开更多
关键词 猪脾转移因子 鸡新城疫弱毒LaSota株 鸡新城疫强毒F_(48)E_(9)株 免疫保护率 细胞因子
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转移因子对猪淋巴细胞E玫瑰花结百分率影响的测试研究 被引量:4
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作者 徐磊 薛萍 +8 位作者 林祚贵 刘俊斌 谭礼宁 刘小龙 王晓斌 叶盛聪 杨慧 黄瑜 朱国强 《福建畜牧兽医》 2018年第6期11-14,共4页
为了解转移因子(TF)对猪淋巴细胞E玫瑰花结百分率的影响,试验采用肌肉注射TF途径接种试验组猪,注射剂量为2.0 mL/头,同时设立对照组仅注射生理盐水,分别于接种注射前第3 d及接种注射后第3 d、7 d、14 d、21 d采集外周血,测试猪淋巴细胞... 为了解转移因子(TF)对猪淋巴细胞E玫瑰花结百分率的影响,试验采用肌肉注射TF途径接种试验组猪,注射剂量为2.0 mL/头,同时设立对照组仅注射生理盐水,分别于接种注射前第3 d及接种注射后第3 d、7 d、14 d、21 d采集外周血,测试猪淋巴细胞E玫瑰花结百分率。结果显示,试验组猪淋巴细胞E玫瑰花结百分率,于注射TF后第3 d、7 d及14 d均显著高于对照组(P<0.05),分别比对照组提高了14.6%、22.0%和14.9%。结果表明,TF可显著提高猪外周血淋巴细胞E玫瑰花结百分率和猪免疫功能。 展开更多
关键词 转移因子 肌肉注射 淋巴细胞E玫瑰花结百分率
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猪脾转移因子注射液热原检查研究 被引量:1
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作者 徐磊 朱晓玮 +6 位作者 周永银 许秀梅 杜君 刘小龙 赖隆永 林祚贵 黄瑜 《福建畜牧兽医》 2019年第6期1-3,共3页
为了建立猪脾转移因子(TF)的热原检查方法及对TF制造工艺进行验证,按照现行《中国兽药典》附录"热原检查法",对本课题组已授权国家发明专利制备的3批TF开展热原检查研究,将TF以0.5 mL/kg剂量经耳静脉注入每只家兔后,各家兔的... 为了建立猪脾转移因子(TF)的热原检查方法及对TF制造工艺进行验证,按照现行《中国兽药典》附录"热原检查法",对本课题组已授权国家发明专利制备的3批TF开展热原检查研究,将TF以0.5 mL/kg剂量经耳静脉注入每只家兔后,各家兔的体温升高值均小于0.6℃,且各组的3只家兔体温升高值总和均小于1.3℃。结果显示,3批TF热原检查结果均符合现行《中国兽药典》规定。结果表明,发明专利制造工艺可有效去除热原,保证TF制品的安全性。 展开更多
关键词 转移因子 专利制造工艺 热原检查 家兔 安全性
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猪脾转移因子注射液异常毒性检查研究
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作者 徐磊 游开铿 +11 位作者 郑青 林祚贵 郜飞燕 胡小榕 傅光华 施少华 刘小龙 许秀梅 杜君 廖惠珍 黄瑜 张渊魁 《福建畜牧兽医》 2020年第6期8-10,共3页
本研究旨在建立猪脾转移因子(TF)的异常毒性检查方法,并对本发明专利TF制造技术进行工艺验证,按照现行《中国兽药典》附录中“异常毒性检查法”,通过小鼠动物模型建立异常毒性检查方法,对本课题组已授权国家发明专利技术所制备3批TF进... 本研究旨在建立猪脾转移因子(TF)的异常毒性检查方法,并对本发明专利TF制造技术进行工艺验证,按照现行《中国兽药典》附录中“异常毒性检查法”,通过小鼠动物模型建立异常毒性检查方法,对本课题组已授权国家发明专利技术所制备3批TF进行异常毒性检查,将TF以0.5 mL/只剂量经腹腔注入小鼠,3组共15只小鼠于腹腔注射后48 h内均健活,均未出现异常情况。结果显示,3批TF无异常毒性且异常毒性检查结果均符合现行《中国兽药典》规定。结果表明,本发明专利TF制造技术对异常毒性的控制效果良好,对TF的安全性提供了保证。 展开更多
关键词 转移因子 专利制造工艺 异常毒性检查 小鼠 安全性
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猪源抗菌肽对禽源沙门氏菌和大肠杆菌的抑菌作用 被引量:5
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作者 刘小龙 赖隆永 +8 位作者 谭礼宁 刘友霖 徐磊 吴昌标 杨守深 杨慧 余勋信 程龙飞 黄瑜 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期575-580,共6页
【目的】明确猪源抗菌肽对禽源沙门氏菌和大肠杆菌的抑菌作用,为新型抗菌药物的研发和猪源抗菌肽的生产应用提供科学依据。【方法】以猪源抗菌肽为材料,采用液体培养基抑制测定法,结合体内外试验,分别测定猪源抗菌肽对禽源沙门氏菌和禽... 【目的】明确猪源抗菌肽对禽源沙门氏菌和大肠杆菌的抑菌作用,为新型抗菌药物的研发和猪源抗菌肽的生产应用提供科学依据。【方法】以猪源抗菌肽为材料,采用液体培养基抑制测定法,结合体内外试验,分别测定猪源抗菌肽对禽源沙门氏菌和禽源大肠杆菌的抗菌活力值,研究其体内外抑菌作用。【结果】对不同浓度的抗菌肽抗菌活力值的测定结果表明,与0.5、0.2和0.1mg·mL-1的猪源抗菌肽相比较,1.0mg·mL-1的抗菌肽对含有106CFU·mL-1的菌液抑菌效果最好;与阿莫西林、红霉素、四环素等15种抗生素相比较,猪源抗菌肽对禽源沙门氏菌FJS13株和禽源大肠杆菌FJE61株的抑菌圈最大,其抗菌效果最好;抗菌肽在雏鸡体内的抑菌试验表明,攻毒鸡皮下注射猪源抗菌肽有利于提高雏鸡的存活率,在雏鸡体内也具有一定的抑菌作用。【结论】猪源抗菌肽可用于抑制禽源沙门氏菌和大肠杆菌。 展开更多
关键词 猪源抗菌肽 抗菌活力值 抑制作用 沙门氏菌 大肠杆菌 雏鸡
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一株塞内卡病毒A全基因组序列测定与致病性分析 被引量:3
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作者 赖隆永 刘小龙 +5 位作者 谭礼宁 叶盛聪 邱灵姗 陈盛勇 刘楚楚 徐磊 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期820-826,共7页
本研究旨在明确塞内卡病毒A(Senecavirus A,SVA)FJLY株的基因组特性及其与其他毒株的同源性关系,并了解SVA-FJLY株的致病性。以分离自福建省某养殖场中的一株SVA-FJLY株为研究对象,参照其原型毒株SVV-001(GenBank No.DQ641257.1)全基因... 本研究旨在明确塞内卡病毒A(Senecavirus A,SVA)FJLY株的基因组特性及其与其他毒株的同源性关系,并了解SVA-FJLY株的致病性。以分离自福建省某养殖场中的一株SVA-FJLY株为研究对象,参照其原型毒株SVV-001(GenBank No.DQ641257.1)全基因组序列设计5对引物,通过RT-PCR扩增、测序、拼接,获得SVA-FJLY株全基因组序列并进行序列分析;并通过滴鼻攻毒3~4周龄仔猪。结果表明,SVA-FJLY株基因组全长7275 bp(不包括PolyA),SVA-FJLY株基因组存在一个多聚蛋白、VP1蛋白和VP2蛋白。SVA-FJLY株与参考毒株之间的基因组一级结构有较高的相似性,与HeB01-2017株(MF967574.1)相似性最高,达98.5%;而与SVA原型毒株SVV-001株(DQ641257.1)的相似性较低,为93.9%。SVA-FJLY株与国内几个毒株属于同一个分支,与国内的HeB01-2017株亲缘关系最近,同时与国外Colombia-2016株(KX857728.1)的亲缘关系最近。通过动物试验发现试验组猪攻毒10 d后,试验组2/3发病,对照组3/3正常,未出现仔猪死亡。通过全基因组序列测定获得了SVA-FJLY株全基因组序列并进行序列分析,明确SVA-FJLY株的基因组特性及其与其他毒株的相似性关系,了解了SVA-FJLY株的致病性,为SVA的反向遗传学和疫苗的研制提供参考依据,同时也丰富了SVA的基因组信息数据库。 展开更多
关键词 塞内卡病毒A RT-PCR扩增 序列分析 遗传进化树 同源性 SVA-FJLY株 致病性
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猪小肠抗菌肽对小鼠迟发型变态反应的影响试验 被引量:2
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作者 刘小龙 赖隆永 +5 位作者 马绍伟 陈盛勇 叶盛聪 徐磊 杨慧 余勋信 《福建畜牧兽医》 2020年第1期9-11,共3页
本研究旨在探索不同质量浓度的猪小肠抗菌肽对小鼠迟发型变态反应的影响和猪小肠抗菌肽的药理活性。选取36只体重在20 g左右的健康昆明小鼠,随机分成6组,分别为试验组1、试验组2、试验组3、试验组4、对照组和空白组,每组6只。试验组1、... 本研究旨在探索不同质量浓度的猪小肠抗菌肽对小鼠迟发型变态反应的影响和猪小肠抗菌肽的药理活性。选取36只体重在20 g左右的健康昆明小鼠,随机分成6组,分别为试验组1、试验组2、试验组3、试验组4、对照组和空白组,每组6只。试验组1、试验组2、试验组3、试验组4小鼠皮下注射多肽含量为0.1 mg/mL、0.3 mg/mL、0.5 mg/mL和原液0.7 mg/mL的猪小肠抗菌肽,注射剂量为0.01 mL/g;对照组及空白组分别皮下注射生理盐水,注射剂量为0.01 m L/g,连续注射7 d,之后将试验组和对照组采用二硝基氟苯(DNFB)致敏,剂量50μL/只,致敏5 d后,采用DNFB以剂量10μL/只进行二次攻击(空白组未致敏但有攻击),24 h后,以小鼠左右耳片重量之差(肿胀度)代表迟发型变态反应剧烈程度。结果显示,试验组1、2、3及4小鼠的肿胀度均值分别为9.4 mg、9.6 mg、10.1 mg和10.1 mg,均显著(P<0.05)高于对照组(7.8 mg)和空白组(0.7 mg)。结果表明,猪小肠抗菌肽对小鼠的迟发型变态反应具有增强作用,猪小肠抗菌液能够提高机体免疫水平。 展开更多
关键词 猪小肠抗菌肽 小鼠 迟发型变态反应
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法氏囊素对环磷酰胺诱导昆明小鼠免疫抑制的阻断试验
9
作者 胡万荣 吕小婷 +4 位作者 陈盛勇 刘楚楚 吴昌标 徐磊 刘友霖 《福建畜牧兽医》 2017年第5期8-10,共3页
本试验旨在探究法氏囊素(BS)对环磷酰胺(CP)诱导的昆明小鼠(KM小鼠)免疫抑制的阻断作用。选取24只3周龄KM小鼠随机分成对照组(Ⅰ)、环磷酰胺组(Ⅱ)和环磷酰胺+法氏囊素组(Ⅲ)三个组,在22日龄时,第Ⅲ组小鼠按体重腹腔注射BS 0.02 mL/g,... 本试验旨在探究法氏囊素(BS)对环磷酰胺(CP)诱导的昆明小鼠(KM小鼠)免疫抑制的阻断作用。选取24只3周龄KM小鼠随机分成对照组(Ⅰ)、环磷酰胺组(Ⅱ)和环磷酰胺+法氏囊素组(Ⅲ)三个组,在22日龄时,第Ⅲ组小鼠按体重腹腔注射BS 0.02 mL/g,同时第Ⅰ、Ⅱ组小鼠腹腔注射等量生理盐水;25日龄时,Ⅱ和Ⅲ组分别按体重注射CP 0.5 mg/g,同时第I组注射等量生理盐水,7 d后测定小鼠的生长及免疫指标。结果表明:Ⅱ组在试验期间死亡2只小鼠,其余两组未出现死亡;Ⅰ组、Ⅲ组小鼠的肝脏指数、肾脏指数均高于Ⅱ组,但差异不显著(P>0.05);Ⅰ组与Ⅲ组小鼠脾脏指数极显著高于Ⅱ组(P<0.01);Ⅰ组和Ⅲ组胸腺指数极显著高于Ⅱ组(P<0.01);白细胞计数显示,Ⅲ组白细胞数显著高于Ⅱ组(P<0.05)。CP可明显抑制小鼠脾脏和胸腺的发育,损伤免疫器官的组织结构,造成白细胞明显减少或消失,而BS可有效阻断CP的抑制作用。 展开更多
关键词 法氏囊素 环磷酰胺 小鼠免疫抑制 阻断
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三株未知菌的鉴定和药物敏感性试验
10
作者 陈建 《福建畜牧兽医》 2020年第3期18-21,共4页
本试验通过采集滥用抗生素的兔场中腹泻的、身体消瘦的大兔及不给小兔喂乳(且腹泻)的母兔脾脏和淋巴样品进行无菌检验,检出3株未知细菌。通过细菌分离、PCR扩增、药敏试验,得出3株菌分别是大肠杆菌和葡萄球菌,而且这3株菌对多种抗生素... 本试验通过采集滥用抗生素的兔场中腹泻的、身体消瘦的大兔及不给小兔喂乳(且腹泻)的母兔脾脏和淋巴样品进行无菌检验,检出3株未知细菌。通过细菌分离、PCR扩增、药敏试验,得出3株菌分别是大肠杆菌和葡萄球菌,而且这3株菌对多种抗生素产生耐药性。由此可见,抗生素的规范使用必须得到重视,怀疑发生细菌性感染时,应根据药敏试验结果和国家相关规定合理用药。 展开更多
关键词 大兔 细菌分离 PCR扩增 药敏试验
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兔病毒性出血症病毒的分离和鉴定
11
作者 陈雅冰 《福建畜牧兽医》 2023年第4期15-17,共3页
本试验对山东某兔场疑似感染兔瘟致死的病料进行中和试验、血凝和血凝抑制试验、PCR鉴定及测序比对。试验结果表明,4份分离的病毒上清液都能与1%人O型红细胞发生凝集,凝集效价均为1:1024;与兔病毒性出血症阳性血清中和反应后,对人O型红... 本试验对山东某兔场疑似感染兔瘟致死的病料进行中和试验、血凝和血凝抑制试验、PCR鉴定及测序比对。试验结果表明,4份分离的病毒上清液都能与1%人O型红细胞发生凝集,凝集效价均为1:1024;与兔病毒性出血症阳性血清中和反应后,对人O型红细胞没有凝集反应;PCR扩增结果显示4份送检样品均在286 bp位置出现了目的条带,经测序比对,该序列与中国的03/China/2016毒株VP60基因(登入号为MF669712.1)序列同源性最高,相似度为99.65%。试验结果充分说明该病毒为兔病毒性出血症病毒,该兔场流行疫病为兔瘟。 展开更多
关键词 兔病毒性出血症病毒 分离鉴定 PCR扩增 测序
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鸡法氏囊素注射液对猪T淋巴细胞E玫瑰花环结合率影响的试验
12
作者 刘小龙 《福建畜牧兽医》 2023年第6期4-5,共2页
本试验采用脱E受体法探究鸡法氏囊素注射液对猪T淋巴细胞活性的影响。将3批实验室制备的BS001批、BS002批和BS003批鸡法氏囊素注射液,分别按多肽含量稀释为1.0 mg/mL待检样品用于脱E受体法试验,同时设立Hank’s液对照组。结果显示,各试... 本试验采用脱E受体法探究鸡法氏囊素注射液对猪T淋巴细胞活性的影响。将3批实验室制备的BS001批、BS002批和BS003批鸡法氏囊素注射液,分别按多肽含量稀释为1.0 mg/mL待检样品用于脱E受体法试验,同时设立Hank’s液对照组。结果显示,各试验组猪T淋巴细胞E玫瑰花环结合率均显著高于对照组(P<0.05),分别比对照组提高了12.2%、11.6%和12.5%。结果表明,本公司实验室制备的3批鸡法氏囊素注射液能显著提高猪E玫瑰花环结合率,提高T淋巴细胞的活性,增强猪的细胞免疫功能。 展开更多
关键词 脱E受体法 鸡法氏囊素注射液 T淋巴细胞活性
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